研究方法讲座作业——对论文的分析

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5、ofFluorescenceSignals. JournaloftheAmericanChemicalSociety 2011, 134 (2),1305-1315.对H2O2、NO和H2O2/NO有三种不同荧光响应的单分子荧光探针一、文献内容综述H2O2和NO都与诸多生理过程有关。该文献设计、合成了一种探针FP-H2O2-NO，并研究了其物理性质，利用其在细胞内成像。这是第一种可以对H2O2、NO和H2O2/NO产生三种不同荧光信号的单分子荧光探针，实现高通量检测。活性氧粒子（ROS）和活性氮粒子（RNS）是与许多生理学过程密切相关的两类粒子。而其中H2O

6、2和NO则是两种重要的ROS或RNS。两种分子在细胞中达成一种微妙的平衡，可以抵抗病原体，并与许多疾病有关。之前已有一些课题组报道应用电子自旋共振（ESR）的方法检测生物体内ROS和NO。但是这种方法不能用于活体生物环境。因此荧光检测成为本论文的创新点。但是之前报道的荧光探针只能单独检测H2O2或NO，如果用混合探针则可能引发荧光信号的干扰。因此，该课题组合成的单分子荧光探针FP-H2O2-NO基于7-羟基香豆素-罗丹明体系，可以对H2O2、NO和H2O2/NO由不同的荧光响应，具有重要意义。二、实验过程及相关结果分析1、探针FP-H2O2-NO以及对照化合

7、物FP-H2O2、FP-NO的设计与合成探针 FP-H2O2-NO（文献中的figure1.）的设计主要基于以下几点考虑：（1）荧光染料的选择。荧光染料选用了7-羟基香豆素和罗丹明。7-羟基香豆素和罗丹明染料的吸收分别在400和550nm左右。因此，它们的吸收波长相互分开，可以被单独激发。此外，7-羟基香豆素和罗丹明染料的发光分别在460和580nm。也就是说它们的发光可以互相分开，在发光光谱上不会交迭。这使得它们可以在光学显微镜下同时被观测到，这也是可以对H2O2和NO双色成像的关键。（2）两种荧光染料的连接。7-羟基香豆素和罗丹明染料通过一个刚性的哌嗪基

8、团连接。刚性的连接基团确保了7-羟基香豆素-罗丹明骨