消毒灭菌与病原微生物实验室生物安全1

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1、第3章消毒灭菌与病原微生物实验室生物安全Disinfectionandsterilization第一节消毒灭菌的常用术语消毒(disinfection)：杀死物体上或环境中的大部分微生物，并不一定能杀死细菌芽胞或所有微生物的方法。用以消毒的药品称为消毒剂(disinfectant)。灭菌(sterilization)：杀灭物体上所有微生物的方法。灭菌比消毒要求高，包括杀灭细菌芽胞在内的全部病原微生物和非病原微生物。防腐(antisepsis)：体外防止或抑制细菌生长繁殖的方法，一般用于有机体。无菌(asepsis)：不存在活菌，多是灭菌的结果。无菌操作（asep

2、tictechnique）防止微生物进入人体或其它物品的操作技术。热力灭菌法辐射杀菌法滤过除菌法干燥与低温抑菌法第二节物理消毒灭菌法干热灭菌法焚烧：废弃物、尸体灼烧：接种环、试管口干烤（160~170℃，2h）:玻璃器皿、瓷器红外线:医疗器械一.热力灭菌法湿热灭菌法巴氏消毒法：61.1-62.8℃30min或71.7℃15-30s,主要用于牛乳、酒类消毒。煮沸法（100℃，5min）杀死繁殖体.食具、注射器等消毒.流动蒸汽消毒法（100℃15-30min）杀死繁殖体.间歇蒸汽灭菌法（100℃15-30min，37℃24h×3天）高压蒸汽灭菌法压力—103.4kP

3、a（1.05kg/cm2）温度—121.3℃时间—15-20min效果—杀灭包括芽胞在内所有微生物应用—所有耐高温、高压、耐湿的物品湿热灭菌法与干热灭菌法效果比较结论—同样温度下，湿热比干热灭菌效果好原因：—蛋白含水量多时易凝固变性—湿热穿透力比干热大—湿热的蒸汽具有潜热紫外线(Ultravioletradiation)其主要作用于DNA，使一条DNA链上相邻的两个胸腺嘧啶共价结合形成二聚体，干扰DNA复制与转录，导致细菌变异和死亡，并可杀灭病毒。特点：穿透力较弱应用：物体表面及空气消毒电离辐射高速电子、X射线、γ射线微波二.辐射杀菌法三.滤过除菌法——用物理阻

4、留的方法除去液体或空气中的细菌,真菌。常用滤器：薄膜滤器、玻璃滤器、石棉滤器（Seitz）特点：只能除去细菌，真菌,不能除去病毒、支原体、L型细菌。应用：用于一些不耐高温灭菌的血清、毒素、抗生素，以及空气的除菌。干燥法:保存食物低温法：低温可使细菌的新陈代谢减慢，常用作保冷冻真空干燥法是目前保存菌种最好的方法目前保存菌种的最好方法。五.干燥低温抑菌法消毒机制：引起菌体蛋白变性、凝固:醇类(皮肤,体温计)干扰细菌的酶系统:重金属盐类损伤细菌的细胞膜:表面活性剂消毒剂的种类：酚类、醇类、重金属盐类、氧化剂、表面活性剂、烷化剂(甲醛)。消毒剂的特点：作用无选择性对人体

5、细胞有损伤故只能外用,不能内服。消毒剂的应用：病人排泄物与分泌物、皮肤、粘膜、手、空气、饮水、器械、环境。二化学消毒灭菌法微生物的种类:敏感性由高到低依次为:真菌、细菌繁殖体、有包膜病毒、无包膜病毒、分枝杆菌、细菌芽胞。微生物的物理状态:营养差,抵抗力强;细菌自稳定期开始,抵抗力差.微生物的数量:消毒剂的性质、浓度与作用时间(70%乙醇)温度:酸碱度:有机物:脓汁、痰第三节影响消毒灭菌效果的因素一、病原微生物的分类根据传染性、感染后对个体或者群体的危害程度，病原微生物分为四类：第一类是指能够引起人类或者动物非常严重疾病的微生物，以及我国尚未发现或者已经宣布消灭的

6、微生物。天花病毒,新疆出血热病毒,埃博拉病毒等.第二类是指能够引起人类或者动物严重疾病，比较容易直接或者间接在人与人、动物与人、动物与动物间传播的微生物。艾滋病毒,霍乱弧菌,结核杆菌等.第四节病原微生物实验室生物安全第三类是指能够引起人或动物疾病，但一般情况下对人、动物或环境不构成严重危害，传播风险有限，实验室感染后很少引起严重疾病，并且具备有效治疗和预防措施的微生物。肝炎病毒,流感病毒,金黄色葡萄球菌,伤寒沙门菌等.第四类是指在通常情况下不会引起人或动物疾病的微生物。如小鼠白血病病毒等。第一类、第二类统称为高致病性病原微生物一、二级实验室不得从事高致病性病原微

7、生物实验活动。三级、四级实验室从事高致病性病原微生物实验活动。二、病原微生物实验室的分级从事高致病性病原微生物相关实验活动应当有２名以上的工作人员共同进行。在同一个实验室的同一个独立安全区域内，只能同时从事一种高致病性病原微生物的相关实验活动。应有健全安全保卫制度Biosafetylevel4,personnelmustworkinspecialsuitswithairsuppliedviahoses. Suchworkisgenerallydoneinseparatebuildingswithextremesecurity.