组织激肽释放酶8在宫内感染脑白质损伤仔鼠海马及血清中的表达

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1、硕士学位论文论文题目组织激肽释放酶8在宫内感染脑白质损伤仔鼠海马及血清中的表达研究生姓名朱莹雯指导教师姓名丁晓春专业名称儿科学研究方向新生儿论文提交日期2013年3月组织激肽释放酶8在宫内感染脑白质损伤仔鼠海马及血清中的表达中文摘要组织激肽释放酶8在宫内感染脑白质损伤仔鼠海马及血清中的表达中文摘要目的：本实验通过孕鼠腹腔注射脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）构建宫内感染脑白质损伤仔鼠模型，观察组织激肽释放酶8（Kallikrein8,Neuropsin，KLK8）在仔鼠海马及血清中的表达变化，以探讨宫内感染仔鼠发生脑白质损伤的机制。方法：选取健康三月龄SD大鼠（Sprag

2、ue-Dawley大鼠）52只，按照雌雄1：1的比例交配。受孕成功的孕鼠随机分为正常对照组（对照组）和宫内感染组（感染组）；孕18天时，感染组孕鼠连续2天腹腔注射LPS，建立宫内感染致脑白质损伤仔鼠模型；对照组孕鼠注射同等剂量的生理盐水。两组孕鼠均正常饮食喂养及自由饮水，仔鼠生后由母鼠哺乳喂养，选择生后1日龄、3日龄、7日龄和14日龄4个时间点，每个时间点每组有9只仔鼠，测量仔鼠出生体重及各个时间点时的体重、脑重，在各个时间点9只仔鼠中随机选取3只仔鼠取脑组织进行HE染色观察脑组织形态，其余6只留取海马组织，两侧分别用Westernblot及RT-PCR检测海马组织中组织激肽释放酶8的动态表

3、达，同时检测血清中组织激肽释放酶8的表达水平。结果：1、两组大鼠体重及脑重的动态比较：感染组出生时及1日龄时体重降低（P＜0.05），到3日龄、7日龄、14日龄时体重与对照组无明显差异（P＞0.05）；感染组1日龄仔鼠脑重降低（P＜0.01），到3日龄、7日龄、14日龄时脑重与对照组无明显差异（P＞0.05）。2、两组大鼠脑组织HE染色的变化：感染组SD大鼠生后1天、3天脑组织切片可见组织疏松、水肿；生后7天及14天脑白质染色淡，结构疏松呈筛网状，细胞数减少。同时感染组还有脑室内出血、脑白质血管扩张、毛细血管破裂出血等现象。对I中文摘要组织激肽释放酶8在宫内感染脑白质损伤仔鼠海马及血清中的表

4、达照组仔鼠脑组织切片见脑室周围白质区域无明显水肿，无明显细胞减少。3、两组大鼠海马组织中组织激肽释放酶8的动态表达：在四个时间点，1日龄时，两组大鼠组织激肽释放酶8的表达均低，3日龄时表达增加，7日龄和14日龄时明显表达；Westernblot及RT-PCR检测发现与对照组相比，在1日龄、3日龄及7日龄时感染组仔鼠组织激肽释放酶8的表达均高于对照组（P＜0.05）。到14日龄时两组表达无明显差异（P＞0.05）。4、血清组织激肽释放酶8表达水平比较：四个时间点，在1日龄时表达最低，随着日龄渐增加，到7日龄与14日龄时明显表达；两组比较，在1日龄、3日龄及7日龄时感染组仔鼠较对照组高（P＜0.

5、05），到14日龄时两组表达无明显差异（P＞0.05）。5、组织激肽释放酶8血清表达水平与Westernblot半定量检测海马中蛋白量的相关性分析：海马组织中KLK8表达的值与血清浓度值之间均呈正相关关系，直线等级相关系数为0.759(P<0.01)。结论：1、孕鼠腹腔注射LPS能建立宫内感染大鼠脑白质损伤模型。2、孕鼠腹腔注射LPS建立的宫内感染脑白质损伤仔鼠，出生时体重、脑重低，生后脑白质染色淡，结构疏松呈筛网状，细胞数减少，并有脑室内出血、脑白质血管扩张、毛细血管破裂出血等现象。3、宫内感染脑白质损伤仔鼠组织激肽释放酶8在海马及血清中的表达量于仔鼠脑白质受损高峰期（3天、7天）高于对照

6、组，提示其可能参与宫内感染仔鼠发生脑白质损伤的机制。关键词：宫内感染；组织激肽释放酶8；脑白质损伤作者：朱莹雯指导老师：丁晓春II组织激肽释放酶8在宫内感染脑白质损伤仔鼠海马及血清中的表达英文摘要TheExpressionofneuropsinInHippocampusandserumforratwithwhitematterinjuryinducedbyintrauterineinfectionAbstractObjectives:Maketheneonatalratmodelofbrainwhitematterinjurybyintraperitonealinjectionoflipop

7、olysaccharideduringpregnancy,andthenobservetheexpressionofneuropsininhippocampusandserum.Todiscussthemechanismofwhitematterinjuryofneonatalratinducedbyintrauterineinfection.Methods:Fifty-twohealthythree-mon