GB 4789.2-1994 食品卫生微生物学检验 菌落总数测定

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1、中华人民共和国国家标准食品卫生微生物学检验GB4789.2一94菌落总数测定代替GB4789.2-84MicrobiologicalexaminationoffoodhygieneDetectionofaerobicbacterialcount1主肠内容与适用范围本标准规定了食品中菌落总数的测定方法。本标准适用于食品中菌落总数的测定.2术语菌落总数是指食品检样经过处理，在一定条件下培养后(如培基成分、培养温度和时间,pH,需氧性质等)，所得1mL(g)检样中所含菌落的总数。本方法规定的培养条件下所得结果，只包括一群在营养琼脂上生

2、长发育的嗜中温性需氧的菌落总数。菌落总数主要作为判定食品被污染程度的标志，也可以应用这一方法观察细菌在食品中繁殖的动态，以便对被检样品进行卫生学评价时提供依据。3引用标准GB4789.28食品卫生微生物学检验染色法、培养基和试剂4设备和材料4.1温箱:36士10Co4.2冰箱:0-4'C.4.3恒温水浴:46士1C,4.4天平。4.5电炉。4.6吸管。4.7广口瓶或三角瓶:容量为500ruL,4.8玻璃珠:直径约5mm,4.9平皿:直径为90mm,4.10试管。4.1，放大镜。4.12菌落计数器。4.13酒精灯。4.14均质器或

3、乳钵。4.15试管架。中华人民共和国卫生郎1994一03一18批准1994一09一01实施GB4789.2一94月﹃16灭菌刀或剪子。月﹃1了灭菌镊子。5培养基和试荆5.1营养琼脂培养基:按GB4789.28中4.7规定。5.2磷酸盐缓冲稀释液:按GB4789.28中3.22规定。5.3生理盐水。5.475%乙醉6检验程序菌落总数的检验程序如下。了操作步驻了.1检样稀释及培养7.1.1以无菌操作，将检样25g(或mL)剪碎放于含有225mL灭菌生理盐水或其他稀释液的灭菌玻璃瓶内(瓶内预置适当数量的玻璃珠)或灭菌乳钵内，经充分振摇

4、或研磨做成1e10的均匀稀释液。固体检样在加入稀释液后，最好置均质器中以8000^-10000r/min的速度处理1min，做成1:10的均匀稀释液。7.1.2用1mL灭菌吸管吸取1，10稀释液ImL,沿管壁徐徐注入含有9mL灭菌生理盐水或其他稀释液的试管内(注意吸管尖端不要触及管内稀释液)，振摇试管，混合均匀，做成1:10。的稀释液。7.1.3另取1mL灭菌吸管，按上条操作顺序，做10倍递增稀释液，如此每递增稀释一次，即换用1支1ml.灭菌吸管。7.1.4根据食品卫生标准要求或对标本污染情况的估计，选择2^-3个适宜稀释度，分

5、别在做10倍递增稀释的同时，即以吸取该稀释度的吸管移1mL稀释液于灭菌平皿内，每个稀释度做两个平皿。7.1.5稀释液移入平皿后，应及时将凉至46℃营养琼脂培养基(可放置子46士1℃水浴保温)注人平皿GB4789.2一94约15mL，并转动平皿使混合均匀。同时将营养琼脂培养基倾入加有1mL稀释液的灭菌平皿内作空白对照。7.1.6待琼脂凝固后，翻转平板，置36士1'C温箱内培养48士2h,7.2菌落计数方法做平板菌落计数时，可用肉眼观查，必要时用放大镜检查，以防遗漏。在记下各平板的菌落数后，求出同稀释度的各平板平均菌落总数。7.3菌

6、落计数的报告7.3.1平板菌落数的选择选取菌落数在30-300之间的平板作为菌落总数测定标准。一个稀释度使用两个平板，应采用两个平板平均数，其中一个平板有较大片状菌落生长时，则不宜采用，而应以无片状菌落生长的平板作为该稀释度的菌落数，若片状菌落不到平板的一半，而其余一半中菌落分布又很均匀，即可计算半个平板后乘2以代表全皿菌落数。平皿内如有链状菌落生长时(菌落之间无明显界线)，若仅有一条链，可视为一个菌落;如果有不同来源的几条链，则应将每条链作为一个菌落计。7.3.2稀释度的选择7.3.2.1应选择平均菌落数在30^-300之间的

7、稀释度，乘以稀释倍数报告之(见表中例1)e7.3.2.2若有两个稀释度，其生长的蔺落数均在30^-300之间，则视两者之比如何来决定。若其比值小于或等于2，应报告其平均数;若大于2则报告其中较小的数字(见表中例2及3),7.3.2.3若所有稀释度的平均菌落数均大于300，则应按稀释度最高的平均菌落数乘以稀释倍数报告之(见表中例4)07.3.2.4若所有稀释度的平均菌落数均小于30，则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数报告之(见表中例5)07.3.2.5若所有稀释度均无菌落生长，则以小于1乘以最低稀释倍数报告之(见表中例6)7

8、.3-2.6若所有稀释度的平均菌落数均不在30^-300之间，其中一部分大于300或小于30时，则以最接近30或300的平均菌落数乘以稀释倍数报告之(见表中例7)07.3.3菌落数的报告菌落数在100以内时，按其实有数报告，大于10。时，采用二位有效数字，在二位