DB43_T 1532-2018 中华鳖病毒性腮腺炎检疫技术规程

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1、ICS65.150B52DB43湖南省地方标准DB43/T1532—2018中华鳖病毒性腮腺炎检疫技术规程QuarantinespecificationforviralparotitisoftheChinesesoft-shelledturtle2018-12-25发布2019-03-25实施湖南省市场监督管理局发布DB43/T1532—2018目次前言………………………………………………………………………………………………………Ⅱ1范围……………………………………………………………………………………………………12规范性引用文件…………………

2、……………………………………………………………………13术语和定义……………………………………………………………………………………………14仪器设备………………………………………………………………………………………………15主要试剂材料…………………………………………………………………………………………16诊断方法………………………………………………………………………………………………27结果综合判定…………………………………………………………………………………………3附录A（资料性附录）中华鳖病毒性腮腺炎的病理变化……………………………………

3、…………4附录B（资料性附录）巢式PCR电泳结果………………………………………………………………5IDB43/T1532—2018前言本标准按GB/T1.1—2009给出的规则起草。请注意本标准某些内容可能涉及专利，本标准发布机构不承担识别这些专利的责任。本标准由湖南省畜牧水产局提出并归口。本标准起草单位：湖南农业大学、常德市河州水产有限公司。本标准主要起草人：钟蕾、曾丹、胡毅、王晓清、王国顺、文祝友、顾宇、石勇。IIDB43/T1532—2018中华鳖病毒性腮腺炎检疫技术规程1范围本标准规定了中华鳖病毒性腮腺炎（Viralparotitiso

4、ftheChinesesoft-shelledturtle）检疫的术语和定义、仪器设备、试剂材料和诊断方法等。本标准适用于我省中华鳖病毒性腮腺炎的诊断与检疫。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件，凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法SC/T7014水生动物检疫实验技术规范SC/T7103水生动物产地检疫采样技术规范SC/T7216—2012鱼类病毒性神经坏死病（VNN）诊断技术规程3术语和定义下列术语和

5、定义适用于本文件。3.1中华鳖病毒性腮腺炎中华鳖病毒性腮腺炎（ViralparotitisoftheChinesesoft-shelledturtle）又名肿颈病，病原为中华鳖虹彩病毒（Soft-shelledTurtleIridovirus，STIV）。主要症状为颈部肿大，脏器出血，腹甲上有出血斑，底板苍白。病鳖因水肿导致运动迟缓，不愿入水，常静卧食台或晒台引颈呼吸，不食不动，最后伸颈死亡。本病常年均可发生，危害性大，传染性强，易形成爆发。对稚鳖和幼鳖的危害性大，目前已发展至对生产全过程都能构成威胁。中华鳖病毒性腮腺炎的诊断方法包括综合临床诊

6、断、病理学检查、病原学诊断和分子生物学检测。4仪器设备主要仪器设备为：高速冷冻离心机，超净工作台，生化培养箱，超低温冰箱，微量可调移液器，组织切片机，光学显微镜，电子显微镜，PCR仪，电泳仪，凝胶成像系统等。其它仪器设备应符合SC/T7103和SC/T7014的规定。5试剂材料5.1实验用水应符合GB/T6682中一级水的要求。5.2所有实验用试剂均为分析纯。核酸提取试剂盒及巢式PCR所需试剂应选用专业试剂公司提供的商1DB43/T1532—2018品化试剂及试剂盒。5.3巢式PCR引物：外引物对：STIV-P1：5’-CGCATGTCTTCT

7、GTAACTGG-3’STIV-P2：5’-CGTTACAAGATTGGGAATCC-3’内引物对：STIV-P3：5’-CGCGATAGGCTACTATAACATGG-3’STIV-P4：5’-AGATGTGTGACGTTCTGCACC-3’5.4其他试剂的配制参照SC/T7216-2012的规定。6诊断方法6.1临床综合诊断6.1.1临床特征病毒性腮腺炎主要表现特征为：颈部异常肿大。初期腹甲呈现红斑，后随病情加重，造成口鼻出血，腹部红斑及出血点消失，变成灰白色呈贫血状态。解剖后可观察到咽喉的鳃状组织充血糜烂，分泌物明显增多，口、舌、食道充血

8、发炎。肝脏充血肿大为“花肝”，腹腔有大量积水等。6.1.2病理学检查6.1.2.1石蜡组织切片的制作与H&E染色活体解剖取肝、脾、肾、肠、肺组织样品。