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1、EBV-DNA检测在儿童EB病毒感染中的临床意义虞敏江西省景德镇市妇幼保健院检验科摘要：目的探究EBV-DNA检测在儿童EB病毒感染中的临床意义。方法采用随机数字表法选取2016年1—12月期间66例以发热为主诉的患儿作为研究对象,使用EBV-DNA检测其EB病毒感染情况,研究诊断效果的临床意义。结果不同性别患儿的检测阳性率比较,差异无统计学意义(P>0.05);不同年龄段患儿的检测阳性率比较,差异无统计学意义(P>0.05);肾功能异常、肝功能异常、白细胞降低、白细胞升高的辅助检查阳性率比较,差异无统计学意义(P>0.05);EBV-DNA检测16例阳性患儿的异型淋巴细胞异常及
2、心肌酶异常辅助检查阳性率显著高于EBV-DNA检测50例阴性患儿,4EBV-DNA检测16例阳性患儿的淋巴结增大、咽喉炎、肝肺增大阳性率明显高于4EBV-DNA检测50例阴性患儿(P<0.05)。结论EBV-DNA检测在儿童EB病毒感染中具有显著的临床意义,能够根据异型淋巴细胞异常、心肌酶异常、临床表现进行EB病毒感染的有效诊断。关键词：EBV-DNA检测;儿童;EB病毒感染;EBV-DNA检测在EB病毒感染的诊断中具有简便、快速、特异性强等特点,能够有效提高诊断精准度[1]。本研究就EBV-DNA检测在儿童EB病毒感染中的临床意义进行研究,现报道如下。1资料和方法1.1一般资料
3、使用随机数字表法选取2016年1—12月期间66例以发热为主诉的患儿作为研究对象。66例患儿中,女21例,男45例;年龄3~12岁,平均(7.231.26)岁;合并支原体感染2例,合并肺炎及支气管肺炎21例,合并上呼吸道感染39例,血小板减少性紫癜1例,不明原因发热3例。1.2方法设备采用实时荧光PCR检测仪ABI7500,贝克曼全自动生化仪,希森美康自动血细胞分析仪,高速离心机,可调式微量移液器,恒温水浴箱,H-1漩涡微型振荡器,普通台式离心机,电子天平BS-200S型,RS232C型紫外分光光度计等。(1)外周血标本采集。使用一次性无菌注射器为患儿抽取2ml外周静脉血,将血液
4、注入含有枸橼酸钠抗凝剂的玻璃管内并进行混合摇匀5~10次,待静脉血与抗凝剂充分混匀后置于温度为-20℃的环境保存。(2)细胞DNA提取。以1ml比1ml的比例将静脉血与抗凝剂混合液与无菌0.9%氯化钠注射液进行混合摇匀;将500μl淋巴细胞分离液与1ml已稀释全血注入另一5ml的离心塑料管;置离心机进行2000r/min离心5min,对中间的白细胞层使用塑料吸管吸取并放入1.5ml的刻度离心管,进行1200r/min离心5min;将上清弃除并将沉淀物置50μlDNA提取液进行充分混匀,置于恒温为100℃的环境10min,随后进行1200r/min离心5min,再置于温度为-20℃
5、的环境保存备用。(3)PCR扩增。将处理后的2μl样品上清液注入若干PCR反应管,进行数秒8000r/min离心后将清液置荧光定量PCR检测仪样品槽。根据对应顺序将阳性定量参考品、阴性质控品、待测标本进行设置,进行相应循环条件的设置并根据参数分析结果。(4)生化标本采集及检测。采集3ml静脉血置于无抗凝剂的真空试管并进行8次颠倒混匀;取血清进行肾功能、肝功能、心肌酶等生化指标检测,分析检测结果。(5)异常淋巴系统比率指标检测。使用外周血涂片瑞氏染色计数严格遵循狄可氏分型标准计数计算白细胞中异型淋巴细胞的比例,分析计算结果。1.3统计学处理采用SPSS16.0统计软件进行数据分析,
6、计数资料以率表示,采用χ检验,计量资料以x±s表示,采用t检验,P<0.05为差异有统计学意义。2结果2.1不同性别患儿的检测阳性率比较女患儿EBV-DNA检测阳性率为23.8%(5例),男患儿EBV-DNA检测阳性率为24.4%(11例)。不同性别患儿检测阳性率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。2.2不同年龄段患儿检测阳性率比较小于等于6岁患儿EBV-DNA检测阳性率为23.1%(6例),大于6岁且小于等于12岁患儿EBV-DNA检测阳性率为25.0%(10例)。不同年龄段患儿的检测阳性率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。2.3辅助检查结果比较EBV-DNA检测16
7、例阳性患儿的异型淋巴细胞异常及心肌酶异常辅助检查阳性率显著高于EBV-DNA检测50例阴性患儿(P<0.05);在肾功能异常、肝功能异常、白细胞降低、白细胞升高的辅助检查阳性率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。见表1。2.4临床表现4EBV-DNA检测16例阳性患儿的淋巴结增大、咽喉炎、肝肺增大阳性率明显高于4EBV-DNA检测50例阴性患儿(P<0.05)。见表2。3讨论EB病毒具有B淋巴细胞嗜性,属于人类疱疹病毒科的r疱疹病毒亚科,在我国的感染率超过90%。儿童受到EB
