骨痹合剂干预c518大鼠膝关节退变软骨细胞的机制研究

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1、需旬中遥雪由硕士学位论文骨痹合剂干预C518大鼠膝关节退变软骨细胞的机制研究申请人姓名韭歪学科、专业主酉医结金!逝废申请学位类型监瘗医堂童些堂焦指导教师鱼亘教拯王堕塾援云南中医学院学位论文独创性声明＼惝Y2呲4厕0㈣05呲9眦6帆本人郑重声明：所呈交的学位论文，是个人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果，无抄袭及编造行为。除文中已经特别加以注明引用的内容外，本论文不含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标注并致谢。本人完全意识到本声明的法律结果并由本人所承担的法律责任。学位论文作者签名：么，

2、2垄：日期：丛年—￡月旦日云南中医学院学位论文使用授权声明云南中医学院有权保留使用本人学位论文，同意学院按规定向国家有关部门机构送交论文的复印件和电子版，允许被查阅和借阅。本人授权云南中医学院可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或其他复印手段保存或汇编本学位论文。可以公布(包括刊登)论文的全部或部分内容。(保密论文在解密后应遵守此规定)学位论文作者签名：益二2：学位论文导师签名：以P日期：型!!兰年上月』B日期：∥o，4年J月，d日期：坦至年上月卫日一本人及导师同意将论文提交至清华大学“中国学术期刊(光盘版)电子社”进行电

3、子和网络出版，并编入CNKI系列数据库，传播本学位论文的全部或部分内容，同意按《中国优秀博硕士学位论文全文数据库出版章程》规定享受相关权益。学位论文作者签名：2丝兰垒二。学位论文导师签名：铒日期：乏芝!兰年—￡月旦日日期：盟年—￡月jL日～目录●中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯2英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯3符号与说明⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯5前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一66刖舌⋯⋯⋯⋯⋯⋯

4、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一第一部分近10年中医药治疗KOA的用药规律研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯7第二部分人膝关节正常、退变软骨组织以及退变软骨细胞形态特征观察⋯··l7第三部分C518大鼠膝关节正常和退变软骨细胞形态特征观察⋯⋯⋯⋯⋯⋯27第四部分骨痹合剂对C518大鼠膝关节退变软骨细胞增殖和COL．Il、MMP．13表达的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯··33结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯43主要特点及价值⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

5、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯”43问题与展望⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一43参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯··44文献综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯··49研究成果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一56致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯··58相关附件材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一59中文摘要目的：膝关节骨性关节炎(KOA)是中老年人最常见的退行性骨关节疾病。其中，中医药

6、在治疗KOA时有独特的优势。因此，我们开展了使用中药复方制剂一骨痹合剂干预C518大鼠膝关节退变软骨细胞的机制研究，这不仅丰富和发展了中医药从痹论治KOA产生疗效的可能生物学基础和现代科学内涵，而且还建立了从痹论治KOA的现代生物学研究思路和方法学平台。方法：首先，探讨了近10年中医药治疗KOA的用药规律。同时，选取人膝关节正常、退变软骨组织和退变软骨细胞，以及C518大鼠膝关节正常和退变软骨细胞，用多种染色手段对其进行形态特征观察。最后，用MTT法检测骨痹合剂对C518大鼠膝关节退变软骨细胞增殖的影响，并对骨痹合剂干预后的C518大鼠膝关节退变软骨细胞进行C

7、OL．II、MMP．13免疫组化染色，探讨其作用机制。结果：(1)骨痹合剂基本符合近lO年中医药治疗KOA的用药规律。(2)在人膝关节退变软骨细胞中，可见原代细胞形态呈长梭形和多角形，细胞核变形、萎缩，传代细胞更甚。同时，人膝关节退变软骨细胞中COL．I和COL—II免疫荧光均为低表达，COL．X、bFGF、MMP．13免疫荧光均为高表达。人膝关节退变软骨组织病理变化可见软骨变薄，表面有侵蚀，深层细胞有肥大样和纤维样改变。(3)C518大鼠膝关节退变软骨细胞的病理变化可见细胞形态呈长梭形和多角形，随着退变加剧，增殖速度放缓、数量减少，同时出现衰老、死亡。(4)

8、在药物对细胞增殖的影响上，在同一时间点