MLPA检测原理及应用-罗娥娜 20150118

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1、MLPA检测原理及应用——罗娥娜2015-01-18主要内容☆MLPA技术简介☆MLPA技术工作流程☆MLPA应用领域☆MLPA技术简介MLPA（multiplexligation-dependentprobeamplification），是于2002年由Schouten等首先报道，是近几年发展起来的一种针对待检DNA序列进行定性和半定量分析的新技术。该技术高效、特异，在一次反应中可以检测50个左右的核苷酸序列突变，目前已经应用于多个领域、多种疾病的研究。传统PCR与MLPA技术的差别传统PCR与MLPA技术的差别MLPA探针构造通用引物通用引物3’5’特异识别序列填充序列3

2、’5’目标序列主要内容☆MLPA技术简介☆MLPA技术工作流程☆MLPA应用领域☆MLPA技术工作流程1、变性&2、杂交PCR下游引物PCR上游引物5’填充序列(对于不同探针长短不同)杂交序列5’5’……3’目标序列A5’3’目标序列B5’3’目标序列N5’3、连接5’3’目标序列A5’5’3’目标序列B5’……5’3’目标序列N5’4、扩增5’目标序列A3’5’目标序列A3’5’目标序列A3’5’目标序列A3’5’目标序列B3’5’目标序列B3’5’目标序列B3’5’目标序列B3’…………5’3’5’3’目标序列N目标序列N5’3’5’3’目标序列N目标序列N5、毛细管电泳

3、分析主要内容☆MLPA技术简介☆MLPA技术工作流程☆MLPA应用领域☆MLPA应用领域1、肿瘤诊断2、微小缺失综合征3、亚端粒异常筛查4、甲基化检测5、CNV……MLPA的优势多重连接依赖探针扩增技术不仅融合了DNA探针杂交和PCR技术的特点，且发挥了其连接依赖的特色，优点如下：自动化程度高可检测已部分降解的样本特异性好，能够检测出单所需样本量小，最少仅MLPA的个碱基的突变或SNP及基需20ngDNA即可完成优点因拷贝数一倍量的增加或检测减少。可实现多重检测，同检测方法灵活时对多种靶基因位点进行检测谢谢！