食品卫生微生物学检验菌落总数测定

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1、食品卫生微生物学检验菌落总数测定发布单位:太原市质量技术监督局报送时间：2007年12月19H浏览次数：342附件1GB/T4789.2-2003食品卫生微生物学检验菌落总数测定1范围本标准规定了食品中菌落总数的测定方法。本标准适用于各类食品中菌落总数的测定。2术语菌落总数是指食品检样经过处理，在一定条件下培养后(如培基成分、培养温度和IpH.需氧性质等)，所得1nk(g)检样中所含菌落的总数。本方法规定的培养条件下所得?只包括一群在营养琼脂上生长发育的嗜中温性需氧的菌落总数。菌落总数主要作为判定食品被污染程度的标志，也可以应用这一方法观察细菌在雀繁殖的动态,以便对被检样品进行卫

2、生学评价时提供依据。3引用标准GB/T4789.28食品卫生微生物学检验染色法、培养基和试剂4设备和材料4.1冰箱:0~4°CO4.2恒温培养箱：36±1°CO4.3恒温水浴锅：46±1°CO4.4均质器或灭菌乳钵。4.5架盘药物天平：Og-500gz精确至0.5go46菌落计数器。4.7放大镜4Xo4.8灭菌吸管:1血（具0.01nk刻度）、10nk（具0.1M刻度）。4.9灭菌锥形瓶：500ntLo4.10灭菌玻璃珠。5rung4.11灭菌培养皿：直径90咂4.12灭菌试管。16X16rang4.13广口瓶或三角瓶：容量为500nLo4.14电炉。4.15试管架。4.16酒精

3、灯。4.17灭菌镉子、灭菌刀或剪子等。5培养基和试剂5.1营养琼脂培养基：按GB/T4789.28中4.7规定。5.2磷酸盐缓冲稀释液：按GB/T4789.28中3.22规定。5.30.85峽菌生理盐水。5.475显醇。6检验程序菌落总数的检验程序如下。检样选择2-3个适宜的稀释度各取1nt分别加入灭菌培养皿内做成几个适当倍数的稀释液每皿内加入适量营养琼脂菌落计数36°C±1°C48h±2h报告7操作步骤7.1检样稀释及培养7.1.1以无菌操作，取样25血或25g放入225nt灭菌生理盐水中，经充分振摇作成1均匀稀释液。固体检样在加入稀释液后，最好置均质器中以8000r/mn〜1

4、0000〃怖n的速度处］1市几做成1:10的均匀稀释液。7.1.2用1ntL灭菌吸管吸取1:10稀释液沿管壁徐徐注入含有9nt灭菌生理盐其他稀釋液的试管内（注意吸管尖端不要触及管内稀释液），振摇试管，混合均匀，做万100的稀释液。7.1.3另取1血灭菌吸管,按上条操作顺序，做10倍递增稀释液,如此每递增稀释・7.1.4即换用1支火菌吸管。根据食品卫生标准要求或对标本污染情况的估计，选择2~3个适宜稀释度仕做10倍递增稀释的同时，即以吸取该稀释度的吸管移1ntL稀释液于灭菌平皿内，每个度做两个平III7.1.5稀释液移入平皿后，应及时将凉至46戈营养琼脂培养基（可放置于46±1弋水

5、;温）注入平皿约15nti,并转动平皿使混合均匀。同时将营养琼脂培养基倾入加有1ntL務的灭菌平皿内作空白对照7.1.6待琼脂凝固后,翻转平板,置36±1弋温箱内培养48±2^7.2菌落计数方法做平板菌落计数时，可用肉眼观查，必要时用放大镜检查，以防遗漏。在记下各耳菌落数后，求出同稀释度的各平板平均菌落总数。7.3菌落计数的报告7.3.1平板菌落数的选择选取菌落数在30〜300之间的平板作为菌落总数测定标准。一个稀释度使用两个1应采用两个平板平均数，其中一个平板有较大片状菌落生长时，则不宜采用，而应以才菌落生长的平板作为该稀释度的菌落数，若片状菌落不到平板的一半，而其余一半中匿布

6、又很均匀，即可计算半个平板后乘2以代表全皿菌落数。平皿内如有链状菌落生长f落之间无明显界线），若仅有一条链，可视为一个菌落；如果有不同来源的几条链,贝！每条链作为一个菌落计。7.3.2稀释度的选择7.3.2.1应选择平均菌落数在30〜300之间的稀释度,乘以稀释倍数报告之（见表1IDo7.3.2.2若有两个稀释度，其生长的菌落数均在30-300之间，则视两者之比如何来;若其比值小于或等于2,应报告其平均数；若大于2则报告其中较小的数字（见表中例3）o7.3.2.3若所有稀释度的平均菌落数均大于300,则应按稀释度最高的平均菌落数乘释倍数报告之（见表1中例4）。7.3.2.4若所有

7、稀释度的平均菌落数均小于30,则应按稀释度最低的平均菌落数乘U倍数报告之（见表1中例5）。7.3.2.5若所有稀释度均无菌落生长,则以小于1乘以最低稀释倍数报告之（见表1I6）o7.3.2.6若所有稀释度的平均菌落数均不在30〜300之间,其中一部分大于300或小时，则以最接近30或300的平均菌落数乘以稀释倍数报告之（见表1中例7）o7.3.3菌落数的报告菌落数在100以内时，按其实有数报告，大于100时,采用两位有效数字，在两化数字后面的数值，以四舍五入方法计算。为了缩短数字