中草药复方对鳖源致病性嗜水气单胞菌的体外抑菌效应【文献综述】

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1、毕业论文文献综述水产养殖学中草药复方对鳖源致病性嗜水气单胞菌的体外抑菌效应一、实验材料1.实验菌菌株编号：ZHYYZ-1（GenBank登录号：GU563992），由浙江海洋学院水产养殖实验室安全养殖分室提供。接种于普通营养琼脂培养基，30℃振荡培养24h后用无菌生理盐水（0.85%NaCl）制成不同浓度的菌悬液，现配现用。2.培养基营养琼脂培养基(含2％NaC1)、营养肉汤培养基(含2％NaC1)。3.实验中草药提取物3种中草药提取物（10:1水提）：黄芩、蒲公英、金银花。上述药物烘干后,各取10g加水至100～200ml,浸泡30min后煎煮,煮沸后

2、文火煎30min,滤出煎液。共煎3次,将煎液浓缩至10ml(药液中生药含量为1g/ml),高压灭菌。4.实验仪器：生化培养箱（型号SHP-750）、双人单面净化工作台（型号SW-CJ-2FD）、立式自动电热压力蒸汽灭菌器（型号LDZX-40SAI）等。二、实验背景及目的中华鳖（Trionyxsinensis）俗称鳖、甲鱼、团鱼等，隶属于爬行纲、龟鳖目、鳖科、鳖属，具很高的营养、经济和药用价值，深受广大消费者青睐，是当前我国最重要的淡水养殖品种之一。致病性嗜水气单胞菌(Aleromonashydrophila)，广泛分布于自然界的各种水体，是多种水生动物的

3、原发性致病菌，为条件致病菌，是典型的人-兽-鱼共患病病原菌。在水温14.0～40.5℃范围内都可繁殖，以28.0～30.0℃为最适温度。PH值在6～11范围内均可生长；最适PH值为7.27；嗜水气单胞菌可在含盐量0‰～4‰的水生存，最适盐度为0.5。目前中华鳖各种疾病的频繁爆发，已成为限制中华鳖养殖业可持续发展的主要瓶颈之一。大量研究表明，致病性嗜水气单胞菌，既是引起养殖中华鳖爆发性死亡的主要病原，也是养殖中华鳖细菌性疾病中经济损失最为严重的致病菌，在目前已报道的25种中华鳖疾病中，由其引起的鳖病就达15种之多[1]。目前，国内外有关鳖源致病性嗜水气单胞

4、菌的研究多集中于生物学特征[2]、病原分离与鉴定[3，4，5]、病理观察[6]、毒力因子及致病力[7，8]、病原检测[9,10,11]以及免疫防病[12，13]等方面。而有关防控水生动物嗜水气单胞菌病的中草药复配组合物间比例关系的优化研究尚未见报道。在食品安全备受关注的今天，提高初级水产品质量，减少微生物和化学因素危害已成为世界关注的焦点。有效抑制养殖水域环境中致病性嗜水气单胞菌的数量密度，切实保障养殖生物正常生长与繁衍，保证养殖水产品质量安全，已成为关乎水产养殖健康发展的重要命题之一[14.15]。近四十年来，国内外有关嗜水气单胞菌的防治仍以药物防治为

5、主，但由于养殖生产上滥用抗生素、违禁药物的严重存在，已造成抗药性菌株出现、污染环境、鳖肉质下降等不良后果[16.17]。尤其是Rijker等发现，使用土霉素能够抑制哺乳动物的体液免疫，口服抗生素在对致病菌产生杀伤或抑制作用的同时也会影响动物体内正常微生物的种群，甚至破坏体内的微生态平衡。所以，寻找一种新的预防药物显得尤重要。而中草药是一种天然、环保、绿色型药物，具有高效、毒副作用小、安全性高、残留少等诸多优点，且来源广、成本低，在当前全面提倡健康养殖的新形势下，推广中草药防治鳖病，意义重大[18.19]。我国是中草药的发源地，目前大约有12000种药用植

6、物，古代先贤对中草药和中医学的深入探究和总结更是我们的宝贵财富，由于中草药具有不良反应少、毒副作用小、无残留、无公害、不易产生耐药性等特点，尤其是许多中草药不仅具有直接抗病原微生物作用，而且能增强机体的特异或非特异免疫功能，提高机体的抗病能力，故在鳖病防治方面已引起人们的广泛重视[20.21]。陈超然报道，在中华鳖稚鳖饲料中添加35mg/kg·d的甘草素，不仅具有提高供试中华鳖免疫应答水平，改善肝功能,增强抗嗜水气单胞菌感染的能力，同时还具有明显的促生长作用[22]。吴德锋等在鳖饲料中添加由连翘、板蓝根、金银花等10多种中药组成的复方中药添加剂，治疗鳖白

7、点病、红脖子病等效果显著。但目前对于中草药对致病性嗜水气单胞菌体外抑菌效应的系统定量研究仍是一个空白。本研究的主要目的是，选取对鳖源致病性嗜水气单胞菌具较好抑制效果的单味中草药，开展中草药两两复配对鳖源致病性嗜水气单胞菌的抑制作用实验，筛选出对鳖源致病性嗜水气单胞菌具明显抑制效果的协同组合，为淡水养殖动物性嗜水气单胞菌病的防治提供参考资料。三、实验操作概述1.实验菌。菌株编号：ZHYYZ-1（GenBank登录号：GU563992），由浙江海洋学院水产养殖实验室安全养殖分室提供。接种于普通营养琼脂培养基，30℃振荡培养24h后用无菌生理盐水（0.85%N

8、aCl）制成不同浓度的菌悬液，现配现用。2.培养基：营养琼脂培养基(含2％NaC