柠条锦鸡儿遗传转化体系的探索及cκf5h转基因拟南芥的鉴定

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1、内蒙古农业大学研究生学位论文独创声明本人申明所呈交的学位论文是我本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包括其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包括为获得我校或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料，与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。申请学位论文与资料若有不实之处，本人承担一切相关责任。论文作者签名：亟亟)圭。日期：塑!．仝：6：!i内蒙古农业大学研究生学位论文版权使用授权书本人完全了解内蒙古农业大学有关保护知识产权的规定，

2、即：研究生在攻读学位期间论文工作的知识产权单位属内蒙古农业大学。本人保证毕业离校后，发表论文或使用论文工作成果时署名单位为内蒙古农业大学，且导师为通讯作者，通讯作者单位亦署名为内蒙古农业大学。学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子文档，允许论文被查阅和借阅。学校可以公布学位论文的全部或部分内容(保密内容除外)，采用影印、缩印或其他手段保存论文。摘要柠条锦鸡儿属于豆科锦鸡属，分布于亚洲中部，是沙质荒漠中十分常见的较高灌木，是黄土高原退耕还林和干旱地区防风固沙的主要树种。柠条锦鸡儿适应力极强。研究其潜在的优良抗逆基因

3、，对于保护物种多样性、生物的可持续发展具有重要的意义。木质素是一类天然的高分子物质，普遍存在于植物体内，可再生利用也可降解。随着人们对可再生物质利用率逐步提高，木质素成为一种很好的选择。通过基因工程来调控木质素的生物合成和降解，可以提高植物木质素的利用率，具有一定的应用价值和环保效益。本实验主要对柠条锦鸡儿的组织培养和遗传转化体系进行了探索，并研究了柠条锦鸡儿阿魏酸-5．羟化酶(F5H)转基因拟南芥的功能鉴定，取得如下的进展。1．对柠条锦鸡儿野生种子采用氯气消毒处理l8小时，污染率较低，不影响种子的萌发。2．以柠条锦鸡儿子叶节作为

4、外植体，通过诱导愈伤的方法初步建立了一个柠条锦鸡儿的遗传转化体系。在诱导愈伤的培养基上，2．0mg／L6．BA+2．0mg／L2,4．D，愈伤组织诱导率高并且芽增殖数达到2．5。移栽到土中，95％以上的苗正常成活。目前遗传转化的效率为0．42％。3．构建了CkF5H过表达和互补载体，通过农杆菌介导的拟南芥转化体系，转化野生型拟南芥和励办J7．2突变体，共得到了过表达纯合体拟南芥6株，互补型纯合体拟南芥6株。4．通过拟南芥的遗传转化初步验证了其功能，结果显示：CkF5H基因的超量表达对转基因拟南芥植株的正常生长没有影响。染色结果：C

5、kF5H基因互补拟南芥突变体，S型木质素恢复到野生型的正常水平，说明CkF5H能够促进G型木质素向S型木质素转化。关键词：柠条锦鸡儿；CkF5H基因；组织培养；遗传转化EstablishmentoftheTransformationSystemofCaraganakorshinskiiKern．andIdentificationofCkF5HTransgenieArabidopsisthalianaAbstractCaraganakorshinskiiKom．，inthegenusofCaragana，Fabaceaefamily

6、，isatallshrubcommoninthesandydesertofCentralAsia，CaraganakorshinskiihasbeentreatedasadominanttreespeciesthatiSplantedasawindbreaktoprotectsoilinaridareaandtoreturnfarmlandtOforestryintheLoessPlateau．Caraganakorshinskiihasanastonishingadaptabilityandthusitisofgreatsign

7、ificancetostudyitspotentiallyfavorableresistancegenesforspeciesdiversitypreservationandbiologicalsustainabledevelopment．Ligninisanaturalkindofmacromolecule，itiswidelyspreadinplants．Lignincanbedegradedbecauseofthespecialstructurecharacters，therebybeingagoodchoiceindeal

8、ingwithanincreasingdemandforenergyresources．Acertainapplicationvaluesandenvironmentalbenefitscanbeachievedbyregulatingthebio