益肾通络方对膜性肾病大鼠的肾保护作用以及对肾组织nephrin mrna、podocin mrna表达的影响

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1、；．-IjL医科大学学位论文使用授权及知识产权归属承诺本学位论文在导师(或指导小组)的指导下，由本人独立完成。!本学位论文研究所获得的研究成果，其知识产权归河北医科大学所有。河北医科大学有权对本学位论文进行交流、公开和使用。凡发表与学位论文主要内容相关的论文，第一署名单位为河北医科大学，试验材料、原始数据、申报的专利等知识产权均归河北医科大学所有。否则，承担相应的法律责任。研究生签名：簪簇荔导师签章：≮以、、7二级学院领导盖章：≯l3年弓月竭日河北医科大学研究生学位论文独创性声明本论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果，除了文中特别加以标注等内容外，文

2、中不包含其他人己发表或撰写的研究-；．成果，指导教师对此进行了审定。本论文由本人独立撰写，文责自负。研究生签名：饭：龋导师签章：I镌、’1弘7弓年弓月>7日目录中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．1英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯4研究论文益肾通络方对膜性肾病大鼠的肾保护作用以及对肾组织NephrinmRNA、PodocinmRNA表达的影响前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．8日IJ吾⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．8材料与方法⋯⋯

3、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯9结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．15ja日；7f≮⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．1)附图⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．18附表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．31讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．34结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．42参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．43综述

4、Nephfin、Podocin与肾脏疾病⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯46致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．58个人简历⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．59中文摘要益肾通络方对膜性肾病大鼠的肾保护作用以及对肾组织NephrinmRNA、PodocinmRNA表达的影响摘要目的：本研究通过阳离子化牛血清白蛋白的方法建立膜性肾病大鼠模型，并应用益肾通络方对模型进行干预性治疗，通过观察大鼠的24小时尿蛋白定量、血清总蛋白、白蛋白、血脂、血肌酐、尿素氮等生化指标以及肾组织NephrinmRNA、Podo

5、einmRNA的表达，探讨益肾通络方对膜性肾病的治疗作用及其可能机制，从而为临床上治疗膜性肾病提供实验基础和理论依据。方法：选用清洁级健康雄性Wistar大鼠60只，普通饲料适应性喂养一周后留取大鼠尿液，测24小时尿蛋白定量均为正常。采用随机法将大鼠分为正常组15只，造模组45只。除正常组外，其余造模组大鼠预免疫一周后，隔日一次尾静脉注射C．BSA复制膜性肾病大鼠模型。连续注射4周后测24小时尿蛋白定量。确认造模成功后将造模组大鼠随机分为三组：模型组、盐酸贝那普利组及中药组。盐酸贝那普利组给予盐酸贝那普利10mg／kg／d灌胃，中药组予以益肾通络方3ml／d灌胃

6、，正常组及模型组灌服相当量的生理盐水，各组共给药四周。给药结束后，禁食不禁水留取各组大鼠24小时尿液测定24小时尿蛋白定量，随后将大鼠处死，取血检测实验末血清总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、尿素氮(B㈣、血肌酐(Scr)，留取肾组织，免疫荧光、光镜、电镜观察大鼠肾组织病理变化，Real．timePCR法检测NephrinmRNA、PodoeinmRNA在肾组织中的表达情况。结果：l实验大鼠的一般状况正常组大鼠饮食及尿量正常，眼睛有神，反应敏捷，肌肉丰满。造模的大鼠尾静脉注射C．BSA后，均出现明显的纳食少、精神萎靡，毛发脱落

7、，少动抱团，部分大鼠出现腹水及阴囊水肿。实验最后一周，与正常组相比，造模各组大鼠明显体型瘦小，毛发脱落，模型组的症状最为显著。造模期间除正常组外，造模组有三只大鼠死亡，死亡原因估计为注射±查塑墨C．BSA后的过敏反应以及严重感染，最终导致脏器衰竭。224小时尿蛋白定量的比较24小时尿蛋白定量，在连续尾静脉注射C．BSA4周后，造模组与正常组比较显著升高俨<0．05)；给药4周后，盐酸贝那普利组及中药组与模型组相比明显降低俨<0．05)，而盐酸贝那普利组与中药组比较无明显差异pO．05)。3实验结束后各组大鼠血液生化指标的检测模型组、盐酸贝那普利组、中药组与正常组

8、相比血清TP、ALB均明