txnip在乳腺癌中的表达和临床意义

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1、南方医科大学2010级硕士学位论文TXNIP在乳腺癌中的表达和临床意义TheexpressionandclinicalsignificanceofTXNIPinbreastcancer课题来源：自选课题学位申请导师姓专业名培养类培养层所在学人陈文君名罗荣城教授称肿瘤学型学术型次硕士院研究生学院2013年3月20日广州硕士学位论文TXNIP在乳腺癌中的表达和临床意义硕士研究生：陈文君指导教师：罗荣城教授导师组成员：李荣博士摘要肿瘤的形成过程是一个多阶段的、复杂的过程并且涉及原癌基因的激活和抑癌基因的失活。正常时原癌基因是不致癌的，当人体受到细菌、病毒、理化因素和精神因素刺激时，原癌基因被激活，发

2、生异常，致使人体细胞增生不受控制、出现异常增生、发生恶性变，形成肿瘤。人体还存在着一种抑癌基因，它可以控制人体细胞正常分裂、增值，抑制细胞的异常增生和癌变。当抑癌基因受到病毒感染、电离辐射等损伤后，肿瘤抑制基因功能丧失，细胞正常分裂与增生的平衡被打破，使细胞分裂与增殖不受控制，细胞出现异常增生或异倍体增殖，细胞突变、形成肿瘤。近年来多个研究表明TXNIP基因在肿瘤的进展和转移过程中担任着重要的角色，TXNIP基因是一个新的抑癌基因，它在人类肝癌、肺癌等癌组织中均表达下降，并且与肿瘤的转移相关，TXNIP的缺失可以促使肿瘤细胞的增殖和抑制细胞凋亡的进程。伴随着人类基因组计划的完成，各种基因的筛选

3、已成为目前基因研究的热点，而探索肿瘤进展和转移的相关基因对判定肿瘤的预后、指导治疗措施的选择及研发新的治疗措施和方案都具有重要的指导意义。一、研究背景和目的乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一，在我国占全身各种恶性肿瘤的7％．10％，呈逐年上升趋势，部分大城市报告乳腺癌占女性恶性肿瘤之首位。20中文摘要岁前本病少见，20岁以后发病率迅速上升，45．50岁较高，绝经后发病率继续上升，可能与年老者雌酮含量提高相关。月经过早来潮(小于12岁)或绝经晚(迟于55岁)，未生育，晚育(第一胎在35岁以后)或生育后不哺乳，乳癌的发生率较高。近年来，随着诊断和治疗水平的不断进步，对乳腺癌患者术后的5年生存率，乳腺

4、癌术后生存质量都有很大的提高，但是晚期乳腺癌的治疗效果仍然有待提高。因此，关于乳腺癌发病因素的探讨，以期早期发现、早期治疗并提高临床疗效已成为临床研究的重点之一。硫氧还蛋白结合蛋白(thioredoxin-interactingprotein，TXNIP)，又名维生素D3上调蛋白1(vitaminD3up—regulatingproteinl，VDUPl)，，是a-视紫红质抑制蛋白家族成员之一，而且是家族中唯一可以与硫氧还蛋白(thioredoxin，嗽)结合的蛋白。TXNIP能通过与Trx活性半胱氨酸残基的结合而抑制其抗氧化功能，同时参与调节体内活性氧系统以及线粒体通路的过程，诱导细胞的凋亡

5、程序，表现了TXNIP在细胞发育过程中的介导作用。编码TXNIP的基因位于人染色体lq21．22，包含8个外显子，长4174bp。TXNIP基因首次在用1，25二羟基维生素D．3处理的人类白血病细胞系HL．60中被发现，研究表明。TXNIP基因相关的细胞增殖周期失控和NK细胞发育异常等与肿瘤发生和转移联系密切。目前关于TXNIP在乳腺癌中表达情况的报道甚少，与临床病理特征的关系尚无公认的结论。为此，我们采用实时定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)方法检测16例乳腺癌和配对癌旁组织中的TXNIPmRNA的表达水平，用免疫印迹(westernblot)法检测7例乳腺癌及配对癌旁组织中的TXNI

6、P蛋白表达水平：用免疫组织化学链霉素抗生物素蛋白一过氧化物酶连结法(SP法)对50例乳腺癌及配对癌旁组织中的TXNP蛋白进行半定量检测。应用SPSSl3．0统计软件，分别探讨TXNIPmRNA在乳腺癌及配对癌旁组织中的表达水平，和TXNIP蛋白在乳腺癌和癌旁组织重的表达水平及其与乳腺癌患者年龄、临床分期、病理组织学分化等的关系。Ⅱ硕士学位论文二、方法与内容1．研究对象本研究共收集南方医科大学南方医院2011．2012年间存档的50例乳腺癌及配对的癌旁组织，所有患者术前均未经化疗或放疗，病理诊断浸润性导管癌。其中年龄茎50岁29例，年龄>50岁21例，平均年龄44．68岁；TNM分期I~II期2

7、0例，III～Ⅳ期30例：中高分化乳腺癌26例，低分化乳腺癌24例。组织标本蜡块常规切片。2．研究方法A．qRT-PCR法检测TXNIPmRNA的表达a．样品总RNA的制备：PBS清洗组织样品，剪碎，液氮中研磨。然后采用TRIZOL法提取组织细胞中的总RNA，用紫外分光光度计及琼脂糖凝胶电泳检提取到的RNA的完整性、纯度和含量。b．cDNA合成反转录前直接将6．5ul的RNA加入到反转录体系中合成