利用rnai技术鉴定srbsdv在白背飞虱体内增殖的关键因子

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1、一．＃■＊４：１０３８９分类号：Ｓ３２．１单位代码：１１２０２０４０２９密级：学号福建农林大学硕士学位论文Ｖ利用ＲＮＡｉ技术鉴定ＳＲＢＳＤＶ在白背飞風体内增殖的关键因子，＿学科门类：农学－一级学科名称：植物保护二级学科名称：植物病理学研究方向：分子病毒学研究生姓名：曹金强指导教师：魏太云研究员一完成时间：二〇五年四月分类号：Ｓ４３２．１单位代码：１０３８９密级：１学号：１２０２０４０２９福建农林大学硕士学位论文利用ＲＮＡｉ技术鉴定ＳＲＢＳＤＶ在白背飞風体内增殖的关键因子学

2、科门类：农学一级学种Ｓ称：植物保护二级学舶称：植物病理学研究方向：分子病毒学研究生姓名：曹金强指导教师：魏太云研究员＿完成时间：二〇五年四月Ｔ＇ｈｅｓｉｓｆｏｒＭａｓｔｅｒｓＤｅｇｒｅｅｏｆＦｕｉａｎＡｒｉｃｕｌｔｕｒｅａｎｄＦｏｒｅｓｔｒＵｎｉｖｅｒｓｉｔｊｇｙｙＩｄｅｎｆｉｄｉｃａｔｉｏｎｏｆｋｅｙｆａｃｔｏｒｆｏｒＳＲＢＳＤＶｍｕｌｔｉｌｉｃａｔｉｏｎｉｎＳｏｇａｔｅｌｌａｕｒｃｉｅｒａｗｉｔｈＲＮＡｐｆｆｉｎｔｅｒｆｅｒｅｎｃｅｓｔｒａｔｅｇｙＳｕｂｅｃｔｓＣａｔｅｇｏ

3、ｒｙ：ＡｒｏｎｏｍｊｇｙＰｒｉｍａｒＳｕｂｅｃｔｓ：ＰｌａｎｔＰｒｏｔｅｃｔｉｏｎｙｊＳｅｃｏｎｄａｒＳｕｂｅｃｔｓ：ＰｌａｎｔＰａｔｈｏｌｏｙｊｇｙＲｅｓｅａｒｃｈＤｉｒｅｃｔｉｏｎ：ＭｏｌｅｃｕｌａｒＶｉｒｏｌｏｇｙＳｔｕｄｅｎｔ：ＪｉｎｑｉａｎｇＣａｏＡｄｖｉｓｏｒ：Ｐｒｏｆ．ＴａｉｙｕｎＷｅｉＳｕｂｍｉｔｔｅｄＴｉｍｅ：Ａｒｉｌ１５ｐ，２０独创性声明本人声明，所呈交的学位（毕业）论文，是本人在指导教师的指导下独立完成的研宄成果，并且是自己撰写的。尽我所知，除了文中作了标

4、注和致谢中已作一。了答谢的地方外，论文中不包含其他人发表或撰写过的研宄成果与我同对本研宄做出贡献的同志，都在论文中作了明确的说明并表示了谢意，如被查有侵犯他人知识产权的行为，由本人承担应有的责任。学位（毕业）论文作者亲笔签名：曰期：＂多‘…叫令毛飞、＾论文使用授权的说明本人完全了解福建农林大学有关保留、使用学位（毕业）论文的规定，即学校有权送交论文的复印件，允许论文被查阅和借阅；学校可以公布论文的全部或、部分内容，可以采用影印缩印或其他复制手段保存论文。保密，在年后解密可适用本授权书。口不保密，本论文属于不保密。（

5、：）学位毕业论文作者亲笔签名：日期：指导教师亲笔签名日期：．目录？ＷＩ１弓Ｗ１Ｉ１．１南方水稻黑条矮缩病毒的研究进展１１１．１．南方水稻黑条矮缩病的发现１、分布以及危害１１２１．．南方水稻黑条矮缩病的表型症状特点２１．１黑条矮缩病的自然寄主和传播介体．３南方水稻１１４ＲＢＳＤＶ的病３．．Ｓ毒学分类地位．１．５Ｖ的基因组结构及其功能研究４１ＳＲＢＳＤ一６１．２植物呼肠孤病毒复制场所病毒原质的研究进展１７．３植物病毒在介体昆虫体内的侵染循回过程１．４原核表达系统的研究概况以及应用８

6、１．５ＲＮＡｉ的发现以及应用９１．５ＲＮＡ．１ｉ的发现９１０１．５２ＲＮＡｉ．的原理１０１．５．３ＲＮＡｉ技术应用１６１．本研究的目的和意义１２实验材料和方法１２１２２．１实验材料２．１１２．１菌株和载体２．１．２水稻病株和介体昆虫白背飞虱１２２．１．３１２实验试剂２．１．４实验主要器材１３２．２１实验方法３２２－．１Ｓ１１．ＲＢＳＤＶ蛋白Ｐ５抗体的制备３２．２１１１３．．引物的设计和合成２．２．１．２感染ＳＲＢＳＤＶ的水稻总ＲＮＡ提取１３２２－－１．ＲＴＰＣ

7、ＲＳＲＢＳＤ１４．．３扩增Ｖ的基因片段Ｐ５１－２．２．１４ＳＲＢＳＤＶＰ１５．纯化回收扩增的５１产物－２２１Ｐ５－１２．２．１．５入门载体ＤＯＮＲ１６Ｐ的构建２－－．２．１．６ＤＥＴ１７Ｐ５１原核表达载体ＰＳ１的构建８７－２－．２．１７ＤＥＳＴ１Ｐ５１入Ｒｔ（ＤＥ３）菌株１８．原核表达载体转ｏｓｅａＰ－．ＢＤＶ１２２．１．９ＳＲＳ非结构蛋白Ｐ５１抗血清的制备９２２－．１１．．１０Ｐ５抗血清的特异性检测１９－２．．２１．１１Ｐ５１抗血清的纯化２０２．２１２２１．．１抗体交联突光素－

8、２．２．１