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时间:2019-06-30
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1、C57BL/6小鼠一、来源C57BL/6小鼠为生物医学研究中最常用的小鼠品系之一。1921年立特(little)用艾比·拉特洛坡(AbbyLathrop)的小鼠株,雌鼠57号与雄鼠52号交配而得C57BL。1937年从C57BL分离出C57BL/6和C57BL/10两个亚系。1985年从Olac引到中国医学科学院实验动物研究所。二、基本特性品系名称:C57BL/6类别:近交系小鼠毛色:黑色成熟期(雄性):8-10周成熟期(雌性):8-10周交配比例:1:2发情周期:4-5天妊娠期:19-21天平均每窝产仔数(第一胎):6只平均每窝产仔数(第二胎):7
2、只哺乳期:21天平均日饲料消耗量:5g/8周龄平均日饮水消耗量:6-7ml/8周龄三、饲养条件1.温度:20~26℃。2.湿度:40~70%。3.光照:12小时亮12小时暗。4.饲育盒更换频度:配种鼠:每周1次。带仔鼠:每周1-2次。离乳鼠:每周1-2次。5.水瓶更换频度:每周1-2次四、主要特性1、乳腺肿瘤自然发生率低,化学物质难以诱发乳腺和卵巢肿瘤。2、12%有眼部缺陷;雌仔鼠16.8%,雄仔鼠3%为小眼或无眼。用可的松可诱发腭裂,其发生率达20%。3、对放射物质耐受力中等;补体活性高;较易诱发免疫耐受性。4、对结核杆菌敏感。对鼠痘病毒有一定抵抗
3、力。5、干扰素产量较高。6、嗜酒精性高,肾上腺素类脂质浓度低。对百日咳组织胺易感因子敏感。五、主要用途是肿瘤学、生理学、免疫学、遗传学研究中常用的品系。与其他品系相较,C57BL/6最适合动脉粥状硬化伤害的研究。六、C57BL/6小鼠CIA模型的建立目的:建立稳定的C57BL/6小鼠胶原诱导关节炎(CIA)模型,构建进一步进行类风湿关节炎(RA)发病机制及治疗研究的体系。实验动物:近交系C57BL/6(H-2)小鼠40只,雄性,4~5周龄,体重15.00+0.32g。三级环境实验观察。随机配对分为CIA模型组20只,对照组20只。主要试剂与器材:鸡Ⅱ
4、型胶原蛋白、弗氏完全佐剂(completeFreundsadjuvant,CFA)购自美国Chondrex公司;抗小鼠CD4-PE/CY5、IFN-γ-FITC、IL-4一PE及同型对照抗体均购自美国Biolegend公司;佛波酯(PMA)、离子菌素(Ionomycin)、莫能菌素(Monensin)购自美国Sigma公司。匀浆器为德国IKA公司产品;流式细胞仪为美国BD公司产品。模型建立方法:鸡Ⅱ型胶原蛋白溶解于0.05mol/L冰醋酸中,浓度为2mg/ml,将溶解的胶原与CIA等体积混合,冰浴中使用匀浆器充分乳化。免疫动物时,在小鼠尾根部多点皮内
5、注射0.1ml乳剂(含100mg鸡Ⅱ型胶原蛋白和200mg结核分支杆菌)。基础免疫后第21天以同样方法重复,避开初次免疫部位,进行加强免疫。同时,对照组用CFA与0.05mol/L冰醋酸等体积充分乳化后按上述方法进行免疫及21天加强免疫。关节和关节外病变观察及关节炎评分:各关节病变程度按5级评分法“0”:无红肿;“1”:关节红不肿;“2”:关节轻度红肿;“3”:关节中度红肿;“4”:关节重度红肿伴功能障碍。关节炎分数(arthritisscore,AS)为每只小鼠所有病变关节分数的总和,最高分为16分。各剂量组所有小鼠关节炎分数之总和除以该组小鼠的只
6、数,即为该组平均关节炎指数(meanarthriticindex,MAI)结果:对照组小鼠均未发病。模型组小鼠在5O天的发病率达7O%,关节炎评分在3~8分,持续时间大约100天;病理切片显示典型的炎性细胞浸润,滑膜增生,软骨及软骨下骨破坏;外周血Th1/Th2比值升高。结论:应用Ⅱ型胶原能在C57BL/6小鼠上成功建立CIA模型,该模型是进行RA研究的良好动物模型。胶原诱导关节炎(collageninducedarthritis,CIA)模型是一种免疫炎症模型,CIA的特征是多发性关节炎,发病机制和病理特征与人类风湿性关节炎(rheumatoida
7、r—thritis,RA)类似。意义:CIA的建立极大地推进了RA发病机制、治疗等方面的研究。目前对RA发病机制的研究已深入到蛋白质及基因水平,需要进一步明确分子及酶类在自身免疫反应各环节中的精确作用口],建立稳定的CIA模型及检测体系对RA研究具有重要意义。
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