巴西橡胶树棒孢霉落叶病菌蛋白激酶基因（cck1）突变体功能互补分析

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1、硕士学位论文题口：突变体功能互补分析■■■■■■■■■■■■作者：曹申文指导教师：专业：埴时间：二〇‘五年五月FunctionalcomplementationofaMAPKhomologousgene(CCJO)-deficientmutantsinCorynesporacassiicolaAThesisSubmittedinPartialFulfillmentoftheRequirementFortheMasterDegreeinAgricultureByCaoShen-wenSupervisor:LiuXiao-me

2、iMajor:MolecularPlantPathologySubmittedtime:May,2015海南大学学位论文原创性声明和使用授权说明原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研宄工作所取得的成果，除文中己经注明引用的内容外，本论文不含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品或成果。对本文的研宂做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本声明的法律结果由本人承担。论文作者签名：日期年■月日学位论文版权删授权说明本人完全了解海南大学关于收集、保存、使用学位论文的规定，即：学校

3、有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权海南大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。保密论文在解密后遵守此规定。论文作者签名：狀导师签名：曰期年月曰曰期年月曰本人已经认真阅读“高校学位论文全文数据库发布章程”，同意将本人的学位论文提交“高校学位论文全文数据库”中全文发布，并按“章程”中规定享受相关权益。同惫论文提交后滞后：口半年；口一年；年发布。论文作者签名：导师签名：日期年分月日日期：年十月日摘要巴西

4、橡胶树是重要的热带经济作物之一，其产品天然橡胶是被誉为现代工业社会的四大工业原料之一。由多主棒孢菌引‘起的巴西橡胶树棒孢霉落叶病是巴西橡胶树上的重要病害之一。目前国内外对巴西橡胶树棒孢霉落叶病的研究主要集中在病原菌生理学、病害发生规律和防治方法等方面，在致病相关基因功能鉴定方面少见报道，而这方面的研究对揭示其致病机理和了解多主棒孢菌与巴西像胶树之间的互作关系具有重要的学术价值，也可以为我们寻求防治该病害的新範标打下了良好的理论基础。本试验前期已通过敲除目标基因的方法，获得了多主棒孢菌蛋白激酶基因突变体并初步鉴定了其功能。为

5、了更为准确地确定的功能，本试验采用同源克隆策略，从多主棒孢菌中扩增了蛋白激酶基因幻的端（包含完整的开放阅读框）和端片段，利用将作为蹄选标记的基因反向插入端和端片段之间，成功构建幻突变体的互补载体」。然后从该载体上扩增一段插有端端的互补片段，通过介导转化突变体的原生质体，对所获得的转化子经平板筛选、验证，确定获得一个幻突变体回复株，命名为。表型测定结果表明：通过基因互补，：回复株在菌丝致死温度、对不同高渗条件的敏感性以及漆酶、纤维素酶和毒素的产生等方面基本恢复至野生型水平；在的表达水平、菌落颜色、菌丝生长、产孢能力、以及对寄

6、主的致病力等方面有一定程度的恢复，但略弱于野生型。说明蛋白激酶幻在多主棒抱菌菌丝的生长、发育，漆酶、纤维素酶和毒素的分泌或活性，对髙温、高渗胁迫的适应性和对寄主的毒力方面起着重要的调控作用；另外的存在可使外源对其菌丝生长的促进作用减弱，使外源对菌丝生长的抑制作用增强。关键词：巴西橡胶树；多主棒孢菌；蛋白激酶基因；基因互补；表型ABSTRACTHeveabrasiliensiswasanimportanteconomiccropintropicalarea,anditsproductwasknownasoneofthefou

7、rindustrialrawmaterialsofmodernindustrialsocietyone.TheCorynesporaLeafFall(CLF)causedbyCorynesporacassiicola(Bert.&Curt.)WeiwasoneofthemajordiseaseinHeveabrasiliensis.ThestudiesontheCLFhadmadeprogressinpathogenbiology,diseaseepidemiologyandthecontrolmeasures.Howev

8、er,therewasfewreportsaboutthefunctionsofthepathogen-relatedgenes.However，」，」，Keywords:Heveabrasiliensis,Corynesporacassiicola(Bert.&Curt.)Wei,CCK1gene,g