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《GB4789.2-1994 食品卫生微生物学检验 菌落总数测定.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、中华人民共和国国家标准食品卫生微生物学检验GB4789.2-94菌落总数测定代替GB4789.2-84MicrobiologicalexaminationoffoodhygieneDetectionofaerobicbacterialcount───────────────────────────────────────1主题内容与适用范围本标准规定了食品中菌落总数的测定方法。本标准适用于食品中菌落总数的测定。2术语菌落总数是指食品检样经过处理,在一定条件下培养后(如培基成分、培养温度和时间、pH、需氧性质等),所得1mL(g)检样中所含菌落的总数。本方法规定的培养条件下所得结果,只包括
2、一群在营养琼脂上生长发育的嗜中温性需氧的菌落总数。菌落总数主要作为判定食品被污染程度的标志,也可以应用这一方法观察细菌在食品中繁殖的动态,以便对被检样品进行卫生学评价时提供依据。3引用标准GB4789.28食品卫生微生物学检验染色法、培养基和试剂4设备和材料4.1温箱：36±1℃。4.2冰箱：0～4℃。4.3恒温水浴：46±1℃。4.4天平。4.5电炉。4.6吸管。4.7广口瓶或三角瓶：容量为500mL。4.8玻璃珠：直径约5mm。4.9平皿：直径为90mm。4.10试管。4.11放大镜。4.12菌落计数器。4.13酒精灯。4.14均质器或乳钵。4.15试管架。4.16灭菌刀或剪子。4.
3、17灭菌镊子。5培养基和试剂5.1营养琼脂培养基：按GB4789.28中4.7规定。5.2磷酸盐缓冲稀释液：按GB4789.28中3.22规定。5.3生理盐水。5.475％乙醇。6检验程序菌落总数的检验程序如下。.www.bzxzk.com.┌─────┐│检样│└─────┘↓┌─────────────┐│做成几个适当倍数的稀释液│└─────────────┘↓┌──────────────┐│选择2～3个适宜稀释度││各以1mL分别加入灭菌平皿内│└──────────────┘↓┌─────────────┐│每皿内加入适量营养琼脂│└─────────────┘36±1℃↓4
4、8±2h┌─────┐│菌落计数│└─────┘↓┌──────┐│报告│└──────┘7操作步骤7.1检样稀释及培养7.1.1以无菌操作,将检样25g(或mL)剪碎放于含有225mL灭菌生理盐水或其他稀释液的灭菌玻璃瓶内(瓶内预置适当数量的玻璃珠)或灭菌乳钵内,经充分振摇或研磨做成1∶10的均匀稀释液。固体检样在加入稀释液后,最好置均质器中以8000～10000r/min的速度处理1min,做成1∶10的均匀稀释液。7.1.2用1mL灭菌吸管吸取1∶10稀释液1mL,沿管壁徐徐注入含有9mL灭菌生理盐水或其他稀释液的试管内(注意吸管尖端不要触及管内稀释液),振摇试管,混合均匀,做成1
5、∶100的稀释液。7.1.3另取1mL灭菌吸管,按上条操作顺序,做10倍递增稀释液,如此每递增稀释一次,即换用1支1mL灭菌吸管。7.1.4根据食品卫生标准要求或对标本污染情况的估计,选择2～3个适宜稀释度,分别在做10倍递增稀释的同时,即以吸取该稀释度的吸管移1mL稀释液于灭菌平皿内,每个稀释度做两个平皿。7.1.5稀释液移入平皿后,应及时将凉至46℃营养琼脂培养基(可放置于46±1℃水浴保温)注入平皿约15mL,并转动平皿使混合均匀。同时将营养琼脂培养基倾入加有1mL稀释液的灭菌平皿内作空白对照。.www.bzxzk.com.7.1.6待琼脂凝固后,翻转平板,置36±1℃温箱内培养4
6、8±2h。7.2菌落计数方法做平板菌落计数时,可用肉眼观查,必要时用放大镜检查,以防遗漏。在记下各平板的菌落数后,求出同稀释度的各平板平均菌落总数。7.3菌落计数的报告7.3.1平板菌落数的选择选取菌落数在30～300之间的平板作为菌落总数测定标准。一个稀释度使用两个平板,应采用两个平板平均数,其中一个平板有较大片状菌落生长时,则不宜采用,而应以无片状菌落生长的平板作为该稀释度的菌落数,若片状菌落不到平板的一半,而其余一半中菌落分布又很均匀,即可计算半个平板后乘2以代表全皿菌落数。平皿内如有链状菌落生长时(菌落之间无明显界线),若仅有一条链,可视为一个菌落；如果有不同来源的几条链,则应将
7、每条链作为一个菌落计。7.3.2稀释度的选择7.3.2.1应选择平均菌落数在30～300之间的稀释度,乘以稀释倍数报告之(见表中例1)。7.3.2.2若有两个稀释度,其生长的菌落数均在30～300之间,则视两者之比如何来决定。若其比值小于或等于2,应报告其平均数；若大于2则报告其中较小的数字(见表中例2及3)。7.3.2.3若所有稀释度的平均菌落数均大于300,则应按稀释度最高的平均菌落数乘以释稀倍数报告之(见表中例4)。7.3.2
