分解纤维素的微生物的分离(原创)

《分解纤维素的微生物的分离(原创)》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、分解纤维素的微生物的分离岳池一中荣启余阅读课本27页基础知识部分第一、二段，回答下列问题：1、纤维素在生物圈的分布状况？2、纤维素酶的组成及作用？纤维素是地球上含量最丰富的多糖类物质。植物的根、茎、叶等器官都含有大量的纤维素。其中棉花是自然界中纤维素含量最高的天然产物。纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即CX酶、C1酶和葡萄糖苷酶，前两种酶使纤维素分解成纤维二糖，第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖。一、纤维素和纤维素酶草食性动物是怎样消化食物中纤维素的？肠胃中的共生微生物。除自然环境中存在分解纤维素的微生物外，在草食性动物等的消化道内，也共生有分解纤维素的

2、微生物，其原理也是产生纤维素酶而分解纤维素，而人没有分解纤维素的能力。1U表示1个酶活力单位，是指在温度为25℃，其他反应条件，如pH等，均为最适的情况下，在1min内转化1mmol的底物所需的酶量。底物：酶所作用和催化的化合物。试管AB滤纸条1cmx6cm1cmx6cm缓冲液10ml11ml纤维素酶1ml/振动1h1h现象分解不分解纤维素酶的作用对照实验二、纤维素分解菌的筛选阅读课本课本28页相关部分，回答下列问题：1、纤维素分解菌的筛选方法2、纤维素分解菌的筛选方法的原理刚果红染色法：这种方法能够通过颜色反应直接对微生物进行筛选(1)刚果红可以与纤维素形成红色复合

3、物，但并不和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。(2)纤维素分解菌能产生纤维素酶分解纤维素，从而使菌落周围形成透明圈。实验原理即：可根据是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。三、实验操作土壤取样选择培养*梯度稀释将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上挑选产生透明圈的菌落答：本实验流程与课题2的流程的区别如下。课题2是将土样成的菌悬液直接涂布在以尿素为惟一氮源的选择性培养基上，直接分离得到菌落。本课题通过选择培养，使纤维素分解菌得到增殖后，再将菌液涂布在选择培养基上。其他步骤基本一致.本实验的流程与课题2中的实验流程有哪些异同？土壤取样取样的环境是怎样的，作出这种选择的理

4、由是什么？选择纤维素丰富的环境，如树林中多年落叶形成的腐殖土，多年积累的枯枝败叶等等。生物与环境的互相依存关系，在富含纤维素的环境中纤维素分解菌的含量相对提高，因此从这种土壤中获得目的微生物的几率要高于普通环境为什么要在富含纤维素的环境中寻找纤维素分解菌？将滤纸埋在土壤中有什么作用？你认为滤纸应该埋进土壤多深？由于生物与环境的相互依存关系，在富含纤维素的环境中，纤维素分解菌的含量相对提高，因此从这种土样中获得目的微生物的概率要高于普通环境。将滤纸埋在土壤中能使纤维素分解菌相对聚集，实际上是人工设置纤维素分解菌生存的适宜环境。一般应将纸埋于深约10cm左右的腐殖土壤中。

5、选择培养培养基组成提供主要的营养物质纤维素粉5g碳源（能源）NaNO31g氮源、无机盐KCl0.5gNa2HPO4·7H2O1.2gKH2PO40.9gMgSO4·7H2O0.5g无机盐酵母膏0.5g生长因子、碳源、氮源水解酪素0.5g氮素、生长因子溶解后，蒸馏水定容至1000mL水1、选择培养的目的：增加纤维素分解菌的浓度，以确保能够从样品中分离到所需要的微生物2、制备选择培养基参照课本29页旁栏中的比例配置，回答下列问题a、旁栏中的配方是液体培养基还是固体培养基？为什么？b、这个培养基对微生物是否具有选择作用？如果具有，是如何进行选择的？c、你能否设计一个对照实验

6、，说明选择培养基的作用是液体培养基，原因是配方中无凝固剂有选择作用，本配方中的碳源是纤维素，所以能分解纤维素的微生物可以大量繁殖用牛肉膏蛋白胨培养基与之对照选择培养3、操作方法：将土样加入装有30ml选择培养基的锥形瓶中，将锥形瓶固定在摇床上，在一定温度下震荡培养1～2天，直至培养液变浑浊。也可重复选择培养思考：为什么选择培养能够“浓缩”所需的微生物？在选择培养的条件下，可以使那些能够适应这种营养条件的微生物得到迅速繁殖，而那些不适应这种营养条件的微生物的繁殖被抑制，因此可以起到“浓缩”的作用刚果红染色法方法一：先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应方法二：在倒平板时

7、就加入刚果红思考：这两种方法各有哪些优点与不足？培养基组成提供的主要营养物质CMC-Na5~10g碳源酵母膏1g碳源、氮源、生长因子KH2PO40.25g无机盐土豆汁100mL碳源、生长因子琼脂15g凝固剂上述物质溶解后，加蒸馏水定容至1000mL氢元素、氧元素鉴别纤维素分解菌的培养基(水溶性羧甲基纤维素钠)方法一：方法二：步骤培养基经涂布培养先长出菌落→再覆盖1mg/mL的CR溶液→(10~15min后)倒去CR溶液→加入1mol/L的NaCl溶液→15min后倒掉NaCl溶液→出现透明圈配置10mg/mL的CR溶液→灭菌→按照1mLCR溶液/20