麻辛平喘汤对哮喘豚鼠肺组织中IL5mRNA表达影响的实验研究

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1、麻辛平喘汤对哮喘豚鼠肺组织中IL5mRNA表达影响的实验研究作者：范华，黄静，孙艳，张晓霞【摘要】目的研究麻辛平喘汤对哮喘豚鼠肺组织中IL5mRNA表达的影响。方法将56只符合实验标准的豚鼠随机分为7组，采用卵蛋白(OVA)腹腔注射致敏与雾化吸入激发的方法建立豚鼠哮喘模型。2周后处死豚鼠,取肺组织,采用RTPCR法检测IL5mRNA的表达情况。结果麻辛平喘汤高、中、低剂量组及正常对照组肺组织IL5mRNA表达量较低，与模型对照组相比差异有高度统计意义(P<0.01)。高剂量组的IL5mRNA表达与正常对照组

2、之间差异无统计意义(P>0.05)。结论麻辛平喘汤可以从基因水平上调控IL5mRNA转录。【关键词】麻辛平喘汤;哮喘;IL5;基因转录　Abstract：ObjectiveTostudytheinfluenceofMaxinPingchuanDecoctiononIL5mRNAexpressinlungtissueofguineapig.Methods56guineapigswiththeexperimentalcriteriawererandomlydividedinto7groups,withovalbum

3、in(OVA)wasinjectedinabdominalcavityandinspiredbyinhalationinasthmaticguineapigs.Guineapigsweresacrificedaftertwo10weeks,usingRTPCRdetectedtheexpressionofIL5mRNAinthelungtissue.ResultsIL5mRNAexpressinMaxinPingchuanDecoctionhigh,mediumandlowdosegroupswerelowerth

4、anthecontrolgroup,thereweresignificantdifferences(P<0.01).IL5mRNAexpressinhighdosetreatmentgroupandthenormalgrouphadnosignificantdifference(P>0.05).ConclusionMaxinPingchuanDecoctioncancontrolthetranscriptionofIL5mRNAfromgenelevels.　　Keywords:MaxinPingchua

5、nDecoction;asthma;IL5;genetranscription　　支气管哮喘是一种以气道高反应性为特征的变态反应性炎症性疾病,是由嗜酸性粒细胞(ESO)、肥大细胞和T淋巴细胞等多种炎症细胞参与的气道慢性炎症。炎性递质和细胞因子在其发病过程中具有重要作用[1]，而IL5是哮喘发病中突出的炎性细胞因子[2]。运用中药治疗哮喘是我国的一大特色，具有明显的创新性。我们在长期的临床实践中，运用麻辛平喘汤(由麻黄、细辛、桂枝、地龙、白芍、全蝎等中药组成)治疗哮喘，取得了良好的疗效。为进一步探讨中药麻辛平喘汤治疗哮喘

6、的作用机制,笔者将其对哮喘豚鼠肺组织中IL5的影响做了初步观察研究，报道如下。10　　1实验材料及制备　　1.1实验动物　　普通级健康豚鼠(合格证号00005907)，雌雄各半，体质量(250±20)g，购自华中科技大学同济医学院实验动物中心，室内动物房分笼饲养，统一饲料，随意进食及饮水。　　1.2实验用药　　麻辛平喘汤(药物组成：麻黄、细辛、桂枝、白芍、全蝎、地龙、僵蚕、蝉蜕、法半夏、陈皮、射干、甘草等)，由黄石市中医医院制剂室提供。先声咳喘宁口服液(南京先声东元制药有限公司，国药准字Z32020967，批号40-09

7、1003)。　　1.3主要试剂与仪器　　卵白蛋白(sigma分装，A5378，武汉众一生物有限公司)，IL5放免试剂盒(美国R&D公司进口分装，上海西唐生物科技有限公司，0911122)，SYBRGreenrealtimePCRmastermixplus(日本东洋纺织株式会社，TOYOBO)，鱼跃402A1超声雾化器(江苏鱼跃医疗设备股份有限公司)，Synergy102多功能酶标仪(美国Biotek公司)，OlympusCX-41生物显微镜及成像系统。　　1.4动物模型制备　　采用卵白蛋白(OVA)注射雾化吸入

8、法复制哮喘豚鼠模型。实验第ld，临时配制10%卵蛋白生理盐水，每只豚鼠腹腔注射OVA溶液1mL以致敏。注射后第15d，将致敏豚鼠分别置透明密闭玻璃容器中，以1%OVA生理盐水溶液按最大雾化量进行雾化吸入，出现呼吸频率加快、点头呼吸、咳嗽、鼻煽、抽搐等症状时为引喘成功，约连续激发7d。　　1.5分组及给药