生物材料表面吸附蛋白质介导细胞粘附和生长的生物学信号通路研究

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1、东斋夫聲硕±学位论文生物材辭表面吸附蛋白质介导细胞揣附和生长的生物学信号通路研究专业名称：生物医学工程作者姓名：曲亚运指导教师：呂晓迎ＳＴＵＤＹＯＦＰＡＴＨＷＡＹＯＦＡＢＳＯＲＢＥＤＰＲＯＴＥＩＮＳＭＥＤＩＡＴＩＮＧＣＥＬＬＳＡＤＨＥ別ＯＮＡＮＤＧＲＯＷＴＨＯＮＢＩＯＭＡＴＥＲＩＡＬＳＡＴｈｅｓｉｓＳｕｂｍｋｔｅｄ化ＳｏｕｔｈｅａｓｔＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙＦｏｒｔｈｅＡｃａｄｅｍｉｃＤｅｇｒｅｅｏｆＭａｓｔｅｒｏｆＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇＢＹ

2、ＱｕＹａｙｕｎＳｕｅｒｖｉｓｅｄｂｙｐＸ－Ｐｒｏｆ．ＬＵｉａｏｉｎｙｇＳｃｈｏｏｌｏｆＢｉｏｌｏｇｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＭｅｄｉｃａｌＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇＳｏｕｔｈｅａｓｔＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙＭａ２０１５ｙ东南大学学位论文独创性声明本人声明所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加Ｗ标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人己经发表或撰写过的研巧成果．也不包含为获得东南大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料一。与我间工

3、作的同志对本研充所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。Ｉ＞研巧生签名：俾必成日期：ＩｆＳ．Ｌ东南大学学位论文使用授权声明东南大学、中国科学技术信息研巧所、国家图书馆有权保留本人所送交学位论文的复印件和电。子文档．，可Ｗ采用影印缩印或其他复制手段保存论文本人电子文档的内容和纸质论文的内容相一致。除在保密期内的保密论文外，允许论文被查阅和借阅，可Ｗ公布（包括Ｗ电子信息形式刊登）论文的全部内容或中、英文摘要等部分内容。论文的公布（包括Ｗ电子信息形式刊登）授权东南大学研究生院办理。研巧生

4、签名；—剖繼浩日期：如乂么ｍ摘要毕业论文题目：生物材料表面吸附蛋白质介导细胞粘附和生长的生物学信号通路研究学校名称：东南大学硕±研巧生姓名：曲亚运导师姓名：吕晓迎教授生物相容性是生物材料研究中的关键问题，而细胞在材料表面的粘附和生长：情况是生物相容性评价的重要内容。通常认为生物材料植入体内或进行体外实验时，首先在材料表面发生蛋白质的吸附，然后发生细胞在材料表面的粘附和生长。而基因表达谱忍片和ＰＣＲ巧片技术能帮助人们了解细胞内基因的表达情况，深入硏究与细胞化附和生长相关的生物学通路，从

5、分子水平解释材料与细胞之间的相互作用。／本论文的目的是：１利用基因表达谱芯片研巧壳聚糖膜和胶原蛋白壳聚糖膜表面（）ＰＣ１２细胞的基因表达情况，并与本课题组前期的吸附蛋白质的蛋白质组学结果进行联合分析，研巧材料表面吸附蛋白质对细胞基因组学的影响；（２）利用信号通路ＰＣＲ巧片研究无涂层／氮化铁涂层镇铁合金对内皮细胞相关通路中基因表达情况，对本课题组前期发现的细胞粘附和生长过程中重要生物学信号通路进行验证，研巧材料表面吸附蛋白质对细胞粘附的影响，综合上述两部分结果，对巧胞粘附和生长的重要生物学信号通路进行研究。

6、，阐述材料表面吸附蛋白质介导细胞粘附和生长的分子机理本论文的具体工作如下：－１ｎＣＣＫ８．利用匀胶法制备壳聚糖膜和胶原蛋白／壳聚糖膜，利用丫時檀染色法和实验分别测定ＰＣ１２细胞在这两种材料和正常对照组表面的细胞形态和存活率，结果发现在４ｈ和２４ｈ两个时间点，胶原蛋白鹿聚糖膜更有利于ＰＣ１２细胞的粘附和形态铺展；两种材料表面培养４ｈ时细胞存活率差异较小，在２仙时胶原蛋白／壳聚糖膜表面细胞存／活率明显大于壳聚糖膜组，说明与壳聚糖膜相比．胶原蛋白壳聚糖膜促进ＰＣ１２细胞的枯附和生长。２．利用基因表达谱芯片研究壳聚糖

7、膜和胶原蛋白／壳聚糖膜表面ＰＣ１２细胞生长仙２４ｈ－和后基因表达情况，结果发现壳聚糖膜组差异表达基因数量较多，通过ＲＴＰＣＲ实一验检验Ｐａｋｌ、Ａｃｔｎ、ｋｌ、ＢｃａｒｌＡｔｌ四个基因的表达情况与基因表达谱巧片实验结果Ｒ忘片分别致，ＰＣ。此外利用信号通路检测无涂层／氮化铁涂眉镇镜合金表面人肪静脉＂＂＂＂内皮细胞培养４ｈ和２４ｈ后，ＴＧＦ０／ＢＭＰ信号通路和细胞骨架调控信号通路中相关基因的表达，，结果表明在运两条信号通路中氮化铁涂层德锭合金表面内皮细胞发生差异表达的基因更多。３．利用ＤＡＶＩＤ功能注释工具对壳聚

8、糖膜和胶原蛋白／壳聚糖膜表面ＰＣ１２细胞生长４ｈ和２４ｈ后的差异表法基因进行ＧＯ功能分类分析，结果表明两种材料主要参与生物、学过程为细胞过程代谢相关过程；分子功能主要包括核昔酸、、细胞分化和发育