irs-1基因缺失小鼠的建立及表型研究

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1、中图分类号～R589．9UDC610硕士学位论文学校代码!Q5当3密级公珏ms．1基因缺失小鼠的建立及表型研究TheEstablishmentofMiceModelwithInsulinReceptorSubstrate1LossofFunctionandIt’SPhenotypicStudy作者姓名：满晓且出学科专业：临床医学研究方向：内科学(代谢内分泌学)院、系(所)：湘雅二医院指导教师：周后德副研究员论文答辩日期越年上月且日答辩委员会主席中南大学二O一三年五月原创性声明本人声明，所呈交的学位论文是本人在导师指

2、导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了论文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得中南大学或其他单位的学位或证书而使用过的材料。与我共同工作的同志对本研究所作的贡献均已在论文中作了明确的说明。作者签名：l聋蔓!地学位论文版权使用授权书本人了解中南大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留学位论文并根据国家或湖南省有关部门规定送交学位论文，允许学位论文被查阅和借阅；学校可以公布学位论文的全部或部分内容，可以采用复印、缩印或其他手段保存学位论文。同时

3、授权中国科学技术信息研究所将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》，并通过网络向社会公众提供信息服务。IRS．1基因缺失小鼠的建立及表型研究摘要目的获得IRS．1表达缺失小鼠，研究IRS．1基因缺失小鼠表型、血糖调节能力及胰岛素敏感性、进食量、骨密度等的变化，并利用IRS．1。。小鼠模型探讨IRS．2是否对IRS．1的缺失产生代偿及其可能的机制。方法1．从JacksonLaboratory引进自发性突变致全身IRS-1基因表达缺失的杂合子小鼠，通过杂交及基因鉴定获得IRS．1壬小鼠，比较IRS．1坍、IRS．1

4、+／-、IRS．1乒三种基因型小鼠体重、血糖、进食量及运动量等的差异，microCT骨小梁三维重建分析比较1月龄及1年龄IRS．1乒小鼠骨微结构变化。2．以骨代谢相关PCRarray、脂肪形成相关PCRarray检测IRS．14小鼠表达显著差异的骨代谢及脂肪形成相关指标，结合miRNA芯片表达谱，找出有明显差异的miRNA及其对应的靶基因。结果1．成功获得三种基因型小鼠，同时发现IRS．1乒小鼠体型瘦小，约为同窝野生型小鼠的40％．60％，生长发育迟缓，血糖正常，存在胰岛素抵抗，进食量及活动量增加，皮下脂肪含量少，

5、1月龄IRS．14小鼠骨密度下降明显，1年龄IRS．14小鼠骨密度较野生型升高。2．PCRarray示IRS．1以小鼠部分脂肪形成相关基因显著下调，骨II代谢相关基因显著上调；miRNA表达谱分析表明：在IRS．14中有34个miRNA表达上调，18个miRNA表达下调，其中miR-33表达明显下调，其靶分子为IRS．2；而胰岛素信号通路的关键分子P13K的表达呈现出组织多样性，在肝脏、小肠等组织中表达降低，而在肌肉、脂肪、下丘脑中反而升高，IRS．2在肌肉中表达也升高。结论1．我们成功获得了自发性突变致IRS．1

6、基因表达缺失小鼠。IRS．1缺失使胰岛素敏感性降低，皮下及内脏脂肪明显减少，1月龄纯合子小鼠骨密度下降，而1年龄纯合子小鼠骨密度增加。2．IRS．1信号通路缺失可由miR-33介导的IRS．2信号通路代偿。图17幅，表3个，参考文献34篇。关键词：IRS．1；IRS．2；成脂；骨代谢；P13K；miRNA分类号：R589．9IIITheEstablishmentofMiceModelwithInsufinReceptorSubstrate1LossofFunctionandIt’sPhenotypicStudyAB

7、STRACTObjective：Toobtaininsulinreceptorsubstratel(1RS一1)lossoffunctionmiceandobservethechangesofbloodglucoseregulatingcapacityandinsulinsensitivity,fatvolumeandbonemicroarchitecture，andinvestigatewhetherIRS一2cancompensatefortheabsenceoflRS一1．Methods：1．TheIRS一1

8、spontaneousmutationheterozygoteandwildtypemicewerepruchasedfromtheJacksonLaboratory,themicewerebredandhybridunderSPFenvironment，aftergenotypebyPCRandTaqldigestion，weobtainedIRS．14m