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1、第25卷第5期浙江林业科技Vol.25No.52005年9月JOUR.OFZHEJIANGFOR.SCI.&TECH.Sep.,2005文章编号1001-3776200505-0049-05食用菌多糖研究进展1,22王丽霞杜德清1.中南林学院湖南长沙4100042.丽水职业技术学院浙江丽水323000摘要对食用菌多糖的提取分离纯化定性定量分析活性研究和临床应用等研究进展进行了综述指出了目前存在的不同食用菌多糖较难鉴别真菌多糖提取纯化工艺需进一步加强食用菌多糖结构和功能之间的关系问题提出真菌多糖的提取工艺和构效关系是今后研究的主要方向关键词食用菌多糖免疫调节生理活性提取纯化技术
2、中图分类号S646文献标识码A食用真菌是人类实践活动中最早认识和利用的一类微生物具有种类繁多世代短生物量大易培养[1]分布广和营养成分丰富等特点国内外学者对其营养成分进行了广泛的研究近年来人们越来越认识到食用[2]真菌中独特的多糖功能成分据杨革报道真菌的多糖含量在0.48%~0.87%食用菌多糖是一种很好的免疫调节增强剂可从根本上提高人体免疫功能起到扶正固本强身保健的作用20世纪80年代以来这方面的研究利用进展更为迅速且正朝抗癌增寿强力益智美容以及提高免疫力和防止衰老等方向深化现[3]代医学研究发现食用菌中能显著增强癌症患者抵抗力的生理活性物质即为食用菌多糖食用菌多糖的生理功
3、能化学结构以及构效关系正成为多糖研究的前沿阵地取得了很大进展而多糖分离纯化和结构测定的[4]方法也在不断发展和完善为此笔者对食用菌多糖的研究现状进行了综述为食用菌多糖的进一步开发利用提供参考1食用菌多糖提取工艺研究进展不同食用真菌多糖的鉴别较为困难这是因为即使同一属真菌中的不同种真菌所产多糖也不一致包括多糖种类多糖结构分子量大小等目前也没有一份较为可靠的不同真菌多糖的图谱例如能表明结构差别的红外图谱等从纯种发酵液即只用一种已知真菌菌种发酵所得液体或从已知真菌子实体中提取的多糖[5]可以进行结构和定性定量分析食用菌菌丝多糖分胞外多糖和胞内多糖对于提取深层发酵液中的食用菌多糖常规
4、提取一般是首先将菌丝从发酵液中分离出来打浆处理然后用热水提取法或其他方法从菌丝中提取胞内多糖从滤液中提取胞外多糖一般是把滤液先过滤再浓缩最后用有机溶剂沉淀而得到从多糖水溶液中提取多糖首先可用透析或超滤等方法去掉小分子物质单糖寡糖氨基酸短肽无机盐等然后设法去掉水分各种合适的干[6]燥方法超滤以及有机溶剂沉淀法等根据多糖类物质易溶于热水而不溶于高浓度酒精的原理食用菌多糖的提取通常采用水煮醇沉热水提取及酒精沉淀法的常规方法其提取工艺流程如图1[7]食用菌多糖除常规的水提法外还有一些其它提取方式据王竟等人报道担子菌的发酵产物中一些具有生理活性的聚合物主要为多糖类其分子量一般在1000
5、d以上对于这些发酵多聚物的提取他们采用了超收稿日期2005-06-24修回日期2005-08-06作者简介王丽霞1967女浙江平湖人高级讲师在读博士从事林产食品加工研究万方数据50浙江林业科技25卷滤液食用菌的子实体或菌丝体清洗组织捣碎水浴保温离心过滤滤渣再保温提取滤液乙醇沉淀过滤或离心沉淀物干燥粗多糖图1食用菌多糖的提取工艺流程滤浓缩该法具有效率高耗能少等特点他们系统地研究了利用中空纤维超滤器对灵芝发酵液中聚合物的浓缩过程推导出该超滤器放大的适宜计算公式结果表明截留分子量1000d的聚砜不对称膜是适于超滤浓缩灵芝发酵液的超滤膜适宜的超滤条件为操作压力0.2Mpa料液温度20
6、30循环速度0.22m/s在此条2件下超滤200min通量及截留率分别稳定在9.1L/mh和96%左右发酵液聚合物浓缩5倍以上其收[5]率达92.6%林玉满鄢春生等人报道了短裙竹荪子实体多糖的酸提取法添加短裙竹荪(DictyopHoraduplicata)子实体干品3%的三氯乙酸所得提取液经乙醇分级DEAE-纤维素柱等进一步纯化得到水溶性多糖Dd-2DE经SepHadexG-200柱层析和聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定Dd-2DE为均一组份2食用菌多糖的分离纯化为进一步纯化多糖对提取的粗多糖分别进行醇析和Sevage法处理去除蛋白醇析提纯食用菌多糖热水提取的粗多糖溶于蒸馏水中配成8%
7、~10%浓度边搅拌边加入一定量95%乙醇使最终混合液中乙醇浓度达到65%~70%乙醇添加完毕后继续搅拌5min50rpm静置30min后经4000rpm离心15min收集沉淀物并反复3次醇析沉淀直至得到较纯真菌多糖适当干燥后采用Sevage法去除蛋白Sevage法去除食用菌多糖蛋白其沉淀液的配比为样品液:氯仿:正丁醇=1:0.2:0.04操作时将一定量10%浓度的真菌多糖经酒精提纯置适量大小烧杯中控制温度25按比例加入氯仿-正丁醇混合液搅拌30min再经4000rpm离心20min分离出水层浓缩并干燥后
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