简并pcr技术及其在基因克隆中的应用

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1、遗传>?@?:"AB=（1(&C）"（-"）："%!["%&，"%%$技术与方法!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!简并!"#技术及其在基因克隆中的应用王洪振!，"，周晓馥!，"，宋朝霞!，刘文广!，曾宪录!（!#东北师范大学遗传与细胞研究所，长春!$%%"&；"#吉林师范大学生物系，四平!$’%%%）摘要：本文简要介绍简并()*技术，包括什么是简并引物，如何设计简并引物，进行简并()*的反应条件，应用简并()*获得全长基因的方法

2、和简并()*技术的应用范围，并对简并()*技术的局限性及其新进展进行讨论。在此基础上，简述基因的克隆策略以及简并()*技术在基因克隆中的应用。简并()*技术是寻找和发现“新”基因或蛋白质家族新成员的一种非常有用的工具。关键词：简并()*；简并引物；基因克隆中图分类号：+,-文献标识码：.文章编号：%"-$/0,,（""%%$）%"/%"%!/%&$%&%’%()*%!"#)’+,*-.//012)*13’1’4%’%"03’1’&1.23456789:;6!，"，94<=>?@58AB!，"，C<239:@58>?@!，DE

3、=1;683B@67!，9F23>?@68DB!（!!"#$%&%’%()*+(#(%&,$-#./(001&)0)23，4)5%6(-$%4)57-08#&9(5$&%3，/6-#2,6’#!$%%"&，/6&#-；"!:(;-5%7(#%)*1&)0)23，<&0)57-08#&9(5$&%3，=&;!$’%%%，/6&#-）.5-*()2*：G;7;6;H@I;()*?J?6IH5KBL;K?6I:?JM@M;H，?6LNBK?67O:@I?JK;7;6;H@I;()*，:5OI5K;J?76K;7;6;H

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6、互补的寡核苷酸引物，在反应管中选择性地复计划即将完成，以及一些模式生物如酵母、线虫、果蝇、小鼠、制合成介于两引物之间的G2.片段，因此，又被称为G2.的拟南芥、水稻和一些原核生物的基因组的全序列已经被测定体外扩增。()*技术已经成为分子生物学中的常规技术。或即将被测定完成的情况下，在3;6W@6X中积累了大量未知()*最初是为扩增已知序列设计的，简并()*技术却能扩增功能的G2.序列，识别和鉴定其中的新基因，以及对其功能未知序列。当待研究的基因序列不明，仅知其一部分蛋白质开展研究是进一步深入研究的必然。简并()*技术由于具的

7、氨基酸序列，可根据氨基酸序列合成一组简并引物，进行有能够快速、简便和经济鉴别新基因的优点，必将在这方面()*扩增，对基因家族中的未知成员（基因）进行分离。下面得到越来越广泛的应用。下面就简并()*技术及其在基因简要介绍这一技术。克隆中的应用作以简要综述。9#9简并引物简并()*与常规()*之间的一个重大差别，是用简并9简并!"#技术引物代替具有特定序列的特异的()*引物。简并引物的出简并()*技术是()*技术的发展。()*技术也称聚合现是由于遗传密码具有简并性，这样可以根据氨基酸的保守收稿日期："%%"/%&/"0；修回日期

8、："%%"/%,/!-基金项目：国家自然科学基金（批准号：$%%&%%$!）和吉林省自然科学基金（批准号："%%!%--$）资助项目作者简介：王洪振（!0,-/），男，讲师，在读博士生，专业方向：细胞生物学。F8P@?N：S?5JIBK;6IYJ5:B#L5P，U;N：%&$!/-"’0,