大鲵蛙病毒（cgsrv）灭活疫苗的研制与免疫效应研究

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3、ｇＳｕｐｅｒｖｉｓｏｒ：ＡｓｓｏｃｉａｔｅＰｒｏｆ．ＨｕａｎｇＸｉａｏｌｉ巧ｏｆ．ＧｅｎＹｉｇＭａｏｒ：ＡｕａｃｕｌｔｕｒｅｊｑＦｉｅｌｄ：ＡｑｕａｔｉｃＡｎｉｍａｌＤｉｓｅａｓｅＣｏｌｌｅｅｏｆＡｎｉｍａｌＳｃｉｅｎｃｅ＆ＴｅｃｈｎｏｌｏＳｉｃｈｕａｎＡｒｉｃ山ｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｇｇｙ，ｇｙ，ＣｈｅｎｄｕＳｉｃｈｕａｎＰｒｏｖｉｎｃｅＣｈｉｎａｇ，，Ｊｕｎｅ２０１５，本研究由四川省科技支巧计划项目：大無蛙病毒感染预巧及防控关键技术硏究与示范（２０１４ＮＺ００２７）资助Ｔｈｉ

4、ｓｓｔｕｄｗａｓｓｕｏｒｔｅｄｂＳｉｃｈｕａｎＴｅｃｈｎｏｌｏＳｕｏｒｔＰｌａｎｎｉｎｙｐｐｙｇｙｐｐｇ（２０１４ＮＺ００２７）论文独铜巧声明本人郑重声明：所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行研究工作所取得的成果。尽我所知，除了文中特别加Ｗ标注和致谢的地方外，学位论文中不包含其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得四川农业大学或其它教育机构的学一位或证书所使用过的材料。与我同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。硏究生签名；〇年月曰２１養（今关于论文使用

5、巧技的声明本人完全了解四川农业大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留并向国家有关部口或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅，可Ｗ采用、影印、缩印或扫描等复制手段保存汇编学位论文。同意四川农业大学可用不同方式在不同媒体上发表。、传播学位论文的全部或部分内容□本论。□本论文保密，在年解密后适用本授极。文不保密＿＿＂＂（请在Ｗ上□内划Ｖ）研究生签名；年（月曰导师签名：《皆年月日大銳蛙病毒（ＣＧＳＲＶ）灭活疫苗的研制与免疫效应研究摘要本研究开展了大銳蛙病毒（ＣＧＳ民Ｖ）灭活疫苗的制备及佐剂的筛选

6、；接种疫苗后进行了大銳血清中溶茜酶活力、ＡＣＨｓｏ活为、抗体水平，血液中主要组织相容性复合体（ＭＨＣ）Ｉ基因、ＭＨＣＩＩＡ基因的表达和干犹素ａ诱导蛋白（肌）６基因的表达变化及免疫保护率的测定。通过检测疫苗接种大銳后免疫相关指标和保护效果的研究，旨在为有效防控大缺蛙病毒病提供理论依据。－通过３丙内醋（ＢＰＬ）灭活ＣＧＳＲＶ、ａｕ，制备灭活疫苗黄茂多糖（ａｓｔｒａｌｓ（ｇｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ，ＡＰＳ）佐剂疫苗和ＩＳＡ７６３Ａ佐剂疫苗３种疫苗。３种疫苗经过无茜及安全检查合格后，腹腔注射试验大銳，每尾化３ｍＬ。分别测定疫苗接种

7、后第ｌＯｄ、２０ｄ、３０ｄ和４０ｄ大銳血清中溶菌酶活力、ＡＣＨｓｏ活力及抗体水平和测定血液中ＭＨＣＩ基因、ＭＨＣＩＩＡ基因和ＩＦＩ６；免疫４０ｄ后进行攻毒试验１５，基因的表达等免疫指标，每组攻毒尾０ｄ连续观察４统计死亡率和测定相对免疫保护率，；每组剩余的５尾不做处理用于抗体水平的检测。结果表明：灭活疫苗、佐剂疫苗均能不同程度提高机体免疫水平，大觀的抗体水平，ＡＣＨｓｏ活力，ＭＨＣＩ基因、ＭＨＣＩＩＡ基因和ＩＦＩ６基因的表达都有不同程度提髙，而Ｈ种疫苗对溶菌酶活力影响不同，仅ＡＰＳ佐剂疫苗能提窩溶菌酶活力。ＩＳＡ７６３Ａ＋Ａｇ

8、疫苗组、ＡＰＳ＋Ａｇ疫苗组和Ａｇ疫苗组的相对免疫保护