人参皂苷rg1对局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠模型的神经保护作用及其机制研究

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1、温州医学院研究生学位论文论文题目：人参皂苷Rgl对局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠模型的神经保护作用及其机制研究答辩委员会主席：侯群教授浙江省中医药大学答辩委员会成员：郑荣远教授温州医科大学诸葛毅教授衢州职业技术学院医学院论文答辩日期：二0一三年六月二号温州医学院硕士学位论文目录一、英文缩略词中英文对照表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．1二、论文摘要中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．2英文摘要．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．⋯⋯．．⋯．．．．⋯．．．4三、论文正文材料和方法⋯⋯．⋯⋯⋯⋯．⋯．⋯⋯⋯⋯．⋯⋯8结果．．⋯．．．⋯．．．⋯．．．．．．．．．

2、⋯．．．．⋯⋯⋯⋯⋯．18分析与讨论⋯⋯．⋯⋯．⋯⋯⋯⋯．⋯⋯．⋯⋯．．．30小结⋯．．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．⋯⋯⋯⋯．34参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯34四、附录⋯．⋯⋯⋯⋯．．．．．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．⋯⋯39五、致谢⋯⋯⋯⋯．⋯⋯⋯⋯⋯⋯．⋯⋯⋯．．⋯．．．40六、综述及参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯41七、学位论文独创性声明．．．⋯．．．．．．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．47温州医学院研究生学位论文本研究项目受到以下课题资助，谨以致谢：1．国家自然科学基金(81173395／H2902)。2．浙江省中医药科技计划项目，200

3、60100．温少I'1医学院研究生学位论文英文缩略词表温州医学院研究生学位论文人参皂苷Rg

4、对局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠模型的神经保护作用及其机制研究摘要目的：探讨人参皂苷Rgl(G—R91)对大鼠脑缺血再灌注(CIR)损伤模型的神经保护作用及对缺血再灌注后脑组织水通道蛋白4(aquporin4)和蛋白酶激活受体-1(PAR-1)表达变化的影响。方法：300只SD大鼠，雄性，随机分为5组：假手术组(n=60)；CIR组(n=60)；G-Rgl组20mg／kg组(n=60)；乙酰唑胺(AZA)组lOOmg／kg组(n=60)；G-Rg

5、l组20mg／kg+AZA组lOOmg／kg组(n=60)。每组据不同时间点分为6h、ld、3d、7d、14d5个亚组(n=12)。各组均于术前三天开始腹腔注射给药，每天1次。G-Rgl与AZA分别以生理盐水及注射用大豆油做对照。本实验采用线栓法制备大鼠大脑中动脉阻塞(MCAO)模型，假手术组只分离血管不插入线栓。于术后2h采用ZeaLonga评分标准筛选成功模型，1’3分视为造模成功，并于术后各时间点评价大鼠神经功能缺损的变化：测定伊文思蓝(EvansBlue，EB)含量来观察血脑屏障(BBB)通透性：蛋白免疫印迹法(Wester

6、nblot，WB)检测病灶侧海马区AQP4和PAR—l蛋白表达，荧光定量RT—PCR技术检测病灶侧纹状体AQP4mRNA和PAR一1mRNA的表达。结果：1．神经功能评分比较：模型组与各药物组大鼠在脑缺血再灌注后6h时比较，神经功能评分无显著性差异(P>0．05)。在6h后模型组与各药物组大鼠神经功能评分呈相同的变化趋势，第3d神经功能评分最高，随后开始降低，各时间点比较具有统计学差异(P

7、均有统计学意义(P<0．05)；G—Rgl+AZA联合治疗组与模型组、G-Rgl组和AZA组比较在再灌注后1d、3d、7d、14d时间点均有统计学意义(P<0．05)。而G-Rgl组与AZA组比较无明显统计学意义(P>O．05)2．伊文思蓝测定：模型组在再灌注后6h即有EB漏出进入脑组织中，在第3天漏出量达到高峰，随后开始下降，组内各时间点比较具有统计学差异(P<0．05)。模型组与假手术组、G-Rgl组，AZA组、G-Rgl+AZA联合治疗组在再灌注后各时间点均存在统计学差异(P<0．05)。G-Rgl+AZA联合治疗组与G-Rg

8、l组和AZA组比较在再灌注后各时间点均有统计学意义(P<0．05)。而G-Rgl组与AZA组比较无明显统计学意义(P>0．05)。2温州医学院研究生学位论文3．AQP4表达的变化：荧光定量RT—PCR技术和蛋白免疫印迹法检测发现模型组在缺血再灌注后6h即可见AQP4表达升高，在第3d处于最高值，随后开始下降，各时间点比较具有统计学差异(P<0．05)。模型组与假手术组、G-Rgl组，AZA组，G-Rgl+AZA联合治疗组在再灌注后各时间点均存在统计学差异(P<0．05)。G-Rgl+AZA联合治疗组与G-Rgl组和AZA组比较在再灌

9、注后各时间点均有统计学意义(P<0．05)。而G-Rgl组与AZA组比较无明显统计学意义(P>O．05)。4．PAR一1表达的变化：荧光定量RT—PCR技术和蛋白免疫印迹法检测显示模型组PAR一1表达在6h无明显变化，在6h后开始上升