革兰氏阳性产芽孢杆菌

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1、第十二章革兰氏阳性产芽孢杆菌内容提要第一节芽孢杆菌属炭疽芽孢杆菌第二节梭菌属产气荚膜梭菌肉毒梭菌破伤风梭菌第一节芽孢杆菌属（Bacillus)炭疽芽孢杆菌炭疽芽孢杆菌—炭疽的病原体—人兽共患病一、形态及染色特性革兰氏阳性大杆菌，无鞭毛，不运动。形成芽孢、荚膜。动物组织和血液:单在或呈短链，竹节状、有丰厚的荚膜人工培养物:形成长链，形成芽胞，一般不形成荚膜二、培养特性需氧菌，适温37℃，营养要求不高普通肉汤：37℃，24h培养，上层液透明，形成白色絮状沉淀普通琼脂：大而扁平、灰白色，不透明、表面干燥、边缘不整齐火焰状菌落。低倍镜观察菌落边缘呈卷发状，不溶血。明胶高层：呈

2、倒置松树状串珠反应：0.5单位/ml青霉素的培养基中，细胞壁合成受抑制，菌体膨胀相互粘连形成“串珠状”普通琼脂上的菌落低倍镜观察菌落串珠反应试验三、抵抗力繁殖体的抵抗力不强60℃30-60min即可杀死常用消毒剂均能将其杀死青霉素等多种抗生素高度敏感芽胞的抵抗力特别强在干燥状态下可长期存活121℃灭菌5-10min芽胞对碘特别敏感0.04％-10min四、抗原结构是芽胞外膜层含有的抗原决定簇，特异性抗原具有免疫原性和血清学诊断价值。荚膜—半抗原，与毒力有关，无保护作用不稳定，反应性特异—可用于血清学鉴定细胞壁及菌体内的半抗原（多糖），与毒力无关性质稳定（耐腐败、热）—

3、Ascoli反应胞外蛋白质抗原（炭疽毒素），具有免疫原性免疫保护荚膜抗原：菌体抗原：保护性抗原：芽孢抗原：五、致病性本菌可引致各种家畜、野兽和人类的炭疽易感性最强—牛、绵羊、鹿等其次—马、驼、猪、山羊等次之犬、猫、食肉兽等则有相当大的抵抗力禽类一般不感染感染途径：消化道、呼吸道、皮肤创伤或通过吸血昆虫传播食草动物炭疽常表现为急性败血症猪炭疽多表现为慢性的咽部局限感染犬、猫和食肉兽则多表现为肠炭疽感染表现人类肠炭疽、肺炭疽或皮肤炭疽实验动物：小鼠、豚鼠、家兔易感荚膜多肽：荚膜抗吞噬，抑制抗体的作用，使易于扩散，引起感染乃至败血症。动物无保护作用，可用于细菌鉴定毒力因素：

4、炭疽毒素：水肿毒素(edemafactor,EF)致死毒素(lethalfactor,LF)保护性抗原（PA）三种成分单独无生物学活性（毒性），三种相结合时，表现毒性作用增强微血管的通透性，改变血液循环，损害肾功能，干扰糖代谢导致动物死亡具有免疫原性，有保护作用六、免疫性患过炭疽的动物，能获得坚强的免疫力。菌苗有第二号炭疽芽胞苗无毒炭疽芽胞苗抗炭疽血清保护性抗原炭疽毒素刺激机体产生的抗体抗感染作用七、微生物学诊断1.细菌学检查采病料：严禁剖检，局部采料（耳根部、肋间采取脾脏、水肿液或渗出物、肠炭疽可采取粪便等（1）涂片镜检：碱性美蓝瑞氏染色姬姆萨染色有荚膜竹节状大杆菌

5、组织病料碱性美蓝革兰氏染色具有芽胞的链杆菌培养物（2）分离培养：普通琼脂血液琼脂碳酸氢钠琼脂观察生长特性生物学特性检测被检材料强度株形成荚膜动物机体内含碳酸氢钠或血清培养基（在CO2条件下培养）炭疽杆菌与γ噬菌体具有高度的特异性裂解炭疽杆菌形成噬菌斑被检菌含青霉素培养基形成串珠生长抑制穿刺接种于明胶培养基18-20℃培养4-7d呈倒置松树状*荚膜检查：*噬菌体裂解试验：*串珠试验：*明胶穿刺试验：细菌噬菌斑细菌噬菌体裂解试验串珠试验串珠细菌2.动物实验：在内脏、血液中有大量带荚膜的竹节状菌体剖检变化：注射部位呈胶样水肿脾脏肿大3.血清学检查：热沉淀反应（Ascoli氏

6、沉淀反应）间接血凝试验串珠荧光抗体检查被检抗原炭疽芽孢串珠试验与荧光抗体法结合病料(1:5乳悬液)或培养物皮下接种：小鼠0.1ml兔0.2-0.3ml败血症而死亡第二节梭菌属(Clostridium)一、属的特征*菌体杆状，两端钝圆或尖锐，常单在，革兰氏染色阳性*形成卵圆形或圆形的芽孢，常使菌体膨大，呈梭状二、梭菌分布*梭菌在自然界分布广泛—土壤、污水、腐烂植物、动物肠道*人与动物的伤口及软组织感染灶三、病原梭菌及梭菌病的诊断原则*本属有80多种，多为非病原菌，常见的致病菌约11种*多为人兽共患病病原*病原梭菌通常均能产生外毒素，其毒力强产气荚膜梭菌(Cl.Perfr

7、ingens)*本菌又称魏氏梭菌或产气荚膜杆菌*在自然界分布极广—土壤、饲料、污水、乳汁、消化道粪便等*在一定条件下，可引起多种严重疾病一、形态及染色特性菌体直杆状，两端钝圆，革兰氏阳性，形成芽胞（中央或近端）多数菌株在动物体内可形成荚膜二、培养及生化特性本菌对厌氧条件要求不太严格加入葡萄糖、血液则生长更好，适温37℃肝片肉汤；生长迅速，5-6h出现混浊，产生大量气体葡萄糖琼脂；37℃，24h形成，勋章样菌落血液琼脂；灰白色，圆形，边缘呈锯齿状的大菌落，周围有棕绿色溶血区，出现双层溶血环为β溶血（内环透明，外环淡绿色）。牛乳培养基：汹涌发酵或暴烈发酵