罗希土碱通过pi3kmtorpparγ途径降低巨噬细胞lpl表达及脂质蓄积

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2、’．：皆将、指导教臟名、职称；尹卫东教授繁廷沒鮮＇？．參Ｍ；；．．．由前古姑巧隹媒姻．气－所在学院繳：医学院、若驚讓一五慨ＷＳｉ＾ｉ：菁？｜霉‘爾ｔ？ｐ，赫杰考义掌ＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹＯＦＳＯＵＴＨＣＨＩＮＡ罗希上碱通过ＰＩ３Ｋ／ｍＴ０Ｒ／ＰＰＡＲＹ途径降低巨唾细胞。Ｌ化表达及脂质蓄禾、论义作者篇名：叔指导教师签名弓论文评阅人１：唐小卿，教授，硕导，南华大学评阅人２；易化辉，教授，博导，南华大学答辩委员会主席：文格波，教授，博导，南华大学

3、委员１；題修胜，教授，博导，南华大学委员２：刘录山，教授，硕导，南华大学委员３；王佐，教授，硕导，南华大学，教授，硕导，南华大学委员４；危当恒答辩日期：２０１５年５月１６日南华大学学位论女原创性声明本人声明，所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研巧成果。尽我所知，除了论文中特别加从标巧和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得南华大学或其他单位的学位或证书而使用过的材料。与我共同工作的同志对本研究所作的贡

4、献均己在论文中作了明确的说明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。－＞作者签名：／｜元义＜７／１年Ｊ月曰／＾南华大学学位论义版权使用授权书本学位论文是本人在南华大学攻读／（博硕）±学位期间在导师指导下完成的学位论文。本论文的研巧成果归南华大学所有，ｉ本论文的研究内容不得ｔ＾？其它单位的名义发表。本人同意南华大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留学位论文，允许学位论文被查阅和借阅；学校可Ｗ公布学位论文的全部１＞、或部分内容，可＾＾采用复巧缩印或其它手段保留学

5、位论文；学校可根据国家或湖南省有关部口规定送交学位论文。同意学校将论文加入《中国优秀博硕±学位论文全文数据库》，并按《中国优秀博硕±学位论文全文数据库出版章程》规定享受相关权益。同意授权中国科学信息技术研究所将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》，并通过网络向化会公众提供信息服务。对于涉密的学位论文，解密后适用该授权。作者签名：知／心年主月导师签名罗希土碱通过PI3K/mTOR/PPARγ途径降低巨噬细胞LPL表达及脂质蓄积摘要：[目的]动脉粥样硬化（atheroscle

6、rosis,As）发病机制复杂，已成为我国首位人口死亡原因之一。动脉壁脂质沉积、泡沫细胞形成等，在As的发生发展中起着重要作用。脂蛋白脂酶（lipoproteinlipase,LPL）是水解血浆中乳糜微粒（chylomicron,CM）、极低密度脂蛋白（verylowdensitylipoprotein,VLDL）等脂蛋白中甘油三酯的关键酶，在脂质代谢中发挥着重要作用。动脉壁中巨噬细胞分泌的LPL具有促进巨噬细胞脂质蓄积的作用，导致泡沫细胞的形成及动脉粥样硬化的发生发展。罗希土碱（rohitukine,RH）

7、，是一种色原酮类生物碱，具有抗癌、抗炎、免疫调节的等生物活性，最新研究显示，其具有抑制脂肪细胞分化的作用。本研究目的在于探讨罗希土碱对巨噬细胞LPL的表达及细胞内脂质蓄积的影响。[方法]RAW264.7巨噬细胞经不同浓度（0,5,10,20uM）罗希土碱处24h及20uM罗希土碱处理不同时间（0,12,24,48h）后，Westernblot检测LPL蛋白水平，RT-PCR检测LPLmRNA水平，试剂盒检测LPL活性。20uM罗希土碱与50mg/mlLDL共孵育RAW264.7巨噬细胞24h后，酶法定量检测细

8、胞内甘油三酯(triglyceride,TG)及总胆固醇（totalcholesterol,TC）水平，油红O染色法检测巨噬细胞脂滴形成情况。20uM罗希土碱处理RAW264.7巨噬细胞24h后，Westernblot（WB）检测磷脂酰肌醇-3激酶磷酸化水平（p-PI3K）、哺乳动物雷帕I霉素靶蛋白磷酸化水平（p-mTOR）、PPARγ蛋白水平。外源性加入PPARγ激动剂后，检测LPL蛋白水平、LP