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时间:2019-03-04
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1、马铃薯病毒检测技术的研究进展与现状分析刘海英陈建保康俊张浩俎爱忠景思远乌兰察布职业学院乌兰察布市产品质量计量检测所摘要:论述了马铃薯病毒检测技术的研究进展,主要介绍了目测法、指示植物鉴定法、电子显微镜检测法、血清学检测法、分子生物学等检测法,同时对每种检测法进行了简要评价,为从事马铃薯病毒检测工作提供帮助。关键词:马铃薯;病毒检测;技术;作者简介:刘海英(1975—),女,硕士,副教授,研究方向为马铃薯组培及病毒检测方面的教学和科研。作者简介:俎爱忠(1973—),男,本科,高级工程师,研究方向为产品质量检验。收稿日期:201
2、7-09-28基金:内蒙古质检系统科研项冃(2015006)ResearchProgressandPresentSituationAnalysisofPotatoVimsDetectionTechniqueLIUHaiyingCHENJianbaoKANGJunZHANGHaoZUAizhongTINGSiyuanUlanaabVocationalCollege:U1anqabProductQualityMeasurementandTestingInstitute;Abstract:Thispapersummarizedthe
3、progressmacleintheresearchaboutpotatovirusdetection.Itbrieflyintroducedthemethodsofvisualobservation,indicatorplants,electronmicroscopicmethod,sero-logicaldetectionandmolecularbiology,etc.Ttalsoprovidedabriefevaluationoncachmcthod.Keyword:potato;virusdetection;techn
4、ique;Received:2017-09-28目前对马铃薯产量和品质有影响的马铃薯病毒病有20多种,其中6种马铃薯病毒是我国目前检测马铃薯病毒的必检项目,包括马铃薯卷叶病毒(PLRV)、马铃薯X病毒(PVX)、马铃薯Y病毒(PVY)、马铃薯S病毒(PVS)、马铃薯M病毒(PVM)、马铃薯A病毒(PVA),此外还有一种马铃薯纺锤块茎类病毒(PSTVd)属于类病毒类,也是必检测的指标丄U。马铃薯病毒病会造成减产10%飞0%,严重的其至可以达到80%以上。由于病毒具有个体小且专性依赖寄主的特性,所以对病毒进行鉴定时技术要求很高。以
5、前常根据病毒在寄主体内寄生后的生物学特性来鉴别,随着分子生物学发展,现在多采用病毒的核酸、病毒蛋白的分子生物学鉴别方法,提高了病毒鉴定的准确性及1。1观察鉴定法观察鉴定法是根据不同病毒寄生在马铃薯植株上以后,植株将会表现出不同的症状,通过直接观察植株症状来初步判断是否感染病毒的一种方法。植株感染病毒后在田间所表现岀的特征症状经常还会受到寄主的品种、寄主的生育期、外界环境、病毒种类等方面因素的影响,所以该方法的准确适用会受到观察者实践经验的影响,只有观察者具备丰富实践经验才能做岀准确判断,该方法只能起初步识别的作用,不能就此下最
6、终结论固。此方法简便易行,不需要设备,但是要求鉴定者具有丰富的实践经验。2指示植物法指示植物指的是能够对马铃薯某一种病毒具有过敏反应,被这种马铃薯病毒感染就能很够快速表现出特定症状的一类植物,即鉴别寄主植物。该方法需要取待鉴定病株的任何组织部分进行研磨制成汁,然后通过石英砂摩擦或者采用嫁接的方法将其接种到指示植物上,等到表现出症状后进行观察,根据只是植物的症状反应來初步判定所接种待检病株含有的病毒种类凶1。该方法操作简单,无需贵重的仪器设备和药品,只要具有一定的空间和隔离条件,操作者具有丰富的症状判断经验就可实现,多数种薯生产
7、者自己就能操作。但是,其存在主要问题是培育指示植物需要一定的时间,需要提前准备;指示植物需要占据一定的空间,要求提供一定的场地;另外,该方法灵敏度不够高,所以同样也不能作为最终鉴定的结果;不适用于鉴定大批量生产马铃薯试管苗,多应用在鉴定病毒株系上,或者是在分子生物学鉴定Z前进行的初步鉴定。3电镜检测法电镜检测法是利用电子显微镜来观察待检样品中是否含有某种病毒。电子显微镜是通过电磁波作为光源,把感病植物的组织制成样木,直接进行观察,依据病毒的大小、形态,以及一些典型的超微结构等来判断病毒的存在和种类。洪健等人固利用电子显微镜观察
8、烟草花叶病毒(TMV)以后,电子显微镜逐步发展成为研究植物病毒的常规手段。电子显微镜的分辨率非常高,甚至可以高达0.1nm。但是由于电子束的穿透力比较低,这就对样品的厚度有特殊要求,要求样品厚度必须在10~100nm。常用的电子显微镜检测法主要有负染技术和免疫电镜技术。负染技
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