安络小皮伞多糖提取工艺优化及其镇痛作用研究

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4、CESSOPTIMIZATIONANDITSANALGESICEFFECTADissertationSubmittedtotheGraduateSchoolofHenanUniversityinPartialFulfillmentoftheRequirementsfortheDegreeofMasterofScienceByWangDandanSupervisor:Prof.ZhuXianfengMay,2015摘要安络小皮伞是传统药食兼用真菌，具有食品保健及药用价值。本文通过控制试验方法优化安络小皮伞菌有效

5、物质—真菌多糖的提取工艺，并且检测安络小皮伞菌发酵产物对硝酸甘油型大鼠偏头痛模型的镇痛效应。主要研究方法及结果如下：1)以安络小皮伞菌丝体为研究对象，优化其多糖超声波提取工艺。试验先通过单因素实验初步确定小皮伞多糖提取最优条件，然后用响应面法建立数学模型。通过软件分析，提取最优条件为超声处理时间26.43min、超声处理功率465.01W、料液比254.28g/L。2)对安络小皮伞菌胞外多糖的醇沉条件进行了优化，首先优选出最佳发酵液浓缩比，最佳醇沉时间，最佳加入乙醇量，又通过三水平三因素的响应面试验设计，以发

6、酵所得的生物量和胞外粗多糖含量为指标，得到了安络小皮伞菌胞外多糖分离纯化的最佳醇沉条件，即为：浓缩体积比0.29、添加乙醇与发酵液的体积比5.20、醇沉时间12.34h。在此条件下多糖质量可达6g/L。3)以安络小皮伞菌丝体、发酵液、安络通痛制剂、皮伞碱对由硝酸甘油诱导的偏头痛大鼠进行不同剂量的灌胃给药，采集静脉血及脑干，检测大鼠静脉血和脑干中NOS和NO含量。结果显示安络小皮伞菌丝体组、发酵液组、安络痛组等都能显著地抑制模型大鼠机体内NO及NOS的含量，效果略差于西药组，反应出临床上安络通镇痛作用迟缓这一特

7、点。皮伞碱组效果不显著。4)以安络小皮伞菌丝体、发酵液、安络痛制剂及皮伞碱对由硝酸甘油诱导的偏头痛大鼠进行不同剂量的灌胃给药，采集静脉血及脑干，检测大鼠静脉血和脑干中CGRP和β-EP含量，实验结果显示：阿司匹林组、高浓度组、中浓度组、低浓度组和安络痛组都能明显抑制模型大鼠机体内CGRP和β-EP的含量，而发酵液组及皮伞碱组效果不显著。说明安络小皮伞作用于机体时能通过调节机体的CGRP和β-EP含量来治疗偏头痛。关键词：安络小皮伞，真菌多糖，超声波，醇沉，偏头痛IABSTRACTMarasmiusandros

8、aceusisatraditionalmedicineandediblefungus,withfood,healthcareandmedicinalvalue.ThisstudyusedmanipulativeexperimenttooptimizetheextractiontechnologyoffungipolysaccharidesinMarasmiusandrosaceus.Inadditi