高中生物同步课件：1.3测定微生物的数量(中图版选修1)

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1、第3节　测定微生物的数量学习导航1.概述微生物计数的基本方法。2.运用稀释平板法测定样品中微生物的数量。[重、难点]新知初探思维启动一、直接计数法1.常用方法：显微镜直接计数法。2.具体步骤：将待测样品制成悬液→取一定量的悬液放在显微镜下进行计数→观察并计算出单位体积内的微生物总数。3.优点4.缺点：难以计数______的细菌。5.适用范围：一般适用于纯培养悬浮液中各种____________的计数。二、间接计数法1.常用方法：________________。所需设备_____，可迅速得到结果能观察到微生物的__________简单形态特征微小单细

2、胞菌体稀释平板计数法2.具体步骤：需要将待测样品配制成均匀的____________并使其均匀分布于平板中的培养基内，经过培养后，统计培养基中出现的________,即可推算出检测样品中的活菌数。3.优点：在样品中含菌数_______的情形下也可以完成计数。系列稀释液菌落数较少判一判(1)在用直接计数法测量培养瓶中酵母菌时，应在培养液静置一段时间后，从瓶底部吸取液体样本。(×)(2)用稀释平板计数法，通过观察菌落，得出的数值往往比实验值要大。(×)(3)在计数时，用于培养的器皿要进行灭菌。(√)三、间接计数法实例1.土壤中好气性细菌的计数(1)制备土

3、壤稀释液取土壤表层_____________处的土样。准确称取1g土样，放入盛有___mL无菌水的锥形瓶中，振荡20min后制成102倍的稀释液。然后进行系列稀释，得到103、104、105、106的系列稀释菌液。5cm～10cm99(2)取样及倒平板：每个号码设置__个重复。(3)培养。(4)观察记录①计数时对于细菌、放线菌、酵母菌以每个培养皿内有__________个菌落为宜。霉菌以每个培养皿内有__________个菌落为宜。330～30010～1002.检测天然水源中细菌总数和大肠菌群数(1)细菌总数通常是指1g或1mL检测样品中所含____

4、______的总数,单位用cfu/g(mL)表示。细菌菌落(2)大肠菌群数通常是指每100g或100mL检测样品中所含大肠菌群的实验数值，以(MPN)表示。大肠菌群是指在____℃条件下，24h内能发酵______，产酸产气的一类___氧或_______氧型革兰氏阴性无芽孢杆菌的总称。大肠菌群数的检测，常用__________法，使用乳糖胆盐蛋白胨培养基、___________琼脂培养基(EMB培养基)和乳糖发酵管。37乳糖需兼性厌多管发酵伊红－美蓝3.土壤中分解尿素细菌的计数有些细菌含有__________酶，能将尿素琼脂培养基中的尿素分解生成氨，

5、氨溶于水变成氢氧化铵，导致培养基变成____性，使酚红指示剂呈现____色。尿素分解碱红想一想土壤有“微生物的天然培养基”之称，为什么？【提示】由于土壤具备了各种微生物生长所需的营养、水分、空气、酸碱度、渗透压和温度等条件，是微生物生活的良好环境。对微生物来说，是微生物的“大本营”；对人类来说，是最丰富的“菌种资源库”。要点突破讲练互动要点一　直接计数法和间接计数法的比较1.显微镜直接计数法(1)原理：利用特定细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下计算一定容积的样品中微生物的数量。(2)方法：用计数板计数。计数板是特制的载玻片，其上有特定的面积为1mm

6、2，高为0.1mm的计数室，一个计数室又被分成25个(或16个)中格，每个中格再被划分成16个(或25个)小格，每个计数室都由400个小格组成。(3)操作：将稀释的样品滴在计数板上，盖上盖玻片，然后在显微镜下计数4～5个中格中的细菌数，并求出每个小格所含细菌的平均数，再按计算公式求出每毫升样品中所含的细菌数。(4)计算公式每毫升原液所含细菌数＝每小格平均细菌数×400×10000×稀释倍数(5)缺点：不能区分死菌与活菌。2.间接计数法(活菌计数法)(1)原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌，通过统计平板

7、上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。(2)操作①设置重复组,增强实验的说服力与准确性。将待测样品经一系列10倍稀释，然后选择三个稀释度的菌液，分别取0.1mL接种到已制备好的平板上，然后用无菌涂布器将菌液涂布在整个平板表面，放在适宜的温度下培养计数菌落数。为使结果接近真实值，可将同一稀释度菌液加到三个或三个以上的平板上,经涂布、培养，计算出菌落平均数。②为了保证结果准确，要选择一个合适的稀释倍数，且同一稀释倍数的各个重复组菌落数要相近，若设置的重复组中结果相差太远,意味着操作有误，需重新实验。(3)优点：能观察菌落特征。在探究培养液中酵母菌

8、种群数量变化的实验中，需利用计数板对微生物细胞进行直接计数。计数板是一个特制的可在显微镜下观察的载玻片，样品