微生物的生长及其控制(II)

《微生物的生长及其控制(II)》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、第七章微生物的生长及其控制微生物生长的研究方法环境因素对微生物生长的影响微生物生长的控制第一节微生物生长的研究方法微生物纯培养的分离微生物的培养方法微生物的同步生长与同步培养方法微生物生长的测定方法2021/8/132生物个体由小到大的增长，即表现为细胞组分与结构在量方面的增加生长指生物个体数目的增加繁殖在单细胞微生物中，生长繁殖的速度很快，而且两者始终交替进行，个体生长与繁殖的界限难以划清，因此实际上常群体生长作为衡量微生物生长的指标。群体生长的实质是包含着个体细胞生长与繁殖交替进行的过程。2021/8/133一、微生物纯培养的分离平板划线分

2、离法稀释倒平板法单孢子或单细胞分离法利用选择性培养基分离法纯培养：从一个单细胞微生物繁殖得到的后代。方法2021/8/134平板划线分离法用接种环以无菌操作沾取少许待分离的材料，在无菌平板表面进行平行划线、扇形划线或其他形式的连续划线，如果划线适宜的话，微生物能一一分散，经培养后，可在平板表面得到单菌落。2021/8/135稀释倒平板法2021/8/136单孢子或单细胞分离法采取显微分离法从混杂群体中直接分离单个细胞或单个个体进行培养以获得纯培养。在显微镜下使用单孢子分离器进行机械操作，挑取单孢子或单细胞进行培养。也可以采用特制的毛细管在载玻片的琼

3、脂涂层上选取单孢子并切割下来，然后移到合适的培养基进行培养。2021/8/137选择性培养基分离法各种微生物对不同的化学试剂、染料、抗生素等具有不同的抵抗能力，利用这些特性可配制合适某种微生物而限制其它微生物生长的选择培养基，用它来培养微生物以获得纯培养。微生物纯培养分离方法的比较分离方法应用范围平皿划线法方法简便，多用于分离细菌稀释倒平皿法即可定性，又可定量，用途广泛单细胞挑取法局限于高度专业化的科学研究利用选择培养基法适用于分离某些生理类型较特殊的微生物2021/8/138二、微生物的培养方法氧气需要与否好氧培养厌氧培养根据物理特性固体培养液体

4、培养固体培养液体培养试管斜面、平皿、茄瓶斜面工业生产中用麸皮、米糠等往复式或旋转式摇床台式发酵罐深层液体通气无论液体还是固体通过特殊的培养装置2021/8/139三、微生物的同步生长与同步培养方法同步培养法(synchronousculture)：是使培养物中所有微生物细胞都处于相同的生长阶段的培养方法。同步生长：以同步培养方法使群体细胞能处于同一生长阶段，并同时进行分裂的生长方式同步培养物常被用来研究在单个细胞上难以研究的生理与遗传特性和作为工业发酵的种子，它是一种理想的材料。2021/8/1310同步培养的方法诱导法：采用物理、化学因子使微生物

5、细胞生长进行到某个阶段而停下来，使先到达该阶段的微生物细胞不能进入下一个生长阶段，以达到诱导微生物细胞同步生长的目的。温度培养基成份控制光照和黑暗交替培养诱导法2021/8/1311选择法：对非分支的单细胞微生物来说，处于同一生长阶段的同步细胞，它们的体积和重量大致相等，处于不同生长阶段的细胞，体积和重量大小不等。因而可用膜过滤或密度梯度离心的方法，选择同一生长阶段的细胞。机械方法离心方法过滤分离法硝酸纤维素滤膜法2021/8/1312硝酸纤维素滤膜法离心法2021/8/1313四、微生物生长的测定方法(一)微生物细胞数目的检测方法1.总细胞计数法

6、比浊法涂片计数法血球计数板法2.活菌计数法涂布平板法倒平板法2021/8/1314血球计数板法:利用血球计数板，在显微镜下计算一定容积里样品中微生物的数量。涂片计数法:将已知体积的待测样品均匀涂布在载玻片的已知面积内,在显微镜下计算样品中微生物数量。缺点：不能区分死菌与活菌；不适于对运动细菌的计数；需要相对高的细菌浓度；个体小的细菌在显微镜下难以观察；两种方法都是在显微镜下直接计数，故又称为直接计数法。特点是检测快速。2021/8/1315比浊法：样品中由于菌体细胞对光的消散作用而呈浑浊，细胞数目越多，对光的消散作用越强，浑浊度越高。浊度可以用比色

7、计或分光光度计测量，以光吸收值来表示。单细胞生物在一定的范围内的光吸收值的大小与液体中细胞数目及细胞物质量成正比，因而可用做溶液中总细胞的计数。检测时需用直接显微镜计数或平板活菌计数法制作标准曲线。该方法缺点是灵敏度差，优点是简便、快速、不干扰或不破坏样品。检测时可使用侧臂三角瓶在不同的培养时间重复测定样品的浊度，因而广泛地用作生长速率的测定。2021/8/1316活菌计数法是通过在培养基形成的菌落来间接确定其活菌数的方法，也称平板计数法。原理是每个活细菌在适宜的培养基和良好的生长条件下可以通过生长形成菌落。活菌计数通常需要先将样品进行一系列稀释。

8、方法的优点是能够测出样品中的活菌数，且灵敏度高，因而广泛的应用于生物、医药制品和检定及食品、水质的卫生检定。缺点是手续繁、