生物化学检验实验室基本知识(I)

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1、第二章生物化学检验实验室基本知识1本章内容概要：第一节实验用纯水第二节常用临床实验室器材（自学/复习）第三节生物化学检验试剂概述第四节参考范围和医学决定水平第五节实验方法与参考物质概述第六节实验方法的选择与评价第七节实验的临床诊断性能评价2教学目的和要求：1、掌握诊断试剂盒的选择与性能指标评价，实验方法与参考物质的分级，实验误差、方法学评价指标以及五种方法学评价试验的目的、原理、操作、计算及注意事项。2、熟悉实验用纯水的等级、制备和纯度检查，化学试剂的选择、保存与配制，参考范围和医学决定水平的基本概念，实验方法与参考物质的基本概念，实验方法的正确选择，诊断试验的性能评价。3、了解参考

2、范围的建立，溯源性、测量标准、互通性的概念，方法性能判断。3第一节实验用纯水天然水自来水实验用纯水经简单的物理、化学方法处理，除去悬浮物质和部分无机盐经蒸馏、离子交换、活性炭吸附、超滤等处理，除去杂质(悬浮物,胶体物质,溶解物质)4实验室用水等级纯水的制备方法水的纯度检查内容概括：5一、实验室用水等级表2-1美国NCCLS等级纯水的规定及用途(1985)级别Ⅰ级Ⅱ级Ⅲ级pH未定未定5.0～8.0电阻率(MΩ·cm,25℃,最大量)102.01.0硅(mgSiO2/L,最大量)0.050.11.0微生物含量（每毫升最大菌落数）10103未定硅（mgSiO2/L，最大量）0.050.11

3、.0微粒0.2µm微孔膜过滤未定未定有机物质活性碳过滤未定未定用途原子吸收，火焰光度，荧光，电解质，酶，高效层析，电泳，参比液，缓冲液。一般实验室检验，器皿冲洗。器皿洗涤，要求不高的定性试验。美国国家临床实验室标准委员会（nationalcommitteeforclinicallaboratorystandards，NCCLS）6表2-2中国国家验室用水GB6682-2002标准名　称一级二级三级pH范围(25℃)－（未定）－5.0～7.5电导率（25℃）ms/m≤0.010.100.50电阻率（25℃，MΩ·cm）≥1010.2可氧化物质mg/L  ＜（以O计）－0.080.40吸

4、光度（254nm，1cm光程）≤0.0010.01－蒸发残渣（105±25℃）mg/L≤－1.02.0可溶性硅（以SiO2计）mg/L＜0.010.02－7二、纯水的制备方法蒸馏法离子交换法其他方法：活性炭吸附法、电渗透法、超滤膜法混合纯化系统8（一）蒸馏法优点:设备简单缺点:1、挥发性物质难以去除，有离子干扰；2、耗能大，耗水多；3、需注意管道清洁纯度：0.1MΩ·cm（25℃）的蒸馏水（deionizedwater，DW）9(二)离子交换法定义：将自来水通过离子交换树脂以除去水中杂质离子，称为离子交换法。原理：扩散离子交换吸附10氢型强酸性阳离子交换树脂 (R—SO3H，R为母体

5、) ，其中的H+与Ca2+、Na+等金属离子发生交换反应，而将钙、钠离子除去氢氧型强碱性阴离子交换树脂(R′—NOH，R′为母体)，其中的OH-与水中的CL-、碳酸根等阴离子发生交换反应，而将它们除去：离子交换反应11优点:除了可去除杂质离子以外兼具吸附电中性杂质和过滤颗粒杂质的作用。缺点:纯度：5MΩ·cm（25℃）以上的去离子水DW2、由于离于交换为可逆反应，故去离子水并非绝对不含离子1、设备较复杂，成本较高；（目前实验室应用普遍）12（三）其他方法：在电场作用下水中各种阳离子趋向阴极，各种阴离子趋向阳极．但阳离子只能透过阳膜而被相邻的阴膜所阻，阴离子与此相反．这样，在一些隔间内

6、集中了阳离子和阴离子，即形成含盐多的浓水，在另一些隔间内由于阴、阳离子的迁出降低了含盐量形成淡水电渗透法131、不需要消耗化学药品，设备简单，操作方便。消耗电能，当原水中盐浓度过低时，溶液电阻大，用电渗析也不经济纯度:25℃时104～105Ω·cm2、对于含盐量高的海水等用此法比用离子交换法更为经济．优点:缺点:电渗透法评价14炭吸附法:活性炭是一种非常优良的吸附剂，它是利用木炭、各种果壳和优质煤等作为原料，通过物理和化学方法对原料进行破碎、过筛、催化剂活化、漂洗、烘干和筛选等一系列工序加工制造而成。151、设备简单，操作方便。纯水制备效率低,仅作为各种制备纯水配套的一种措施.2、它

7、具有物理吸附和化学吸附的双重特性,可以有选择的吸附气相、液相中的各种有机物质.优点:缺点:炭吸附法评价:16超滤膜法特点:仅能除去胶体细菌等大分子物质和悬浮物,所得水还需进一步纯化.也是作为各种制备纯水配套的一种措施.17混合纯化系统医用超纯水设备实验室纯水系统橱下式全自动逆渗透纯水机特点:多种方法混合纯化,可获得纯度很高的二级甚至一级纯水.电阻率大于2.0MΩ·cm（25℃）。18三、水的纯度检查水电阻率或电导率检查检测残留物含量1.电阻率工具：电导仪或