玉米体细胞抗盐突变体的筛选及耐盐性鉴定

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1、河南农业大学硕士学位论文玉米体细胞抗盐突变体的筛选及耐盐性鉴定姓名：郑霞申请学位级别：硕士专业：作物遗传育种指导教师：季良越20030601致谢在即将结束硕士研究生学习的时刻，回看三年的学习生活，期间的苦辣甜酸让我感慨万千，尤为难忘的是和导师季良越教授相处的一千多个平凡的日子。三年来从论文的选题、设计、工作安排到最后论文的修改，都是在季老师的悉心指导下完成的。季老师以她一丝不苟的治学态度、脚踏实地的工作作风和渊博的专业知识影响着我，使我在学业上受益匪浅；生活中恩师如慈母般的关心与爱护更使我能够以健康的精神状态顺利完成学业。我想，无论我走到哪里，我都会

2、想起季老师平时的谆谆教诲和母亲般慈爱的叮咛，以后我就要单飞了，我想深情地说一声：“谢谢您，季老师。”十分感谢导师组成员吕德彬、崔党群、陈彦惠、吴建宇和李玉玲等几位教授以及胡彦民、刘宗华、汤继华、季洪强等几位老师给我的指导，感谢曲鹏师傅和工人曲娟对我实验上的大力帮助，还要感谢研究生处和农学院的老师们三年来对我的关心和指导。河南省农业科学院陈占宽研究员和河南农业大学胡彦民副教授的精心审阅了论文，并提出了中肯的修改意见，在此谢谢两位老师。感谢我的同门兄长邓士政、师姐韦小敏和师弟付金锋对我学习和生活上的帮助；感谢我的同寝好友孙军利、孙晓丽、殷全玉三年来对我生

3、活上的帮助：感谢2000级和2001级研究生对我学习和实验上的帮助，在此还要对98级、99级实习生为本论文的完成作了部分室内工作表示特别感谢。在此一并向三年来给我热情帮助和支持的所有老师、同学和朋友致以诚挚的感谢。最后，还要感谢我开明的父母和疼爱我的姐姐，谢谢你们多年来对我的情感支持，仅以此文献给你们!谢谢!郑霞2003年6月摘要玉米是一种主要农作物，同时是盐敏感作物，提高玉米的耐盐性，培育玉米耐盐品种具有重要的意义。本试验利用玉米幼胚作为外植体诱导愈伤组织，并以NaCl为筛选剂，采用多步选择法，先在含1．o％．1．5％一2．0％NaCI的筛选培养基

4、上连续筛选三次，然后转入无盐培养基上培养三代，得到耐盐愈伤组织变异系。分化出的R0代再生植株，经温室缓苗后移栽到大田，于开花期自交授粉得到R。代种子。测定不同浓度盐胁迫下愈伤组织相对生长量、干物质累积、游离脯氨酸含量和Na+、K+含量，并测定1．o％NaCI胁迫下R。代再生株叶片的可溶性糖和相对电导率以及不同浓度盐胁迫下R。代种子的发芽率、R。代幼苗的株高、根条数、主根长和游离脯氨酸含量等与耐盐性相关的指标，结果如下：1)随着盐胁迫强度的增加，对照和耐盐变异系的相对生长量下降，但同样胁迫下变异系的相对生长量仍高于对照，变异系干物质的积累大于对照；随着

5、NaCl浓度的升高，对照和变异体的脯氨酸含量均增加，且变异体脯氨酸含量的增幅大于对照；对照和耐盐愈伤组织变异体细胞内Na+含量在。一1．o％的NaCI浓度范围内随NaCI浓度的升高急剧增加，当NaCI浓度继续增加时，对照细胞内Na+含量明显降低，而耐盐愈伤组织变异体细胞内仍维持相当高的Na+水平。2)在相同的盐胁迫下耐盐变异体‰植株叶片的相对电导率低于对照，可溶性糖含量和脯氨酸含量高于对照，愈伤组织水平的高脯氨酸特性在R。代再生植株得以保持，表明变异系的R0代再生植株是耐盐的。玉米种子发芽对盐极其敏感，随着盐浓度的增加，R。代种子发芽率下降，但对照发

6、芽率下降幅度大于耐盐变异体R1种子，变异系R。代种子在0．4--2．0％NaCI浓度培养基中的发芽率均高于对照，变异系与对照的苗高、根的条数和主根长随着盐浓度的增加都呈下降趋势，然而相同盐浓度下变异系上述三项指标均高于对照。R，代2000级顶上研究生毕业论文再生植株叶片脯氨酸含量较愈伤组织和R0代再生植株明显降低，尽管R。代再生植株游离脯氨酸绝对含量下降，但变异系仍比对照系高，说明变异系积累脯氨酸的能力强于对照。由此看来我们得到的耐盐变异体的R．代种子确实是耐盐的，R，代幼苗也具有较强的耐盐性，表明耐盐变异体的耐盐性是可以遗传的，筛选是有效的。关键词

7、：玉米；愈伤组织；耐盐变异体；再生植株；种子2000级碳J：研究生毕业论文1文献综述1．1植物组织培养植物组织培养是指在无菌条件下，将离体的植物器官(根、茎、叶、花、果实、种子等)，组织(如形成层、花药组织、胚乳及皮层等)、细胞(体细胞和生殖细胞)以及原生质体，培养在人工控制的培养基上，给予适当的培养条件，使其长成完整的植株，统称为植物组织培养⋯。植物组织培养作为--f]技术科学，从哈布兰特提出细胞全能性和进行离体培养开始，在无数科学家的努力下，经过近一个世纪的不断发展日趋完善和成熟。今天已广泛应用于作物脱毒、快速繁殖、作物育种、种质资源的保存和次生

8、代谢物质的生产等领域，并取得了巨大的经济效益、社会效益和生态效益，成为当代生物科学中应用最广泛的技术之一。植