几株芽孢杆菌产消化酶分析

《几株芽孢杆菌产消化酶分析》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、《江西畜牧兽医杂志)2009年第2期·实验研究·文章编号：1oo4—2342(2009)02—0013-03中图分类号：$852．61*6文献标识码：B几椿芽抱扦菌产消化酶分析孙晓鸣。王萍，黄云飞(江西农业大学动物科学技术学院，江西南昌330045)摘要：为探索地衣芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌和纳豆芽孢杆菌Nl、SH、TCP、B1、B2株产生消化酶(淀粉酶、蛋白酶和脂肪酶)的能力，采用鉴别培养基进行筛选比较。结果显示，不同菌株产消化酶的能力相差很大，其中地衣芽孢杆茵产淀粉酶的能力最强，产蛋白酶的能力较弱，不产脂肪酶；B1

2、株纳豆芽孢杆菌产蛋白酶的能力最强，产淀粉酶能力却最弱；除地衣芽孢杆菌，~q'L6株芽孢杆茵都产生脂肪酶。关键词：芽孢杆菌；淀粉酶；蛋白酶；脂肪酶；微生态制剂消化酶是动物体内能够合成并分泌到消化道TCP、B1、B2均为江西农业大学动物科技学院预防中营养物质的酶。添加消化酶可以弥补动物自身分兽医学实验室分离保存，枯草芽孢杆菌(Bacillus泌内源酶的不足，从而促进消化。产生蛋白酶、淀粉subtilis)。地衣芽孢杆菌(Bacilluslicheniformis)购自中酶和脂肪分解酶等活性消化酶的芽孢杆菌，能有效国微生

3、物菌种保藏中心。裂解饲料中大量碳水化合物、脂肪、蛋白质成小的1．1．2主要试剂。卢戈尔氏碘溶液(革兰氏染色用碘单位。帮助动物对营养物质的消化吸收，提高饲料溶液)，3．6％3．8％稀盐酸，0．6％中性红水溶液。利用率，而且地衣芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、纳豆芽1．1．3培养基。(1)斜面培养基(％)：胰蛋白胨1．0，酵母孢杆菌等都是我国农业部于1996年批准的可以直浸粉0．5，NaC11．0，琼脂粉1．5，pH7．0～7．2。(2)肉汤培接饲喂动物或直接用于生产微生物兽药的3种菌养基(％)：牛肉膏O．5，蛋白胨1．0，N

4、aC10．5，pH7．0～种【”．它们在肠道内可以降低局部氧浓度．造成适宜7．2。(3)酪素培养基(％)：牛肉膏0．3，酪素1．0，NaC1双歧杆菌等益生菌生长的厌氧环境：它们还可以产O．5，琼脂粉1．5，pH7．0～7．2．f4)淀粉水解培养基：牛生细菌素等物质，促进双歧杆菌等的正常生长，调肉膏0．5g，可溶性淀粉0．2g，蛋白胨1．0g，NaC10．5整肠道微生态平衡。以芽孢杆菌有益菌作为饲用微g，琼脂粉1．5g，蒸馏水100mL，pH7．0~7．2。(5)油脂生物添加剂，目前已得到广泛应用【2J，这类芽孢杆菌

5、水解培养基【41：牛肉膏0．5g，蛋白胨1．0g，NaC10．5g，制成的微生物饲用添加剂有很广阔的市场。琼脂粉1．5g．花生油1mL，0．6％中性红水溶液0．1由于不同种属的动物对酶的需要不同，在应用mL，蒸馏水100mL，pH7．0-7．2。微生态制剂用于治疗或作为饲料添加剂时，草食1．2方法动物和杂食动物如牛、羊、兔、鸡、猪等应选择富产1．2．1种子液制备。分别将纳豆芽孢杆菌N1、SH、淀粉酶的菌种制作微生态制剂．而肉食动物应选择TCP、B1、B2株、枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌的斜富产蛋白酶和脂肪酶的菌种．因

6、此在研制和应用微面保存种用接种环接种到装有20mL肉汤培养基生态制剂时，要根据不同的动物有的放矢。本研究的50mL三角锥瓶中．置37oC160r／min振荡培养采用对金黄色葡萄球菌具有拮抗作用的地衣芽孢12h，制得种子液，待用。杆菌、枯草芽孢杆菌和纳豆芽孢杆菌N1、SH、TCP、1．2．2淀粉酶检测【5J。将各株芽孢杆菌的种子液，分别Bl、B2株，对其产生消化酶(淀粉酶、蛋白酶和脂肪用接种棒点种于淀粉水解培养基上．每种菌液作3～酶)的能力进行了分析，为筛选和研制用于草食及4个重复，置37℃培养24h。将培养好的平板

7、取出，杂食动物的微生态制剂和饲料添加剂提供理论的滴加少量的卢戈尔氏碘液于平板上，轻轻旋转，使依据。碘液均匀铺满整个平板。稍停片刻，观察其菌落周1材料与方法围形成的透明圈。测量菌落和透明圈的直径，取其1．1材料平均值，计算出透明圈直径与菌落直径之比。比值1．1．1菌种。纳豆芽孢杆菌(Bacillusnatto)N1、SH、越大，说明产淀粉酶能力越强。·13·《江西畜牧兽医杂~2009年第2期·雪胡瞪研究·1．2．3蛋白酶检测。参照文献【6J介绍的方法进行。将各然后滴加适量的1O％HC1溶液淹没平板。稍停片株芽孢杆菌的

8、种子液．分别用接种棒点种于酪素培刻后进行判断嘲，结果如图2所示。养基平板中，每种菌液作34个重复，置37℃培养24h后，观察平板上菌落周围的透明圈大小，用l0％HCl溶液淹没平板进行判断。测量菌落的直径和透明圈直径，取其平均值。计算出透明圈直径与一一菌落直径之比。比值越大，说明产蛋白酶能力越强。1．2．4脂肪酶检测。将各株芽孢杆菌的种子液，分图2蛋白酶平板筛