草履虫对海藻内生真菌次生代谢产物的抗性研究

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1、万方数据分类号:UDC:密级:公开单位代码:1O35溶碜火警硕士学位论文论文题目:草履虫对海藻内生真菌次生代谢产物的抗性研究堂J作学科昙.J‘者:名称:1107100201纪珍玲动物学2014年06月23日万方数据1IlllnlIIIIIllllillIIllIIIIIIllllIllllUl沈阳大学硕士学位论文一J—O一1216—41论文题目:兰犀粤梦粤鳘申生}芦垮牛代粤鞠的#擘研窖纪珍玲指导教师:兰堡堡墼壑单位:垫堕奎掌仂助指导期r师:堕垦翌型堕壅璺单位:电固型堂哇塑9塑算带婴窑所论文提交日期:2

2、014年06月23日学位授予单位:沈阳大学万方数据草履虫对海藻内生真菌次生代谢产物的抗性研究TheresistanceofParameciumsp.toalgaeendophyticfungisecondarymetabolites研究生姓名:纪珍玲指导教师姓名:马德顺沈阳大学沈阳,110044,中国Candidate:JiZhenlingSupervisor:MaDeshun21SouthWanghuaStreet,DadongDistrictShenyang,110044,P.R.CH.INA万方

3、数据独创性说明本人郑重声明:所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写的研究成果,也不包含为获得沈阳大学或其他教育机构的学位或证书所使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中做了明确的说明并表示了谢意。签名:纽篁日期:丛丝石.萼本人完全了解沈阳大学有关保留、使用学位论文的规定,即:学校有权保留送交论文的复印件,允许论文被查阅和借阅;学校可以公布论文的全部或部分内容,可以采用影印、

4、缩印或其他复制手段保存论文。万方数据沈阳大学硕士学位论文摘要草履虫是原生动物纤毛纲中的一种极其具有代表性意义的原生动物。它具有许多的特点,研究者们常常喜欢用它作为检测试剂生物活性的对象生物。第一,草履虫存在范围比较广,能够比较容易并且方便的采集到;第二,草履虫的生命力对比其他单细胞动物较强,更容易培养起来;第三,草履虫的个体比其他单细胞动物的个体较大,这样更容易研究与观察;第四,草履虫反应比较灵敏,相比于其他复杂的多细胞生物,草履虫对毒性物质的反应更为敏锐,减少了反应时间,能够更直观、准确的反应出化合

5、物的毒性;第五,相比于一般的化学方法的呆板,草履虫作为反应对象能够更加的形象并且生动有效的体现反应的过程和结果。海洋微生物跟大陆微生物的生存环境存在着非常迥异的差别,具有低温、高压、缺氧、高温等特点,使海洋微生物产生了跟大陆微生物完全迥异的奇特并且又很繁杂的代谢方式、适应环境的方式和生存繁殖的方式,从而代谢产生了许多化学构造特别并且有着多种生物活性的次生代谢产物。因此它的次生代谢产物有着非常重大的研究意义。本文对分离自绿藻刺松藻(Codiumfragile)和金膜藻(Chrysymeniawright

6、ii)的两株真菌长枝木霉(TrichodermaLongibrarachiatum)和集峰曲霉(Aspergillusnomius)选用了不同的培养基进行了规模发酵,分离纯化了这两株菌的次生代谢产物,并且对所得的大部分化合物进行了草履虫抗性研究。次生代谢产物采用了硅胶柱层析、凝胶SephadexLH.20柱层析、重结晶、制备薄层层析、高效液相色谱等分离纯化方式,一共得到了10个单体化合物,综合运用现代波谱技术(1H-NMR、13C-NMR、DEPT等)、化学方法及与已报道的文献比对对各个单体化合物的结

7、构进行鉴定。对所得化合物进行草履虫抗性实验,从长枝木霉(TrichodermaLongibrarachiatum)分离到的5a,80【.环氧麦角甾.6,22.二烯一班醇对草履虫的24h半致死浓度为1.958}tg/mL,麦角.7,22.二烯一班5仅,够.三醇对草履虫24h半致死浓度为2.108rlg/mL,伊谷甾醇对草履虫的24h半致死浓度为1.907弘g/mL,5一羟基一3-甲基戊.2.烯酸对草履虫的24h半致死浓度为5.613}tg/mL,harziane二萜对草履虫的24h半致死浓度为1.153

8、.g/mL。从集峰曲霉(Aspergillusnomius)分离到的5a,8a-环氧麦角甾-6,22.二烯。3伊醇对草履虫的24h半致死浓度为1.907.g/mL,(24R)一24.甲基胆甾4,22一二烯一万方数据沈阳大学硕士学位论文3.酮对草履虫的24h半致死浓度为2.827r,g/n也,豆甾_4,22一二烯一3.酮对草履虫的24h半致死浓度为2.376p斯nL,豆甾_4.烯3.酮对草履虫的24h半致死浓度为2.245,g/n=lL。通过实验发现,海藻

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