鞘内注射reelin基因干扰慢病毒载体对大鼠慢性神经病理性疼痛的研究

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1、分类号Ｒ４密级公开—■—Ｉ．—Ｉ．？ＵＤＣ６１０学校代码１０巧５減為＃义拿ＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹＯＦＳＯＵＴＨＣＨＩＮＡ硕：ｔ学位论文（专业学位）鄰内注射Ｒｅｅ１ｉｎ基因干扼暖病毒载体对大鼠慢性神筵病理性疼痛的研究研究生姓名：阳巧云指导教师、职称：ｒ昕主任医师学科专业：晦床医学（麻醉学）研究方向：神经病理性疼痛所在学院一临床学院：第二０—■五年五月／？骑内注射Ｒｅｅｌｉｎ基因干扰慢病毒载体对

2、大鼠慢性神经病理性疼痛的研究＇ｄ论文作者签名ｆ１Ｐ？Ａａ指导教师签名：］ｉ＼＾ｊ论文评阅人；１张朝辟，，副教授，硕导南华大学评阅人２；刘丈捷，副教授，硕导，南华大学答辩委员会主席：）马權强，教授，博导，中山大学委员１：莫利求，中山大学，教授，硕导委员２；田绍义，郵標，硕导，亩华大学委员３；祖化宇，副郵搜，硕导，南华大学委员４；侯立力，副教授，硕导，南华大学答辩日期：２０１５年５月８日Ｉ南华大学学位论文原创

3、性声明本人声明，所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了论文中特别加ｔｕ标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人己经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得南华大学或其他单位的学位或证书而使用过的材料。与我共同工作的同志对本研究所作的贡献均已在论文中作了明确的说明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承户担。作者签名；商於為／年芝石円ｊ＾＾本南华大学学位论文版权使用授权书学位论文是本人在南华大学攻读（博／硕）±学位期间在导师指导

4、下完成的学位论文。本论文的研究成果归南华大学所有，本论文的研究内容不得Ｗ其它单有权位保的名义发表。本人同意南华大学有关傑留、使用学位论文的规定，目Ｐ：学校或留学位论文，允许学位论文被査阅和借阅；学校可＾＾／公布学位论文的全部湖部分内容，可采用复印、缩印或其它手段保留学位论文；学校可根据国家或论文南省全有文关部口规定送交学位论文。同意学校将论文加入《中国优秀博硕±学位享数据库》，并按《中国优秀博硕±学位论丈全文数据库出版章程》规定位受相关权益。同意授权中国科学信息技术研

5、究所将本学位论文收录到《中国学文论文全文数据库》，并通过网络向狂会公众提供信息服务。对于涉密的学位论，解密后适用该授权。＜作者签名：阳］＾先刘＾年＾月７曰导师签名月曰ｔｆ本实验由国家自然科学基金资助（NO81300971）鞘内注射Reelin基因干扰慢病毒载体对大鼠慢性神经病理性疼痛的研究研究生：阳巧云导师：旷昕主任医师中文摘要：目的探讨鞘内注射Reelin基因干扰慢病毒载体(LV-Reelin-RNAi)对慢性坐骨神经压迫性损伤（chronicconstrictioninj

6、ury，CCI）疼痛大鼠脊髓水平Reelin的表达变化及疼痛行为学的影响。方法鞘内置管成功后无运动障碍的SD雄性大鼠144只，体重200-270g，随机分为4组：Sham组(n=36)，CCI组(n=36)，RNAi组(n=36)和空载体组(n=36)。Sham组大鼠只暴露右侧坐骨神经后不结扎，而其他三组大鼠在暴露右侧坐骨神经后，用4.0含铬羊肠线轻轻的结扎四道以制造慢性坐骨神经压迫性损伤疼痛模型。术后第1天，各组分别鞘内注射生理盐水15μl、生理盐水15μl、LV-Reelin-RNAi5μl

7、+生理盐水10μl、空载体5μl+生理盐水10μl。各组大鼠均于术前1d、术后1d、4d、7d、10d、14d和21d测量双侧后足底机械缩足阈值（pawwithdrawalmechanicalthreshold,PWMT）和热缩足潜伏期（pawwithdrawalthermallatency,PWTL）。各组在第7、14、21天取腰膨大，采用QPCR、Westernblot和石蜡切片免疫组化（Immunohistochemistry-paraffinsections，IHC-P）检测脊髓背角Re

8、elinmRNA和蛋白的表达。结果术前各组大鼠PWMT和PWTL无显著性差异；CCI模型大鼠手术测术后各组各时间点PWMT和PWTL均明显降低（P<0.05）,手术侧脊髓背角ReelinmRNA的表达量和ReelinI蛋白表达量CCI术后明显减少（P<0.05）。鞘内注射LV-Reelin-RNAi可进一步降低PWMT和PWTL。与之相对应，大鼠右侧脊髓背角ReelinmRNA和蛋白的表达也进一步降低（P<0.05）。鞘内注射空载体对慢性神经病理性疼痛大鼠的疼痛行为学、ReelinmRNA和Re