江西省野生建兰issr遗传多样性的研究

《江西省野生建兰issr遗传多样性的研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、摘要lllllUlllIIILllIIIllRIIIIalllllllIllBlY2140965本研究主要以江西省建兰[Cymbidiumensifolium(Linn．)Sw]为材料，采用ISSR分子标记进行遗传多样性分析，目的是了解江西省建兰的遗传多样性水平、遗传结构及其遗传分化，为江西省建兰资源的保护与开发利用提供理论依据。研究结果如下：建兰ISSR—PCR最佳反应体系：25斗l的PCR反应体积中，l：l：PCRbuffer，2．5mmol／LMgCl2，200ng模板DNA，160Ftmol／LdNTPs，1．25UTaqDNA聚合酶，0．4仙mol／L引物。最佳扩

2、增程序为：94℃预变性5min，40个循环：94℃变性45S，复性45S，72℃延伸60S，循环结束后72℃延伸7min，4℃保存。用16条筛选出的引物进行PCR扩增，共得到137条谱带，其中多样性条带为13l条，多态性条带百分率为96．19％。POPGENE软件分析结果显示，建兰物种水平上遗传多样性为(PPF=76．21％，Na=1．7621，Ne=1．4763，Hpop=0．2730，』=0．4052)，居群水平遗传多样性为(PPF=!oo．oo％，Na=2．0000，盹=1．6696，日p叩=0．3787，j=0．5564)。其中崇义(CY)居群的遗传多样性最高(Hp

3、op=0．3280)，寻乌(XW)居群的遗传多样性最低(Hpop=0．2082)。WINAMOVA软件分析显示，建兰居群间的遗传分化系数空sT值为0．1557，表明江西建兰居群内的遗传变异大于居群间的遗传变异。并且大庾岭和九连山脉居群间西sT=O．1752>九岭山脉居群间西sT=0．1650>武夷山脉居群间西ST=0．1616>罗霄山脉居群间函sT=0．1088，即各山脉居群的居群内遗传分化均大于居群间的遗传分化。POPGENE软件计算建兰居群的Nei’S遗传距离(D)和遗传一致度(I)显示，17个建兰居群两两之间的遗传距离(D)和遗传一致度(I)变化范围分别为0．0749

4、—0．2819和0．7543—0．9278。其中井冈山市(JGSS)和龙南(LN)的遗传距离(D=0．0749)最小；黎川(LC)和宜丰(YF)的遗传距离(D=0．2819)最大。NTSYS-pc软件对Nei’S遗传距离进行UPGMA聚类，MVSP软件对建兰居群进行主成分分析(PCA)，结果显示，井冈山市(JGSS)、龙南(LN)、崇义(CY)、宁都(ND)、南丰(NF)居群聚类，万载(WZ)、宜丰(YF)、安福(AF)、邵武(sw)、武夷山市(WYSS)、资溪(zx)居群聚类，再与寻乌(XW)居群聚合聚类，贵溪(GX)、石城(SC)居群聚类，安远(AY)、铜鼓(TG)居群

5、聚类，最后均与黎川(LC)居群所得聚合聚类。TFPGA软件对17个建兰居群的遗传距离和地理距离进行Mantel统计分析，并做显著性检验，结果显示，遗传距离和地理距离之间，．=0．0907，P=II——塑墨0．8240>0．05，表明17个建兰居群遗传距离和地理距离相关性不显著。根据研究结果和实地考察提出江西建兰相应的保护策略，如：迁地保护、就地保护、采用组织培养进行规模化的人工栽培满足兰花市场的需求。关键词：江西；建兰：ISSR；遗传多样性III目录ABSTRACTInpresentstudy,ISSRmolecularmarkerswereusedtoanalysisth

6、egeneticdiversityofCymbidiumensifolium(Linn．)SwinJiangxi，Theaimwastoknowmoreaboutthegeneticdiversity,geneticstructureandgeneticdifferentiationofC．ensifolium(Linn．)Swpopulations．ItwastoprovidetheoreticalproofforprotectingandutilizingC．ensifolium(Linn．)Sw．Themainresultsareasfollows．Theoptima

7、lISSR—PCRreactionsystemforCensifolium(Linn．)Swwasestablished．Itis25glreactionvolumecontaining1半PCRbuffer，2．5mmol／LMgCl2，200ngtemplatesDNA，160pmol／LdNTPs，1．25UTaqDNApolymeraseand0．4btmol／Lprimer．Theoptimalamplificationprocedureswereper-denaturingfor5minat94℃，fo