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时间:2019-08-02
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1、微生物的生长及其控制第六章教学时数:6学时教学目的与要求:要求学生了解食品中微生物控制的原理,理解常见化学杀菌剂和抑菌剂的作用机理与使用特点,掌握微生物的生长规律,影响食品中微生物生长的主要因素;食品中微生物控制的基本策略,灭菌、消毒、防腐等的异同。本章重点和难点:微生物的生长规律,影响食品中微生物生长的主要因素,食品中微生物控制的基本策略,灭菌、消毒、防腐等的异同。本章主要参考文献1.江汉湖主编:《食品微生物学》,中国农业出版社,2005年8月第2版。2.M.T.马迪根,J.M.马丁可,J.帕克著[美].杨文博译.微生物学.北京:科学出版社,2001.3.周德庆.微生物学教程.北京:高
2、等教育出版社,1993.生物个体由小到大的增长,即表现为细胞组分与结构在量方面的增加生长指生物个体数目的增加繁殖在单细胞微生物中,生长繁殖的速度很快,而且两者始终交替进行,个体生长与繁殖的界限难以划清,因此实际上用群体生长作为衡量微生物生长的指标。群体生长的实质是包含着个体细胞生长与繁殖交替进行的过程测定微生物生长繁殖的方法微生物培养法概论微生物的生长规律影响微生物生长的主要环境因素有害微生物的控制内容提要测生长量计繁殖数测定生长繁殖的方法测定生长繁殖的方法微生物的纯培养纯培养的分离方法稀释倒平板法平板划线法选择培养基分离法单细胞挑取法稀释倒平板法平板划线分离法用接种环以菌操作
3、沾取少许待分离的材料,在无菌平板表面进行平行划线、扇形划线或其他形式的连续划线,如果划线适宜的话,微生物能一一分散,经培养后,可在平板表面得到单菌落。3.单孢子或单细胞分离法采取显微分离法从混杂群体中直接分离单个细胞或单个个体进行培养以获得纯培养。在显微镜下使用单孢子分离器进行机械操作,挑取单孢子或单细胞进行培养。也可以采用特制的毛细管在载玻片的琼脂涂层上选取单孢子并切割下来,然后移到合适的培养基进行培养。选择培养基分离法1.dilutesample1ml9ml101001000104105106107牛肉膏培养基土豆培养基高氏培养基各种微生物对不同的化学试剂、染料、抗生素等具有不同的抵
4、抗能力,利用这些特性可配制合适某种微生物而限制其它微生物生长的选择培养基,用它来培养微生物以获得纯培养。微生物纯培养分离方法的比较分离方法应用范围平皿划线法方法简便,多用于分离细菌稀释倒平皿法即可定性,又可定量,用途广泛单细胞挑取法局限于高度专业化的科学研究利用选择培养基法适用于分离某些生理类型较特殊的其他生理指标含N量法DNA/RNA法菌体内重要组成测定法测生长量称重量法N×6.25=Pr比浊法重量法通过样品中蛋白质、核酸含量的测定间接推算微生物群体的生物量;测定多细胞及丝状真菌生长情况的有效方法以干重、湿重直接衡量微生物群体的生物量;比浊法测生长量(间接法)计繁殖数直接计数法平板菌落
5、计数法滤膜培养法各种型号的全自动血球计数仪直接计数法a.直接法利用血球计数板,在显微镜下计算一定容积里样品中微生物的数量。缺点:不能区分死菌与活菌;不适于对运动细菌的计数;需要相对高的细菌浓度;个体小的细菌在显微镜下难以观察;b.简接法原理是每个活细菌在适宜的培养基和良好的生长条件下可以通过生长形成菌落。微生物的连续培养微生物的生长规律微生物的个体生长和同步生长单细胞微生物的典型生长曲线微生物的高密度培养1.概念同步培养(synchronousculture):是一种培养方法,它能使群体中不同步的细胞转变成能同时进行生长或分裂的群体细胞。同步生长:以同步培养方法使群体细胞能处于同一生长阶
6、段,并同时进行分裂的生长方式同步培养物常被用来研究在单个细胞上难以研究的生理与遗传特性和作为工业发酵的种子,它是一种理想的材料。同步培养(synchronousculture)同步培养方法选择法诱导法离心方法过滤分离法硝酸纤维素滤膜法温度培养基成份控制光照和黑暗交替培养硝酸纤维素滤膜法离心法一、细菌群体生长规律在不补充营养物质或移去培养物,保持整个培养液体积不变条件下,以时间为横坐标,以菌数为纵坐标,根据不同培养时间时细菌数量的变化,可以作出一条反映细菌在整个培养期间菌数变化规律的曲线。生长曲线生长曲线(growthcurve)描述细菌生长规律总菌数活菌数培养时间Ⅱ.指数期Ⅲ.稳定期Ⅳ.
7、衰亡期Ⅰ.延滞期细菌数目(个/ml)对数ⅡⅢⅣⅠ缩短延滞期的意义和方法延滞期(lagphase)出现原因本期特点影响本期限长短因素延滞期出现原因把细菌接种到新鲜的培养基中培养时,并不立即进行分裂繁殖,细菌增殖数为0,这时需要合成多种酶,辅酶和某些中间代谢产物,要经过一个调整和适应过程。延滞期特点生长速率常数等于零菌体粗大代谢活力强对不良条件抵抗能力降低RNA含量增加影响延滞期限长短因素接种龄接种量培养基成分缩短延滞期的意义和方法可以
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