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《非洲山毛豆叶片中鱼藤酮的提取方法》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、第22卷第4期 华南农业大学学报Vol.22,No.42001年10月JournalofSouthChinaAgriculturalUniversityOct.2001文章编号:1001-411X(2001)04-0029-04非洲山毛豆叶片中鱼藤酮的提取方法黄继光,徐汉虹,周利娟,刘新清,江定心(华南农业大学昆虫毒理研究室,广东广州510642)摘要:用索氏、冷浸和振荡抽提3种方法和6种不同的溶剂对非洲山毛豆叶片进行了提取研究,并用HPLC测定了提取物和植物叶片干粉中鱼藤酮的含量.结果表明,用氯仿振荡抽
2、提紫花品种叶片得到的粗提物中鱼藤酮的含量最高,w为9.70%;丙酮索氏抽提紫花品种叶片所求得的植物干粉中鱼藤酮的含量最高,w为0.72%.中等极性溶剂如氯仿、苯、乙酸乙酯、丙酮等对鱼藤酮的提取率较高,建议实验室内提取溶剂用氯仿或丙酮,工厂化生产时用苯较好.关键词:非洲山毛豆;提取;鱼藤酮含量中图分类号:S482.39文献标识码:A 非洲山毛豆(TephrosiavogeliiHookf.)是属于豆(3)振荡提取法:称取20g干粉,加入400mL的科灰叶属的一种有效杀虫植物,其主要活性成分为溶剂置于恒温摇床上振
3、荡抽提48h,以下步骤同冷[1～4]鱼藤酮及其类似物.植株的叶片、茎秆、豆荚、浸法.根、种子等部位都含有活性成分,其中叶片中鱼藤酮1.2.2 提取物的配制 根据提取率准确称取一定[4～6]类似物的含量最高,w可达4.25%.以前人们量的粗提物,用丙酮定容至每mL含1g植物干粉,逐[7]用比色法,测定的是提取物中鱼藤酮及其类似物级稀释100倍,即0.01g/mL,密封待测.的总量,结果的准确度不高.为准确测定鱼藤酮这一1.3 鱼藤酮的定性和定量测定主要有效成分在非洲山毛豆中的含量,本文用不同用美国惠普公司生产的1
4、100型HPLC配置:四提取方法和不同溶剂对非洲山毛豆叶片干粉进行提元梯度泵、紫外可见光检测器、手动进样器、惠普化取,并用高效液相色谱(HPLC)法对叶片和提取物中学工作站、ODS柱(5μm,125mm×4mm).测定条件:的鱼藤酮含量进行测定.流动相为甲醇∶水=69∶31(v∶v);流速0.8mL/min;进样量10μL;检测波长299nm;柱温室温;检测灵敏1 材料与方法度AUFS=0.001.1.1 材料1.3.1 定性 根据标样的出峰时间(保留时间)进非洲山毛豆紫花和白花品种叶片采于华南农业行定性.大学
5、昆虫毒理研究室杀虫植物标本园内,烘干(45～1.3.2 定量 根据已知浓度标样鱼藤酮的吸收峰面50℃),粉碎.鱼藤酮纯品(w为97%),由Sigma公司积和样品鱼藤酮吸收峰面积与它们各自的含量成正生产.比的关系测定试样中鱼藤酮的含量,计算公式如下:1.2 方法S样×C标C样=1.2.1 提取方法 用石油醚、氯仿、苯、乙酸乙酯、S标S标和S样分别表示标样和样品的吸收峰面积;丙酮、甲醇等6种极性不同的有机溶剂按下列方法进行提取(所有溶剂均为分析纯).每处理重复3次.C标和C样分别表示标样和样品的浓度.(1)索氏抽提
6、法:分别称取紫花和白花品种的植干粉中的鱼藤酮含量粗提物中的鱼藤酮含量=×物干粉20g,用滤纸包好放入索氏提取器中提取,回提取率流至溶剂为无色时停止.将提取液浓缩,得粗提物.100%.(2)冷浸法:称取20g干粉,加入400mL的有机2 结果与分析溶剂置于避光暗处(24～25℃)浸提48h,过滤出溶剂,再加入200mL溶剂浸提24h,过滤.用100mL溶 用不同溶剂和不同方法提取非洲山毛豆不同品剂冲洗滤渣,合并3次的滤液,浓缩得浸提粗提物.种叶片后所测定的结果见表1～6. 收稿日期:2001-03-19作者简介
7、:黄继光(1976-),男,现为华南农业大学在读硕士研究生.基金项目:高等学校骨干教师资助项目[教技司(2000)65号];中华农业科教基金人才基金资助项目(93-03-B-06)30华 南 农 业 大 学 学 报第22卷在索氏、冷浸和振荡提取中,紫花品种叶片干粉物,w分别是8.01%、6.34%和6.73%、4.74%.石油中鱼藤酮含量最高的依次是丙酮、氯仿、丙酮作提取醚提取物中鱼藤酮含量虽然比较高,但是它的提取溶剂,w分别为0.72%、0.63%、0.68%;白花品种叶率较低,w分别只有5.41%和4.58
8、%,可能是因为提片干粉中鱼藤酮含量最高的依次是苯、丙酮和丙酮3取出来的杂质较少,而使提取物中鱼藤酮的含量增种溶剂,w分别是0.57%、0.48%、0.43%,其中振荡高的缘故.而振荡抽提中,紫花和白花品种提取物中提取中白花品种丙酮和乙酸乙酯提取计算求出的植鱼藤酮含量最高的分别是氯仿提取物和丙酮提取物干粉中的鱼藤酮含量相同.物,含量分别为9.70%和6.43%.在索氏提取和冷浸法提取中,
