玉米愈伤组织的耐盐性筛选

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1、玉米愈伤组织的耐盐性筛选赵邯郸，关淑艳，徐丹丹，刘双，陈沼汀（吉林农业大学生命科学学院，长春１３０１１８）摘要：以玉米（ＺｅａｍａｙｓＬ．）自交系Ｈ９９、丹９８８、丹５９８的胚性愈伤组织为材料，利用农杆菌介导的方法将带有ｐＣＡＭＢＩＡ１３０１－ＢＡＤＨ抗盐碱基因转入供试品种的胚性愈伤中，通过愈伤组织对盐（ＮａＣｌ）的敏感性试验，确定愈伤组织适宜选择压，同时研究了２，４－Ｄ浓度对筛选结果的影响。结果表明，玉米自交系Ｈ９９在盐筛培养基中ＮａＣｌ浓度为２００ｍｍｏｌ／Ｌ，２，４－Ｄ浓度为１.0ｍｇ／Ｌ时筛选结果最佳。对移栽成活的４８棵抗

2、盐转ｐＣＡＭＢＩＡ１３０１－ＢＡＤＨ基因植株，经ＰＣＲ检测有３株呈阳性，阳性株率达到６．３％，初步证明目的基因已整合到玉米基因组中。..关键词：玉米（ＺｅａｍａｙｓＬ．）；愈伤组织；耐盐性；筛选；ＮａＣｌ中图分类号：Ｓ５１３文献标识码：A：0439－８114（２０15）01－0206-04ＤＯＩ：１０．１４０８８／ｊ．ｃｎｋｉ．ｉｓｓｎ０４３９－８１１４．２０１５．０１．０54ＳｃｒｅｅｎｉｎｇＳａｌｔＴｏｌｅｒａｎｃｅｏｆＭａｉｚｅＣａｌｌｕｓＺＨＡＯＨａｎ－ｄａｎ，ＧＵＡＮＳｈｕ－ｙａｎ，ＸＵＤａｎ－ｄａｎ，ＬＩＵＳｈｕａｎｇ

3、，ＣＨＥＮＺｈａｏ－ｔｉｎｇ（ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＬｉｆｅＳｃｉｅｎｃｅ，ＪｉｌｉｎＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｃｈａｎｇｃｈｕｎ１３０１１８，Ｃｈｉｎａ）Ａｂｓｔｒａｃｔ：ｐＣＡＭＢＩＡ１３０１－ＢＡＤＨｓａｌｔｔｏｌｅｒａｎｃｅｇｅｎｅｓｗｅｒｅｔｒａｎｓｆｅｒｒｅｄｉｎｔｏｍａｉｚｅｉｎｂｒｅｄｌｉｎｅｓＨ９９，Ｄａｎ９８８，Ｄａｎ５９８ｅｍｂｒｙｏｇｅｎｉｃｃａｌｌｕｓｂｙｔｈｅＡｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ－ｍｅｄｉａｔｅｄｍｅｔｈｏｄ．Ｔｈｅａｐｐｒｏｐｒｉａｔｅｓｅｌｅｃｔｉｏｎｐｒｅｓｓｕｒｅｏｆｃａｌ

4、ｌｕｓｗａｓｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄｂｙｃａｌｌｕｓｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓｓａｌｔ（ＮａＣｌ）ａｎｄｔｈｅｅｆｆｅｃｔｓｏｆ２，４－Ｄｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｏｎｓｃｒｅｅｎｉｎｇwerestudied．ＴｈｅｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｔｈｅｓｃｒｅｅｎｉｎｇｗｅｒｅｂｅｓｔｗｈｅｎｔｈｅｍａｉｚｅｉｎｂｒｅｄｌｉｎｅＨ９９ｉｎｓｃｒｅｅｎｉｎｇｍｅｄｉｕｍＮａＣｌｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｏｆ２００ｍｍｏｌ／Ｌ，２，４－Ｄｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｏｆ１.0ｍｇ／Ｌ．Ｔｈｅｔｒａｎｓｐｌａｎｔｉｎｇｓ

5、ｕｒｖｉｖａｌ４８ｓａｌｔｔｏｌｅｒａｎｃｅｐｌａｎｔｓｗｅｒｅｔｅｓｔｅｄｂｙＰＣＲ.Tｈｅｒｅwereｔｈｒｅｅｐｏｓｉｔｉｖｅplantwithｔｈｅｒａｔｅｏｆｐｏｓｉｔｉｖｅｓｔｒａｉｎｓof６．３％.Itisindicatedthatｔｈｅｔａｒｇｅｔｇｅｎｅｗａｓｉｎｔｅｇｒａｔｅｄｉｎｔｏｔｈｅｍａｉｚｅｇｅｎｏｍｅ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｍａｉｚｅ（ＺｅａｍａｙｓＬ．）；ｃａｌｌｕｓ；ｓａｌｔｔｏｌｅｒａｎｃｅ；ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ；ＮａＣｌ收稿日期：２０１４－０６－１６基金项目：国家成果转化项目（２０１３ＧＢ２Ｂ１０

6、０１２５）；吉林省科技厅科技支撑项目（２０１２０２１５）；吉林农业大学启动基金项目（２０１２４２）简介：赵邯郸（１９９０－），男，黑龙江绥化人，在读硕士研究生，研究方向为植物分子生物学与基因工程，（）１５８４４０１５２６６（电子信箱）ｚｈｄ０３２７＠ｓｉｎａ．ｃｏｍ；通信，关淑艳（１９７１－），女，教授，博士，主要从事生物化学与分子生物学研究，（）１３５０４４６７９６２（电子信箱）４５８１９４０９５＠ｑｑ．ｃｏｍ。盐碱地在世界上分布广泛，世界陆地总面积的７．６％为盐碱地［１，２］。中国是世界盐碱地大国之一，约有盐碱地０．２７亿ｈｍ

7、２［３］。土壤盐碱化是限制农业生产的一个重要环境因素。随着灌溉面积的扩大，因灌溉水质下降及不合理的灌溉方式而引起的土壤次生盐渍化现象也日趋严重［４，５］。因此，对现有作物品种进行改良，培育耐盐作物新类型，已成为十分重要的研究对象。玉米（ＺｅａｍａｙｓＬ．）是重要的粮食作物之一，也是最佳的饲料加工原料，还是重要的工业原料，在世界农业生产上有着举足轻重的地位。在中国人口增加及耕地面积逐渐减少的情况下，对玉米的需求也正在与日俱增。另外，中国是世界玉米生产大国，玉米对中国经济发展和市场稳定具有非常重要的作用。随着转基因作物商品化的迅猛发展

8、，转基因作物已经深入生活，同时也创造出巨大的效益。因此，培育出具有高产、耐盐、耐旱等优良性状的玉米一直是玉米育种工努力追求的奋斗目标［６］。在２０世纪９０年代，玉米转基因技术研究工作得到了飞速发展，农杆菌介导法、基因枪介导法、ＰＥＧ法、子房注射法等