麻辛平喘汤对哮喘豚鼠肺组织中il5 mrna表达影响的实验研究论文

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1、麻辛平喘汤对哮喘豚鼠肺组织中IL5mRNA表达影响的实验研究论文范华，黄静，孙艳，张晓霞【摘要】目的研究麻辛平喘汤对哮喘豚鼠肺组织中IL5mRNA表达的影响。方法将56只符合实验标准的豚鼠随机分为7组，采用卵蛋白(OVA)腹腔注射致敏与雾化吸入激发的方法建立豚鼠哮喘模型。2周后处死豚鼠,取肺组织,采用RTPCR法检测IL5mRNA的表达情况。结果麻辛平喘汤高、中、低剂量组及正常对照组肺组织IL5mRNA表达量较低，与模型对照组相比差异有高度统计意义(P0.01)。高剂量组的IL5mRNA表达与正常对照组之间差异无统计意义(P0.05)。结论麻辛平喘汤可以从基因水平上调控IL5mRN

2、A转录。【关键词】麻辛平喘汤;哮喘;IL5;基因转录Abstract：ObjectiveTostudytheinfluenceofMaxinPingchuanDecoctiononIL5mRNAexpressinlungtissueofguineapig.Methods56guineapigsentalcriterialydividedinto7groups,in(OVA)inalcavityandinspiredbyinhalationinasthmaticguineapigs.GuineapigsRNAinthelungtissue.ResultsIL5mRNAexpressinMa

3、xinPingchuanDecoctionhigh,mediumandloRNAexpressinhighdosetreatmentgroupandthenormalgrouphadnosignificantdifference(P0.05).ConclusionMaxinPingchuanDecoctioncancontrolthetranscriptionofIL5mRNAfromgenelevels.Keya;IL5;genetranscription支气管哮喘是一种以气道高反应性为特征的变态反应性炎症性疾病,是由嗜酸性粒细胞(ESO)、肥大细胞和T淋巴细胞等多种炎症细胞参与的气道

4、慢性炎症。炎性递质和细胞因子在其发病过程中具有重要作用1，而IL5是哮喘发病中突出的炎性细胞因子2。运用中药治疗哮喘是我国的一大特色，具有明显的创新性。我们在长期的临床实践中.freela分装，A5378，武汉众一生物有限公司)，IL5放免试剂盒(美国RD公司进口分装，上海西唐生物科技有限公司，0911122)，SYBRGreenrealtimePCRmastermixplus(日本东洋纺织株式会社，TOYOBO)，鱼跃402A1超声雾化器(江苏鱼跃医疗设备股份有限公司)，Synergy2多功能酶标仪(美国Biotek公司)，OlympusCX-41生物显微镜及成像系统。1.4动物模型制

5、备采用卵白蛋白(OVA)注射雾化吸入法复制哮喘豚鼠模型。实验第ld，临时配制10%卵蛋白生理盐水，每只豚鼠腹腔注射OVA溶液1mL以致敏。注射后第15d，将致敏豚鼠分别置透明密闭玻璃容器中，以1%OVA生理盐水溶液按最大雾化量进行雾化吸入，出现呼吸频率加快、点头呼吸、咳嗽、鼻煽、抽搐等症状时为引喘成功，约连续激发7d。1.5分组及给药56只豚鼠按体质量随机分为7组，每组8只(雄性4只，雌性4只)，包括正常对照组、模型对照组、阳性对照组、低剂量组、中剂量组、高剂量组，预防组。模型对照组、阳性对照组、低剂量组、中剂量组、高剂量组、预防组均采用雾化吸入法复制哮喘。正常对照组用等量生理盐水代替进行注射

6、和雾化吸入。除预防组外，各组分别于造模第8d起灌胃给药。低剂量组每只灌麻辛平喘汤0.75mL，中剂量组为1.5mL，高剂量组为3mL，阳性对照组灌服先声咳喘宁0.5mL，正常对照组、模型对照组灌服同体积的生理盐水1mL。连续给药7d。各组均于雾化吸入前给药。预防组在OVA注射第10d，每只灌服麻辛平喘汤1.5mL，连续灌胃给药5d，再雾化吸入激发哮喘,即提前5d给药，然后再进行激发，激发时不给药，其余所有处置与治疗组相同。2方法末次给药2h后，将豚鼠麻醉，沿腹正中线剪开皮肤，下腔静脉放血处死，开胸，暴露气管，分离气管及肺脏。切取肺组织，吸去血迹，置于-80℃冰箱中保存，备用。2.1RNA的提取

7、材料与仪器：灭菌过的枪头、匀浆器、EP管、去离子水、TRLzolReagent、三氯甲烷、异丙醇、无水乙醇、离心机。步骤：(1)将大约100mg肺组织放入研磨器，加入1mL的TRLzolRengent研磨20~30min，直到看不到大块的组织。(2)将液体倒入灭菌后的EP管内，加三氯甲烷250μL，上下颠倒充分混匀，静置5min，4℃离心10min，13000r/min。(3)取上清液500μL于