分解纤维素的微生物的分离(

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1、课题3分解纤维素的微生物的分离1.尿素转化成氨的反应方程式。2.筛选微生物的原理。3.选择培养基的定义。4.设置对照的目的以及方法。4.统计菌落数目的方法。5.鉴定某细菌能够分解尿素的方法。6.测定饮水中大肠杆菌的数目的而方法。计数法显微镜直接计数法、活菌计数法（间接计数）、比浊法、膜过滤法知识小结:划分标准培养基种类特点用途物理性质化学成分天然培养基合成培养基用途鉴别培养基培养基的种类不加凝固剂加凝固剂，如琼脂工业生产观察微生物的运动、分类鉴定微生物分离、鉴定、活菌计数、保藏菌种含化学成分不明确的天然物质

2、工业生产培养基成分明确分类、鉴定在培养基中加入某种化学物质,以抑制不需要的微生物的生长,促进所需要的微生物的生长培养、分离出特定微生物在培养基中加入某种指示剂或化学药品,用以鉴别不同种类的微生物鉴别不同种类微生物选择培养基液体培养基半固体培养基固体培养基纤维素是一种由葡萄糖首尾相连而成的高分子化合物，是含量最丰富的多糖类物质。植物的根、茎、叶等器官都含有大量的纤维素。纤维素能被土壤中某些微生物分解利用，这是因为它们能够产生纤维素酶。课题背景草食性动物是怎样消化食物中纤维素的？草食性动物肠胃中的共生微生物。除

3、自然环境中存在分解纤维素的微生物外，在草食性动物等的消化道内，也共生有分解纤维素的微生物，其原理也是产生纤维素酶而分解纤维素，而人没有分解纤维素的能力。学习目标:1、知道纤维素酶的种类及作用2、初步掌握从土壤中分离出分解纤维素的微生物的实验方法棉花是自然界中纤维素含量最高的天然产物，木材、作物秸秆中也含大量的纤维素。纤维素的分解需要在纤维素酶的催化作用下完成。基础知识（一）纤维素与纤维素酶葡萄糖苷酶(一)、基础知识纤维素酶是一种__________，它包括__________、______和________

4、_____，具有催化分解纤维素的作用。复合酶C1酶CX酶纤维素纤维二糖葡萄糖C1酶CX酶葡萄糖苷酶1.2支试管中，2.放入滤纸条3.再分别醋酸-醋酸钠缓冲液11mL、10mL。4.在加入10mL试管中加入1mL纤维素酶5.在摇床上振荡反应1h，观察结果。纤维素酶活性的测定实验：在一支试管中添加纤维素酶，另一支试管不添加纤维素酶；尽管醋酸－醋酸钠缓冲液用量不同，但都能维持相同的pH。〖思考1〗实验分析：P27的小实验是如何构成对照的？下列生物能分解纤维素的是（）①人②兔③牛④蘑菇⑤纤维杆菌A.①②③④⑤B.②

5、③⑤C.②③④⑤D.③⑤C(二)、纤维素分解菌的筛选方法-----------选择培养基以纤维素为唯一碳源----刚果红染色法(鉴别培养基)红色复合物刚果红纤维素红色消失，出现透明圈可根据是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌(三)、实验设计土壤取样选择培养梯度稀释将样品涂布到鉴别培养基挑选菌落什么样的环境取样?①选择培养基的特点?②培养的目的?挑选什么样的菌落?①鉴别培养基的特点?②如何鉴别?本实验流程与课题2中实验流程有哪些异同?前者直接稀释涂布在以尿素为唯一N源的选择培养基上，直接分离得到目的菌落；后者先进

6、行选择培养，使纤维素分解菌得到增殖后，再将菌液稀释涂布到鉴别培养基1、纤维素分解菌选择培养基属于______（固体、液体）培养基，原因是_____________【资料二】选择培养阅读资料二“选择培养基”，回答以下几问题：液体没有添加琼脂2、该培养基对微生物________（具有，不具有）选择作用。如果具有，其选择机制是_______________________________________________________。以纤维素粉为唯一碳源，能分解纤维素的微生物可以大量繁殖具有若设置一个对照实验说

7、明选择培养的作用，应控制的变量是将__________改为_________。3、你能否设计一个对照实验，说明选择培养基的作用？葡萄糖纤维素粉〖思考2〗实验流程中“选择培养”的目的是什么？其目的是增加纤维素分解菌的浓度，以确保能够从样品中分离到所需要的微生物。〖旁栏思考题〗为什么选择培养能够“浓缩”所需的微生物？在选择培养的条件下，可以使那些能够适应这种营养条件的微生物得到迅速繁殖，而那些不适应这种营养条件的微生物的繁殖被抑制，因此可以起到“浓缩”的作用。培养基组成提供的主要营养物质CMC-Na5~10g碳

8、源酵母膏1g碳源、氮源、生长因子KH2PO40.25g无机盐土豆汁100mL碳源、生长因子琼脂15g凝固剂上述物质溶解后，加蒸馏水定容至1000mL氢元素、氧元素鉴别纤维素分解菌的培养基(水溶性羧甲基纤维素钠)【资料三】刚果红染色法方法一：先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应方法二：在倒平板时就加入刚果红方法一中NaCl溶液的作用？思考：漂洗作用，洗去与纤维素结合不牢的刚果红，以免出现的透明圈不够清晰。染色法优