小麦tabeiii基因的克隆及淀粉合成相关基因在籽粒发育期的表达分析

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1、分类号河南农业大学硕士学位论文密级筮直翅的麦达公抚学位申请人：迕邀导专论文提交日期：学位授予日期：河南农业大学学位论文独创性声明、使用授权及知识产权归属承诺书学位论小麦TaBEIII基因的克隆及淀粉合成相关基学位文题目硕士因在籽粒发育期的表达分析级别学生许微学科作物遗传育种导师康国章姓名专业姓名学位论文是如需保密，解密时间圳件6月6日是否保密独创性声明本人呈交论文是在导师指导下进行的研究工作及取得研究成果，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包括为获得河南农业大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料，指导教

2、师对此进行了审定。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中做了明确的说明，并表示了谢意。特此声明。．～魏洚够一名：翮幸日期：汐f；年石月石日日期：钞l棒幻后自研究生签名：许懒导师签名：翮玄学院领导签a：竽錾1日期：汐f净6月6日日期溯27年启月焰日日期：L二p吲日致谢本论文是在导师康国章副研究员和郭天财教授的悉心指导和亲切关怀下完成的，三年的硕士生涯中，康老师严谨的科研思路和谦虚谨慎的工作态度深深的感染和激励着我。三年来，康老师不仅在工作和学习给予了我不懈的支持和细心的指导，并在生活和思想上无微不至的帮助和关怀，在此向康老师致以最崇高的敬意和诚挚

3、的谢意。衷心的感谢国家小麦工程技术研究中心小麦栽培生理生态课题组的朱云集教授、王晨阳研究员、马冬云副研究员、冯伟副研究员、谢迎新副研究员、王永华博士、韩巧霞博士在学习、生活和科研中所给予的指导和帮助。衷心的感谢惠州学院生命科学系段中岗老师在此期间给我的关怀和帮助。三年的学习、生活和科研过程中得到了同届同学李鸽子、刘国芹、李淑益、左毅等的关心和帮助；不会忘记师姐郑贝贝、彭慧芳、马红珍等，以及师妹彭晓琪、魏利婷等的热情帮助；实习生石娇娇、王华领、彭永抗、刘利行、张婧、马建江、李园等也都为此付出了辛苦劳动。特别感谢我的家人对我的养育之恩，并多年来在学习和生活上对我

4、的理解和支持，是他们的默默关心和支持，才使我能够安心学习，顺利的完成学业!感谢国家自然科学基金(编号：30871472和31171471)的资助。许微2013年5月于郑州目录摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1l文献综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一21．1淀粉生物合成途径及相关酶⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯21．1．1ADP一葡萄糖焦磷酸化酶⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯31．1．2淀粉合成酶⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

5、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．41．1．3淀粉分支酶⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．41。1．4淀粉去分支酶⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯51．2从转录水平研究淀粉合成分子机制的优点⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯5l-3调控淀粉合成的转录因子⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯62弓l言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．73材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一83．】实验材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

6、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯83．1．1植物材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯83．1．2菌株与质粒载体⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯83．1．3分子生物学试剂及仪器⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯83．1．4PCR引物⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．83．2实验方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．103．2．1序列检索⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一103．2．2小麦种植⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

7、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯103．2．3小麦籽粒取样方法与取样时间⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一103．2．4籽粒淀粉含量测定⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．103．2．5鼢蛆提取及纯化⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．103．2．5．1小麦籽粒总RNA提取⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．103．2．5．2纯化RNA⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯113．2．5．3总RNA的质量及纯度测定⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一l13．2．6cDNA第一链合成⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

8、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯113．2．7目的基因的克隆⋯⋯⋯