rip、c-flip基因在肝癌中的表达意义及其在trail诱导的肝癌细胞凋亡中的作用

《rip、c-flip基因在肝癌中的表达意义及其在trail诱导的肝癌细胞凋亡中的作用》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、UDC博士学位论文学校代码密级10533RIP、c—FLIP基因在肝癌中的表达意义及其在TRAIL诱导的肝癌细胞凋亡中的作用ThesignificanceofRIP,c—FLIPgeneexpressionandtheroleinTRAIL-．inducedapoptosisinhepaticcarcinoma作者姓名：孙吉春学科专业：临床医学研究方向：外科学学院(系、所)：湘雅三医院指导老师：叶放发教授论文答辩日期—饵答辩委员会主席中南大学二O一三年五月原创性声明本人声明，所呈交的学位论文是本人在导师指导

2、下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了论文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得中南大学或其他单位的学位或证书而使用过的材料。与我共同工作的同志对本研究所作的贡献均已在论文中作了明确的说明。作者签名：孚：l二苎盔日期：2斗乒年』月斗日学位论文版权使用授权书本人了解中南大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留学位论文并根据国家或湖南省有关部门规定送交学位论文，允许学位论文被查阅和借阅；学校可以公布学位论文的全部或部分内容，可以采用复印、缩

3、印或其它手段保存学位论文。同时授权中国科学技术信息研究所将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》，并通过网络向社会公众提供信息服务。博士学位论文中文摘要摘要第一章RIP，c．FLIP在肝癌中的表达及意义目的：受体相互作用蛋白(receptor-interactingprotein，RIP)是在肿瘤坏死因子(TNF)信号途径中发挥重要作用的效应器，在细胞增殖和凋亡过程中起重要作用。细胞型Fas相关死亡区域蛋白样白介素．1转换酶抑制蛋I刍(celluarFLICE—likeinhibitoryprotein

4、，c-FLIP)是一种重要的细胞凋亡抑制蛋白。本章旨在探究RIP，c．FLIP在肝癌中的表达及意义。方法：选取2005年1月至2009年12月期间在中南大学湘雅三医院普外科和湘雅医院普外科确诊的80例肝癌患者的肝癌组织进行研究，再取肝内胆管结石患者正常肝组织40例作为对照。应用免疫组化法对实验组及对照组中c．FLIP和RIP蛋白的表达情况进行检测。分析RIP和c—FLIP在肝癌组织中的表达与肿瘤的病理学分级和患者临床分期及复发远处转移之间的相关性。结果：RIP、c。FLIP的表达定位于细胞胞浆中，肝癌实验组

5、阳性细胞表达率分别为78．8％和85．O％，而在对照组正常肝组织中阳性细胞表达率分别为12．5％和17．5％。RIP和c—FLIP阳性表达与肝癌远处转移及术后复发相关，而与肿瘤大小、临床分期等其他因素无关。RIP和c—FLIP在肝癌组织中表达呈显著正相关。博士学位论文中文摘要结论：1．c．FLIP、RIP在肝癌组织中高表达而在肝正常组织中低表达。2．c．FLIP和RIP在肝癌组织中的表达水平与肝癌患者的临床病理参数密切相关。3．c．FLIP和RIP可能共同参与了肝癌的细胞凋亡、发生、发展。关键词：RIP；c

6、．FLIP；肝癌III博士学位论文中文摘要第二章RIP、c．FLIP基因表达在TRAIL诱导肝癌细胞凋亡中的作用目的：肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(tumornecrosisfactorrelatedapoptosisinducingligand，TRAIL)通过死亡受体途径诱导的细胞凋亡是体内天然抗肿瘤的重要机制，但是TRAIL抵抗是肝癌预后不良的重要原因。化疗药物能逆转肝癌细胞HepG2及Hep3B对TRAIL诱导凋亡的抵抗，其机理在于下调传导TRAIL信号的死亡诱导信号复合物(death—induci

7、ngsignalingcomplex，DISC)中RIP和c—FLIP的表达。本章构建RIP和c—FLIP基因沉默的肝癌细胞模型，旨在研究RIP和c．FLIP的表达变化对TRAIL诱导凋亡的影响。方法：通过siRNA(smallinterferingRNA)技术建立HepG2及Hep3B细胞系的RIP和／或c．FLIP基因沉默的亚克隆细胞模型，并进行下列研究：进行TRAIL诱导凋亡的DISC分析，明确细胞凋亡信号的传导是否受阻于DISC水平；应用c．FLIP、RIP的siRNA，进一步检测c—FLIP、RI

8、P在抑制半胱一天冬氨酸蛋白酶8(cysteinecontainingaspiratespecificprotease8，Caspase一8)活性。结果：用TRAIL治疗浓度100ng／ml按不同时间处理HepG2及Hep3B细胞系，Caspase．8／9／3的活化程度减弱，并且没有DFF45的裂解。化疗药物丝裂霉素、阿霉素作用后，对DISC内DR4、DR5的表达无TV博士学位论文中文摘要明显影响，TRAIL单独应