小鼠不同脂肪组织中gata1的表达特点及其在白色脂肪棕色化中的作用研究

《小鼠不同脂肪组织中gata1的表达特点及其在白色脂肪棕色化中的作用研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、学梭代码:102CK>研究生学号：2012102100分类号没2密级：无硕士学位论文<1、風不周瓶舫级级中Ga鉍/的表这特成及其在白年麻�r4*食化中的作用研究TheexpressionandroleresearchofGatalinbrowningofwhiteadiposetissueofmice作者：张书杰指导教师：郑耀武教授级学科：生物学二级学科：遴传学研究方向：基因表达与病理发育学位类型：学术硕士东北师范大学学位评定委员会2015年5月独创性声明本人郑重声明：所提交的学位论文是本人在导师指导下独立进行研究工作所取得的成果。据我所知，除了特别加以标注和致谢的地

2、方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果。对本人的研究做出重要贡献的个人和集体，均己在文中作了明确的说明。本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名：妹树.日期:__M丄y学位论文使用授权书本学位论文作者完全了解东北师范大学有关保留、使用学位论文的规定，S卩：东北师范大学有权保留并向国家有关部门或机构送交学位论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权东北师范大学可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以釆用影印、缩印或其它复制手段保存、汇编本学位论文。(保密的学位论文在解密后适用本授权书）名：姊本•指导教师签m�2o(t.^u曰学

3、位论文作者毕业后去向电邮话编工作单位：通讯地址：学校代码:10200研究生学号:2012102100分类号:Q2密级:无硕士学位论文小鼠不同脂肪组织中Gata1的表达特点及其在白色脂肪棕色化中的作用研究TheexpressionandroleresearchofGata1inbrowningofwhiteadiposetissueofmice作者：张书杰指导教师：郑耀武教授一级学科：生物学二级学科：遗传学研究方向：基因表达与病理发育学位类型：学术硕士东北师范大学学位评定委员会2015年5月I摘要机体内脂肪主要有两类：与脂肪堆积有关的白色脂肪组织（Whiteadipos

4、etissue，WAT）和脂肪代谢有关的棕色脂肪组织（Brownadiposetissue，BAT）。前者通过甘油三酯的形式储存能量，与肥胖症，糖尿病和血管类疾病的发生密切相关，后者则通过氧化磷酸化代谢脂肪，负责能量的提供，可有效抗肥胖。有研究证实，在适当的刺激下，白色脂肪可以被转化为棕色脂肪，即白色脂肪棕色化。因此阐明白色脂肪棕色化的具体分子机制对于人类的健康具有重要意义。与脂肪发生有关的因子有很多，其中血管内皮生长因子（Vascularendothelialgrowthfactor，VEGF-A）近年来被发现在脂肪组织中大量表达，并且与脂肪组织发育及能量代谢密切相

5、关。我们建立了四环素-Vegfa可逆调节小鼠模型，并成功介导白色脂肪棕色化。在此进程中，除WAT和BAT关键调控因子Leptin，Prdm16，Ucp1，Cidea，Bmp4和Bmp7发生显著改变之外，Gata1也发生了显著性上调。过往对GATA1的报道主要集中于其在红系分化中的调控作用，在脂肪分化中的研究较少，然而其是否也在脂肪分化与能量代谢中发挥了重要调节作用正是我们本研究的主要内容。在本论文中，我们对小鼠不同脂肪组织间Gata1的表达特点及其在白色脂肪棕色化进程中的作用及相关机制进行了研究。首先我们对小鼠体内WAT和BAT进行了分离并分别提取RNA，Real-t

6、imePCR结果显示Gata1在BAT中的表达量要远远高于其在WAT中的表达，这与同时检测的棕色脂肪调控因子Prdm16、Ucp1和Cidea等的表达特点是一致的。继而利用构建好的四环素-Vegfa可逆调节小鼠模型，我们发现在白色脂肪棕色化的进程中Gata1发生了明显的上调，并且其表达与Vegfa呈现显著性的负相关。继而我们利用pcDNA3.1(-)载体及慢病毒载体pcoEGFP-puro分别构建了适用于瞬时转染和慢病毒侵染的Gata1过表达质粒，并在不同细胞系中进行了瞬时转染和慢病毒侵染实验。Real-timePCR检测结果显示，不论在3T3-L1细胞系还是原代脂肪

7、前体细胞中，外源过表达Gata1后均能够上调相同的棕色脂肪调控因子的表达，如Bmp4，Pgc1-α和Cidea；但是并不影响Bmp7、Prdm16和Ucp1的表达。我们的实验结果揭示在脂肪分化进程中，Gata1的表达与棕色脂肪发生及白色脂肪棕色化密切相关；其作用的发挥可能是通过上调Bmp4，Pgc1-α和Cidea等棕色脂肪调控因子的表达而实现的。GATA1在白色脂肪棕色化中的作用及其机制的阐明既补充了GATA1已有的生物学功能，为能量代谢研究提供了新的线索，同时也为预防和控制肥胖提供了一个潜在靶点。关键词：GATA1；WAT；BAT；白色脂肪棕色化