小麦tacrf2基因的克隆及其在烟草中的初步功能验证

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1、万方数据作物学报ACTAAGRONOMICASINICA2011，37(8)：1389--1397http：／／www．chinaerops．org／zwxb／ISSN0496-3490；CODENTSHPA9E—mail：xbzw@chinajoumal．net．CUDoI：10．3724／SP．J．1006．2011．01389小麦TaCRF2基因的克隆及其在烟草中的初步功能验证郭丽香1，2赵昌平2·’高世庆2，料唐益苗2王永波2刘美英3张朝3徐蓓1，21首都师范大学生命科学学院，北京100048；2北京市农林科学院杂交小麦

2、工程技术研究中心．北京100097；3中国科学技术大学研究生院化学系，安徽合肥230026摘要：通过RT-PCR方法从小麦cDNA中扩增获得1个锌指蛋白基因TaCRF2，该基因的cDNA长度为843bp，序列分析表明它编码1个含有280个氨基酸的蛋白质。在线软件预测该蛋白质的相对分子质量为30．97kD，等电点为7．03，且在C一末端含有1个典型的RING．H2型锌指蛋白结构域，在N．末端含有2个跨膜结构域。氨基酸序列比对发现，TaCRF2与水稻中1个RING型锌指蛋[刍(ABF95226)的相似度为82％。亚细胞定位分析显示，

3、该蛋白分布在细胞核和细胞膜上。real．timeRT-PCR表达特性分析显示，TaCRF2基因的表达受干旱、高盐和外源ABA的强烈诱导，低温对该基因的表达量影响不明显。初步功能验证发现过表达TaCRF2基因增强了转基因烟草对干旱和高盐胁迫的耐性。关键词：烟草；小麦；RING．H2型锌指蛋白；TaCRF2基因；干旱胁迫；盐胁迫TaCRF2GeneIsolationfromTriticumaestivumandPrimaryFunctionValida-tioninTobacco(NicotianatabacumL)GUOLi—Xi

4、an91，一，GAOShi．Qin92’”，TANGYi．Mia02，WANGYong．B02，L1UMei—Yin93，ZHANGZha03，XUBcilt_．andZHAOChang．Pin92'‘1CollegeofLifeSciences．CapitalNormalUniversity,Beijing100048，China；2BeijingHybridWheatEngineeringandTechnologyResearchCenter,BeijingAcademyofAgricultureandForestrySci

5、ences，Beijing100097，Chhla；3DepartmentofChemistry,GraduateSchoolofUniversityofScienceandTechnologyofChina,Hefei230026，ChinaAbstract：ⅥmeaLlikeothercrops。suffersfromdrought，salt，low．temperatureandotherabioticstresses，seriouslyresultinginyielddecline．ItisaneffectiveWayfo

6、rcropbreedingtoimproveresistanceviamolecularbiologytechniques．Zincfmgerprotein，animportanttranscriptionfactorcommonlyfoundinplant,carlregulatetheexpressionofmultiplestress—induciblegenesandenhancecomprehensiveresistanceseffectively．Inthisstudy,aIu时G-H2zincfingerprote

7、ingene，designatedasTaCRF2，wasisolatedfromTriticumaestivumbvRT-PCR．ItscDNAwas843bpandencodedaputativeproteinof280Rlllinoacidswithapre-dictedmolecularmassof30．97kDandanisoelectricpoint(PI)of7．03．AtypicalRENG．H2fingerdomainwasfoundattheC-terrainalregionofT忙RF2protein．an

8、dtWotransmembranedomainswerefoundattheN-terminalregion．AlignmentofaminoacidsequenceshowedthatTaCRF2was82％identicaltoOryzasativaputa