122分离土壤中的能分解纤维素微生物

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1、课题122分离土壤中的能分解纤维素微生物教学目标:1、知识与技能:1•能简述纤维素酶的种类及作用，2.能从土壤中分离出分解纤维素的微生物，了解这类微生物的应用。3.能掌握从土壤中分离某种特定微生物的操作技术。2、过程与方法：通过学习从土壤中分离某种特定微生物的操作技术，掌握实验方法。3、情感态度价值观：认真实验探究精神的培养。教学重点：从土壤中分离分解纤维素的微生物。教学难点：从土壤中分离分解纤维素的微生物。教学方法：实验、合作、探究教具使用：分离用培养基，实验器材等。学程教过教师主导活动学生主体活动课前：安排学牛预习：预

2、习提纲（见导学案）课前检查预习情况。学牛根据预习提纲进行自学。课中：引导学生探究，指导学生实验。重点提示：从混合微生物中分离某种微生物关键是培养基。想一下：我们应该怎样做？我们用到的是什么类型的培养基？（从功能上看）活动一：合作讨论问题1：为什么要在富含纤维索的环境中寻找纤维索分解菌？提示：由于生物与环境的相互依存关系，在富含纤维素的白然环境中，纤维素分解菌的含量相对提高，因此，从这种土样中获得li的微牛物的几率耍高丁•普通环境。活动二合作讨论问题2：如果找不到纤维素丰富环境，可以将滤纸埋在土壤中，将滤纸埋在土壤屮有什么作

3、用?你认为滤纸应该埋进土壤多深？提示：将滤纸埋在土壤中能使纤维素分解菌相対聚集，实际上是人工设置纤维素分解菌生存的适宜环境。纤维素分解菌是一种好氧菌，所以在埋滤纸时不应埋A深，一般应将滤纸埋于约10cm深的腐殖土壤中。活动三：合作讨论问题3：为什么选择培养能够“浓缩”所需的微牛物？提示：在选择培养的条件下，可以使那些能够适应这种营养条件的微生物得到迅速繁殖，而那些不适应这种营养条件的微生物的繁殖被抑制，因此可以起到“浓缩”的作用。活动四：合作讨论问题4：纤维索分解菌的选择培养基是液体培养基还是固体培养基?培养基对微主物是否

4、具有选择作用？提示：纤维索分解菌的选择培养基为液体培养基。因培养基中无凝固剂，利用液体选择培养基培养以增加纤维索分解菌的浓度。能够产生纤维素酶的微牛•物才能分解纤维素作为碳源和能源；不能分解纤维素的微生物由于缺乏碳源而不能正常生长繁殖，因此培养基具有选择作用。活动五:合作讨论问题5：本实验流程与第2节的实验流程有哪些异同?能否总结出分离培养微生物的一般方法？提示：土壤屮分解尿素的细菌的分离与计数和分离分解纤维素的微生物的实验流程，都经过七壤取样、梯度稀释、涂布、分离；前者需分离、学牛展示预习内容，学生动乎实验躺菌要液:♦T

5、k后置课布业预出节粘一府下O完及AI0n板的学记教札三、其他补充教学资料1.纤维素与纤维索的分解：纤维索是一种复杂的多糖，分子中人约含有儿千个单糖单元，相对分子质量约为儿十万至百万，因此是天然有机高分子化合物。人类以淀粉为主要能量来源，但完全不能消化纤维素，而反刍动物和大量的微生物则主要以纤维素为能量來源。这是因为，在反刍动物的瘤胃中生活着大量的可以分解纤维素的微生物。进入土壤的植物残体中含有人量纤维素。能分解纤维素的微生物，有各种细菌、真菌和少数放线菌。在较酸性的贫瘠土壤中分解纤维素占优势的常为真菌；在氮素丰富的中性土壤

6、屮以细菌为主；粘重土壤中（特别在热带）常为兼性厌氧细菌和真菌；干燥土壤中常以放线菌最为垂要。已经发现并用于牛产纤维素酶的菌种有绿色木霉、变异青霉、黑曲霉和根霉等，它们可分泌纤维素酶,酶促分解纤维素。2.纤维素分解菌的筛选：（1）筛选原理：刚果红（CongoRed,简称CR）是一种染料，它可以与像纤维素这样的多糖物质形成红色复合物，但并不和水解后的纤维二糖和葡萄糖发牛这种反应。当我们在含纤维素的培养基中加入刚果红时，刚果红能与培养基中的纤维素形成红色复合物。当纤维素被纤维素酶分解后，刚果红一纤维素的复合物就无法形成，培养基中

7、会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，这样，我们就可以通过是否产牛透明圈来筛选纤维索分解菌。刚果红是酸性染料，呈枣红色粉末状，能溶于水和酒秸，遇酸呈蓝色。它能作染料，也川作指示剂。它在植物制片中常作为苏木精或其他细胞染料的衬垫剂。它用来染细胞质时，能把胶质或纤维素染成红色。在动物组织制片中用来染神经轴、弹性纤维、胚胎材料等。刚果红可以跟苏木精作二重染色，也可用作类淀粉染色，山于它能溶于水和酒精，所以洗涤和脱水处理要迅速。（2）筛选方法一一刚果红染色法：常用的刚果红染色法有两种，方法一是先培养微牛物，再加入刚果红进行颜色反应。

8、方法一是传统的方法，缺点是操作繁琐，加入刚果红溶液会使菌落Z间发牛混杂；其优点是这样显示出的颜色反应I麦嚣1（采集土样时，应选择富含纤维素的环境中分离到所需要的微生物。⑦制备选择培养基：参照课木旁栏中的比例配制・微生物的实验室培养4导学案一、学习目标：掌握分离土壤中微生物的方法。二、知识构成：1.土壤屮