itraq定量蛋白组学在人肺腺癌a549细胞中的应用研究

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1、中图分类号密级iTRAQ定量蛋白组学在人肺腺癌A549细胞中的应用研究StudyOiliTRAQquantitativeproteomicsinhumanLungAdenocarcinomaofA549cell计：学位论文：38页表格：2个插图：4幅佟新竹指导教师：邹丽娟教授申请学位级别：硕士学位学科(专业)：肿瘤学培养单位：大连医科大学附属二院完成时间：二。一三年四月答辩委员会主席：独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地

2、方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得大连医科大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：壁蕴红签字日期：蛆年尘月上Et关于学位论文使用授权的说明本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权大连医科大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等

3、复制手段保存和汇编本学位论文。本学位论文属于(请在以下相应方框内打“、／”)：1．保密口，在—年解密后适用本授权书。2．不保密函作者签名：仑新竹日期：w睥年月c，日导师签名：铆而嫡日期：沙fj年cf月6日目录一、摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1(一)中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1(二)英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯3二、正文⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯5(一)前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯5(一)日Ⅱ吾⋯

4、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯(二)材料和方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯61．材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯61．1细胞⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯”⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。61．2主要试剂和仪器⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯62．实验方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯72．1细胞培养⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯72．2实验分组⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯72．3LC—LTQ—orbitrap质谱分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯72．4ELISA法测各实验

5、组HSP27／COX一3浓度⋯⋯⋯⋯⋯9(三)结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯111．LC．LTQ．orbitrap质谱分析结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯112．ELISA法测各实验组HSP27／COX．3浓度结果⋯⋯13(四)讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯l3(五)结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯19(六)参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯25三、综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯29(一)综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

6、⋯⋯⋯⋯⋯⋯29(二)参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯34四、致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯38大连医科大学硕士学位论文iTRAQ定量蛋白组学在人肺腺癌A549细胞中的应用研究硕士生姓名：指导教师：指导小组：专业名称：佼氰哦刍F丽士葡教授张丽华研究员肿瘤学摘要目的：利用蛋白质组学相对定量技术，研究榄香烯和／或联合X线照射对人肺腺癌A549细胞系蛋白质表达谱的影响，并对差异显著的蛋白质功能进行分析。深入研究差异蛋白——热休克蛋白27(HSP27)、环氧化酶一3(COX一

7、3)经榄香烯以及x线处理前后在肺腺癌细胞中的表达水平变化，并对其进行生物学验证，旨在探讨蛋白质组学方法的可靠性和稳定性。方法：1．应用体外iTRAQ标记技术，并利用高效液相色谱一高精度质谱联用的方法，探讨榄香烯单药治疗、x线照射以及榄香烯联合x线照射对人肺腺癌A549细胞内蛋白质表达的影响，通过大规模比较蛋白质组分析，得到差异蛋白。2．采用ELISA双抗夹心法检测榄香烯单药治疗、X线照射以及榄香烯联合X线照射对人肺腺癌A549细胞内热休克蛋白27、环氧化酶一3表达的影响，并对其结果进行统计学分析。结果：1．

8、运用iTRAQ定量蛋白质组学的方法，在各个实验组与对照组之间最终鉴定到514个差异表达蛋白质，其中显著差异蛋白质共33个(以人肺腺癌A549细胞作为对照组，以比值大于1．5和小于1／1．5作为筛选门槛，筛选榄香烯单药治疗、X线照射以及榄香烯联合X线照射后的A549细胞中的差异蛋白质)，有15个蛋白质具有统计学意义，进一步分析这些差异蛋白质的功能，发现其主要涉及细胞能量代谢、RNA加工和转运、信号转导、以及细胞分化