超声造影剂联合超声辐照介导hsv1-tk转染视网膜母细胞的实验研究

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1、上海交通大学2013级硕士学位论文学校代码：10248硕士学位论文超声造影剂联合超声辐照介导hsv1-tk转染视网膜母细胞的实验研究学科专业：影像医学与核医学研究方向：超声造影申请学位级别：医学硕士（专业学位）作者姓名：贾晓（1107249512）指导教师：杜联芳指导教师成员：顾继英，白敏，史秋生培养单位：上海交通大学附属第一人民医院答辩日期：2013年05月13日1万方数据上海交通大学2013级硕士学位论文Schoolcode:10248SHANGHAIJIAOTONGUNIVERSITYMASTER'STHESISExperimentalresearchofthel

2、oadhsv1-tk-gfpplasmidtransfectionintoHXO-44retinalmatricytemediatedbyultrosoundcontrastagentscombinedultrasonicirradiationResearchField:ImagingandNuclearMedicineResearchContent:Contrast-enhancedUltrasoundAcademicDegreeRank:MasterAuthorName:JIAXiao（1107249512）Supervisor：Prof.DULianfangGui

3、deMembers:GUJiying,BAIMin,SHIQiushengEducationOrganization:ShanghaiFirstPeople’sHospitalThesisdefense：2013-05-132万方数据上海交通大学2013级硕士学位论文3万方数据上海交通大学2013级硕士学位论文4万方数据上海交通大学2013级硕士学位论文超声造影剂联合超声辐照介导hsv1-tk转染视网膜母细胞的实验研究摘要第一章声诺维联合超声辐照HXO-44Rb细胞的安全条件目的：探索超声造影剂声诺维(SonoVue)联合超声辐照HXO-44Rb细胞的安全条件。5方法：

4、将培养好的HXO-44Rb细胞以1×10个/孔接种到24孔细胞培养板上，设置4组：第1组：空白对照组（HXO-44Rb细胞）；第2组：细胞+声诺维（造影剂浓度10%、20%）；第3组：细胞+超声辐照（辐照方案：222辐照时间40s、60s、80s，辐照声强0.5w/cm、1.0w/cm、1.5w/cm、22.0w/cm）；第4组：细胞+超声辐照+声诺维组（辐照方案：辐照时间402222s、60s、80s，辐照声强0.5w/cm、1.0w/cm、1.5w/cm、2.0w/cm，造影剂浓度10%、20%）。以上各组每组设置3个复孔。分别于辐照2h、24h、48h后光镜下观察

5、细胞的形态及生长情况，四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法（MTT）检测细胞存活情况。22结果：在辐照时间为40s、60s、80s，辐照声强为0.5w/cm、1.0w/cm、21.5w/cm，造影剂浓度为10%、20%的情况下，在各个时间点观察时，5万方数据上海交通大学2013级硕士学位论文肿瘤细胞的外形维持球形，均未发生明显改变，仍呈片状、团状聚集生长,MTT法检测细胞存活率最低（98.40±0.21）%，各组间差异无显著性2(P>0.05)；辐照时间为40s、60s、80s，辐照声强为2.0w/cm，造影剂浓度为10%、20%的情况下，肿瘤细胞外形肿胀，培养基中可见细胞碎

6、片，细胞间隙较其他组分散，MTT法检测到细胞的存活率为（89.12±0.97）%，较其它组明显降低(P<0.05)。结论：HXO-44Rb细胞在辐照时间为40s、60s、80s，辐照声强为0.5222w/cm、1.0w/cm、1.5w/cm，造影剂浓度为10%、20%条件下，各组细2胞活性无明显抑制；辐照时间为40s、60s、80s，辐照声强为2.0w/cm，造影剂浓度为10%、20%的情况下，MTT法检测细胞的存活率为（89.12±0.97）%，较其它组明显降低。第二章UTMD介导载hsv1-tk-gfp质粒转染HXO-44Rb细胞实验条件的优化及结果评价目的：探讨超

7、声造影剂声诺维(SonoVue)联合超声辐照介导载hsv1-tk-gfp质粒转染HXO-44Rb细胞的可行性；对比不同辐照条件及造影剂浓度下介导hsv1-tk-gfp质粒转染HXO-44Rb肿瘤细胞效率的差异，探索最佳转染条件。5方法：将培养好的HXO-44Rb细胞以1×10个/孔接种到24孔细胞培养板上，设置5组：第1组：空白对照组（HXO-44Rb细胞）；第2组：细胞+质粒；第3组：细胞+质粒+超声辐照（辐照时间：40s、60s、80s，辐照222声强：0.5w/cm、1.0w/cm、1.5w/cm）；第4组：细胞+质粒+声诺维6万方