多房棘球绦虫hsp20蛋白的生物信息学分析、重组表达及泡球蚴的体外培养

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1、分类号：密级：公ＶＩＷ才續、ｆ研巧生学位论文多房棘球练虫ＨＳＰ２０虽白的生物信息学分论文题目（中文）析、重姐表达及泡球哟的体外培养Ｂｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃ乂ｎａｌｓｉｓＲｅｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎａｎｄｙ，ＥｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＨＳＰ２０ｆｒｏｍＥｃｈｉｎｏｃｏｃｃｕｓ论文题目（外文）ｍｕｌｔｉｌｏｃｕｌａｒｉｓａｓｗｅｌｌａｓｔｈｅＣｕｌｔｕｒｅｏｆＡｌｖｅｏｌａｒｈｙｄａｔｉｄｉｎｖｉｔｒｏ研巧生姓名孙萃萍学科、专业病原生物学研究方向学位

2、级别硕±导师姓名、职称景涛教授论文工作２０１３年１１月至２０１５年２月起止年月论文提交日期２０１５年３月论文答辩日期２０１５年５月学位授予日期２０１５年６月校址：甘肃省兰州市原创性声明本人郑重声明：本人所呈交的学位论文，是在导师的指导下独立进行研巧所取得的成果。学位论文中凡引用他人已经发表或未发表的成果、数据、观点等，。均已明确注明出处除文中己经注明引用的内容外，不包含任何其他个人或集体己经发表或撰写过的科研成果。对本文的研究成果做出重要贡献的个人和集体，均己在文中Ｗ

3、明确方式标明。本声明的法律责任由本人承担。、论文作者签名：１４草日期：旅、关于学位论文使用授权的声明本人在导师指导下所完成的论文及相关的职务作品，知识产权归属兰州大学。本人完全了解兰州大学有关保存、使用学位论文的规定，同意学校保存或向国家有关部口或机构送交论文的纸质版和电子版，允许论文被查阅和借阅；本人授权兰州大学可レッ将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可采用任何复制手段保存和汇编本学位论文。本人离校后发表、使用学位论文或与该论文直接相关的学术论文或成果时一，第署名单位仍然为兰州

4、大学。本学位论文研巧内容：从公开□不宜公开己在学位办公室办理保密申请，解密后适用本授权书。，一＂＂（请在Ｗ上选项内选择其中项打Ｖ）论文作者签名：．导师签名Ｊｓｉｉｍ寺’日期：ｗＡＫ．ｔ．日期：目录一第部分多房棘球缘虫ＨＳＰ２０蛋白的生物信息学分祈与重组表达．１中文摘要１Ａｂｓｔｒａｃｔ２引Ｈ４一第章多房棘球缘虫ＨＳＰ２０蛋白的生物信息学分析７１．１材料７＼２巧辕７１．２．１寻找ＥｍＨＳＰ２０的开放阅读框７１．２．２ＥｍＨＳＰ２０氨基酸序

5、列的生物信息学分析７１．３结果７１．３．１ＥｍＨＳＰ２０的开放阅读框及编码氨基酸７１．３．２ＥｍＨＳＰ２０氨基酸序列的村ａｓ巧分析；８１．３．３ＥｍＨＳＰ２０蛋白的理化性质及疏水性分析９１．３．４ＥｍＨＳＰ２０的跨膜区预测１１１．３．５ＥｍＨＳＰ２０的信号肤及亚细胞定位预测１１１．３．６ＥｍＨＳＰ２０Ｂ细胞线性表位的预测口１．３．７ＥｍＨＳＰ２０的二级结构分析１３１．３乂ＥｍＨＳＰ２０的保守结构域分析１８１．３．９ＥｍＨＳＰ２０的Ｈ维结构预测１８

6、１．３．１０ＥｍＨＳＰ２０同源性分析及分子进化树的构建１９第二章多房棘球缘虫ＨＳＰ２０蛋白的重组表达２３２．１刪２３２丄１质粒和茜株２３２丄２主要试剂２３Ｉ２丄３主要实验仪器和设各２３２丄４主要溶液的配制２４２．２方法２７２２７．２．１重组质粒的构建２２９．２．２重组蛋白的原核表达２．２．３重组蛋白的纯化３１２．２．４纯化后蛋白的分析３１２３２．３结果－＋－２重组质粒的双酶切鉴定３２．３．１ＥｍＨＳＰ２０ｐＥＴ２８ｂ）（２巧

7、．３．２重组质粒插入片段的测序鉴定２．３．３ＥｍＨＳＰ２０重组蛋白在Ｒｏｓｅｔｔａ（ＤＥ３中的表达及定位３５）－ＰＡＧＥ分析２％．３．４梯度洗脱液的ＳＤＳ２ｓｔｅｒｎＢｌｏｔ３７．３．５重组蛋白的Ｗｅ分析－２３７．３．６重狙蛋白的ＳＤＳＰＡＧＥ纯度分析２３８．３．７重组蛋白的浓度测定讨论３９猶４４第二部分泡球蜘的体外培养４５中文摘要４５Ａｂｓｔｒａｃｔ４６引胃４７４９材料与方法１．１材料４９１丄１泡球蝴４９１丄２人肝癌细胞株ＨｅｐＧ２４９

8、１丄３主要试剂４９１丄４主要实验仪器和设备４９ＩＩ１．１．５主要溶液的配制５０１．２方法５１１．２．１肝癌细胞ＨｅｐＧ２的培养５１１．２．２泡球蝴的体外培养５２结果５４２．１泡球哟